收藏本站
《中国人民解放军第一军医大学》 2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

白藜芦醇对大鼠急性脊髓损伤后的神经保护作用与机制

杨迎暴  
【摘要】: 目的 利用在体大鼠急性脊髓损伤(SCI)模型,研究SCI后使用白藜芦醇(resveratrol,Res)对继发性脊髓水肿、受损局部组织结构的形态学、乳酸(LD)、乳酸脱氢酶(LDH)、Na~+,K~+-ATP酶活性、Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性、Ca~(2+)、Mg~(2+)离子水下、自由基水平与脂质过氧化反应、超氧化物歧化酶(SOD)、神经微丝蛋白(NTF)、微管相关蛋白2(MAP2)及微管相关蛋白Tau(Tau)的影响。同时,通过体外培养脊髓神经细胞并制成细胞损伤模型,研究Res的神经细胞保护作用机制。 方法 在体内实验中,采用重物下落撞击法(weight-dropping)制备成年大鼠的脊髓损伤模型。于损伤后即刻腹腔注射给予Res 50mg·kg~(-1),100mg·kg~(-1)或甲基强的松龙(MPSS)100mg·kg~(-1),观察给药后1h、24h、48h时各组受损脊髓组织含水量、LD、LDH及Na~+,K~+-ATP酶活性、Ca~(2+)-ATP酶活性、Mg~(2+)-ATP酶活性、Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性、Ca~(2+)、Mg~(2+)离子水平、活性氧(ROS)水平、氧自由基清除剂SOD活性与脂质过氧化反应产物丙二醛(MDA)的变化,同时对组织形态学结构超微变化和神经细胞骨架蛋白的变化进行观察。其中,组织含水量的测定采用干重法;LD、LDH及Na~+,K~+-ATP酶活性、Ca~(2+)-ATP酶活性、Mg~(2+)-ATP酶活性、Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性、ROS、SOD与MDA测定均采用根据特定方法设计的试剂盒:Ca~(2+)、Mg~(2+)离子水平测定采用原子吸收法;组织形态学实验采用电子显微镜观察法;神经细胞骨架蛋白含量测定采用Western blotting。 在体外实验中,以H_2O_2损伤培养的脊髓神经元制备过氧化损伤模型,观察Res 1 μmol/1-20 μmol/1对受损伤神经元生长活性、细胞Ca~(2+)水平、超氧自由基、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响。 其中,MTT法和流式细胞术用于观察细胞生长活性情况;荧光分光光度 法、化学发光法分别用于测定ca2+、超氧自由基;No和Nos采用根据 特定方法设计的试剂盒进行测定。 结果体内实验通过重物下落撞击法成功制备成年大鼠的SCI模型,其 不仅使受损局部的组织水肿,还引起组织形态学结构的明显改变和具有 显著统计学差异的能量代谢系统障碍、自由基产生与脂质过氧化反应活 跃、部分电解质水平紊乱和c犷斗,Mg2+-ATp酶活性等微环境变化以及神 经细胞骨架蛋白含量的改变。因此,这种SCI模型可以应用于Res的药 效学研究。 Res能够显著抑制scl后继发性水肿。scl后lh时,Res 50 mg·掩“, 100 mg·吨一,及MPss对组织含水量无明显影响;Res 100 mg·kg-,在 24h与48h均可明显减少组织含水量(尸0.05),但MPSs组均无统计 学意义,提示Res对SCI后脊髓组织水肿有明显的减轻作用,且山抑制 率可见,随着时间的延长,Res对水肿的抑制率逐渐增强,以48h时作 用最明显,其100 mg·kg一,组的抑制率在11.5%左右。电子显微镜的结 果表明,ReS和MPSS均能有效保护 SCI后脊髓组织的超微形态结构的 正常性,lh,24h,48h的所有样本均未见严重的组织形态学改变,神经 丝基本正常,特别是在24h与48h的样本中神经丝密度几乎与正常无异, 髓鞘层的排列规律,神经元改变也非常微小,偶见胞浆中有轻度水肿和 极少的较大空泡,基本结构与正常极其相似,而且细胞器无明显变性, 形态正常的线粒体其峭清晰可见,仅见少数线粒体有肿胀或少峭现象, 细胞核基本正常。 Res可以抑制sCI后受损局部LD、LDH水平的升高和Na+,K+.ATp 酶活性的降低,提示其对SCI所造成的组织细胞能量代谢系统损害有改 善作用。ReS 50 mg·kg一‘,1 00 mg·kg一‘及MPss对sel后lh的受损局 部组织LD均有一定程度的降低,但无统计学意义,在24h与48h时, 两药则均显著降低受损局部LD水平(尸0.01);sCI后lh、24h时, 与模型组相比,Res 50mg·叮,组和MPss组的LDH水平均显著性降低 (p0.05),Res 100 mg·kg-‘组在24h、4sh有非常显著差异(尸0.01), MPSS组在48h时无显著性影响;在SCI后lh时,Res与MPSS对Na气 K+魂Tp酶活性无显著影响(尸0.05);24h时砒s一00 mg·kg-‘与MPss 均对Na+,K+一开酶活性有显著影响(p0.05);4sh时,既5 100 mg’kg-‘组对Na+,K+.ATP酶活性有显著改善作用(尸0.01),MPss无 影响。 scl后脊髓受损局部的c扩十、M犷十离子水平、c扩十~ATP酶、M犷十一TP 酶及c扩十,M扩十一TP酶活性均发生显著性孪化,Res 1 00 mg·kg-,对这些 指标均表现出明显的调节和改善作用。 SCI后脊髓受损局部的氧自由基水平明显升高,脂质过氧化反应显 著激活。Res 50 mg·kg一,与1 00 mg·kg-,均能够显著提高scl后损伤部位 soD水平和抑制脂质过氧化反应产物MDA生成(尸0.01),特别是在 48h时作用最为明显;同时,Res显著降低Ros水平(尸0,01),也以 48h作用最强,抑制率大于40%,且有明显剂量依赖性,作用与MPSS 相当或更优。 此外,实验结果表明, SCI可以使神经细胞的骨架蛋白包括NTF、 MAPZ及Tau受损,使之在急性期中含量明显减少,而Res和MPSS均 可以有效防止上述细胞骨架蛋白的降解。 体外实验中,H20:200 pm。
【学位授予单位】:中国人民解放军第一军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R285.5

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙冰,蔡钦林,张立;急性脊髓损伤后脊髓诱生型一氧化氮合酶的表达和调控[J];北京大学学报(医学版);2001年05期
2 刘兆平,霍军生;白藜芦醇的生物学作用[J];国外医学(卫生学分册);2002年03期
3 赵克森;白藜芦醇的一般生物学作用[J];国外医学(卫生学分册);2002年06期
4 胡跃;白藜芦醇抗肿瘤作用研究新进展[J];国外医学(肿瘤学分册);2002年03期
5 卢步峰,鲁友明,黄诒森;蛋白激酶C对大鼠缺血海马突触体谷氨酸摄取的调控作用[J];生物化学杂志;1994年03期
6 赵霞,陆阳,陈泽乃;白藜芦醇的化学药理研究进展[J];中草药;1998年12期
7 许翔,江曙;脊髓损伤后自由基变化及丹参对自由基影响的实验研究[J];中国骨伤;1999年05期
8 申才良,江曙,董英海,张巽;自血光量子疗法对兔脊髓损伤后镁含量的影响[J];中华物理医学杂志;1998年01期
9 董丽萍,王天佑,徐立新,张莉;慢心律和苯妥英钠对小鼠缺氧及脑缺血的保护作用[J];中华神经外科杂志;1990年S1期
10 孙冰,蔡钦林,张立;急性脊髓损伤后诱生型一氧化氮合酶的表达、分布及作用[J];中国脊柱脊髓杂志;2002年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙雪平;李冠武;傅玉才;温博贵;;白藜芦醇对人食管癌EC109细胞的生长抑制及诱导凋亡作用[J];癌变.畸变.突变;2007年04期
2 李燕;戴佳锟;祁洋;王永智;尉亚辉;;白藜芦醇的药理作用及其合成途径研究进展[J];安徽农业科学;2009年11期
3 李勇;马荣;苏燕燕;李敏;王玉炯;;白藜芦醇对肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用[J];安徽农业科学;2010年25期
4 任彦荣;吴洪斌;;白藜芦醇的检测手段及药理作用[J];安徽农业科学;2012年02期
5 扶庆权;李健;徐鉴;;正交试验法优化花生白藜芦醇的提取工艺[J];安徽农业科学;2012年14期
6 付招娣,曹玉,王凯风,徐少锋,韩锐;白藜芦醇对癌的化学预防作用[J];癌症;2004年08期
7 赵权;;山葡萄生长过程中不同组织部位白藜芦醇含量的变化[J];北方园艺;2012年03期
8 王慧敏,谭明生,杨洪艳,移平,陈博来,邓晋丰;脊椎治疗方治疗大鼠脊髓损伤的实验研究[J];中国医药学报;2003年04期
9 梁朝革;陶琨;佐雪梅;王奕;;去铁敏对损伤脊髓一氧化氮合酶表达的影响[J];创伤外科杂志;2008年02期
10 蒋昊;徐立;刘峻池;黄先智;;药桑的生物活性成分及药理作用研究进展[J];蚕业科学;2011年01期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 黄骐;林建丽;王冰梅;叶冰莹;陈由强;陈如凯;;农杆菌介导花生白藜芦醇合酶基因转化马铃薯的研究[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
2 任宪盛;杨有庚;;丹参对大鼠实验性脊髓损伤的保护作用[A];第十三届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 彭晓琳;白藜芦醇数据库建立、深圳居民摄入量评估及生物效应、代谢学研究[D];华中科技大学;2011年
2 翟吉良;白藜芦醇对兔激素性骨坏死预防作用的实验研究[D];北京协和医学院;2011年
3 晁晓东;缺血再灌注脑损伤后蛇床子素的作用及机制研究[D];第四军医大学;2011年
4 王海钠;人UGT2B7和UGT1A9单核苷酸多态性对一些药物选择性葡萄糖醛酸化代谢的影响[D];浙江大学;2011年
5 许能贵;针刺对脑缺血后神经元损伤保护作用的研究[D];广州中医药大学;2001年
6 王慧敏;中药治疗急性脊髓损伤的实验研究[D];广州中医药大学;2001年
7 王锡三;硬膜外腔复合液注射对实验动物的影响[D];重庆医科大学;2002年
8 李景明;葡萄采后白藜芦醇的诱导与酿造工艺对葡萄酒中白藜芦醇的影响[D];中国农业大学;2003年
9 林海;白藜芦醇抗肿瘤作用的实验研究[D];吉林大学;2004年
10 洪志哲;白藜芦醇抗Friend型鼠艾滋病(MAIDS)的实验研究[D];广州中医药大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 彭浩;秦巴山区虎杖中产白藜芦醇(苷)内生真菌的分离鉴定[D];华中农业大学;2010年
2 罗丽媛;葡萄细胞系白藜芦醇的合成动态及其代谢调控研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 沈振东;毛脉酸模内生真菌体外抗肿瘤活性菌株筛选及其生物学特性研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
4 贾丹丹;毛脉酸模内生真菌抗肿瘤药效及其生物学特性的研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
5 刘博;毛脉酸模根提取物的毒性试验研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
6 洪美花;分子印迹聚合物微球的制备及特性评价[D];青海师范大学;2010年
7 林世德;促神经再生因子复合剂N6治疗脊髓损伤的疗效初步观察[D];泰山医学院;2010年
8 庞红勋;本土葡萄酒酵母的选育及低醇葡萄酒的酿造[D];石河子大学;2010年
9 周艺;白藜芦醇对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑保护的剂量依赖性作用[D];安徽医科大学;2011年
10 赵愉快;虎杖甙的提取、分离、纯化及酶解研究[D];湖南农业大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙冰,蔡钦林,张立;急性脊髓损伤后脊髓诱生型一氧化氮合酶的表达和调控[J];北京大学学报(医学版);2001年05期
2 孟庆礼;原子吸收光谱法测定生物材料中微量元素的前处理问题[J];第一军医大学学报;1992年01期
3 马丽英,王孝铭,张国义;丹参制剂对缺血心肌腺苷酸代谢的影响[J];哈尔滨医科大学学报;1986年03期
4 张力,王孝铭,梁殿权;丹参素对缺血再灌注时大鼠心肌线粒体膜的保护作用[J];哈尔滨医科大学学报;1989年04期
5 杨卫东,朱鸿良,赵保路;丹参的氧自由基清除作用[J];中国药理学通报;1990年02期
6 梅美珍,庄庆祺,刘桂贞,解婉缙;降胆固醇药物快速筛选法的研究[J];药学学报;1979年01期
7 冯亦璞,孙亚丁,陈宝泰,叶刚,曾贵云;小鼠脑缺血后的能量代谢改变和药物的作用[J];药学学报;1989年02期
8 李怡棠,钟淼,邓永江,朱秀媛,程桂芳;IV型变态反应中白细胞介素6的表达及白藜芦醇的抑制作用[J];药学学报;1999年03期
9 吴翔,汤健;镁在缺血性心脏病中的意义[J];中国病理生理杂志;1992年01期
10 徐志红,刘星,徐光;蛇葡萄根化学成分的研究[J];中国中药杂志;1995年08期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 汪家贵,汪涛,王洪云,王明锁,朱浴宇;SOD 对受照射小白鼠的保护作用[J];辐射防护;1984年04期
2 黄永谦;超氧自由基、超氧化物歧化酶与复发性口疫[J];临床口腔医学杂志;1994年01期
3 聂素洁,王惠娴,孙非;口腔扁平苔癣与脂质过氧化物含量及超氧化物歧化酶活性关系的研究[J];现代口腔医学杂志;1996年02期
4 彭文鸿,黄念秋,毛宝龄,邹霞英;超氧化物歧化酶和过氧化氢酶对大鼠急性肺损伤的预防作用[J];解放军医学杂志;1996年05期
5 杨明华;氧自由基在牙周炎患者龈组织中作用的研究[J];实用口腔医学杂志;1996年04期
6 桑雁,韩清,王宪波,郭宝瑞,单春光,谷振勇,孔祥梅;大黄抗衰老作用的实验研究[J];新乡医学院学报;1996年01期
7 马璟,王传功,张春芬,凌秀珍;实验性胃溃疡形成过程中大白鼠体内SOD活力的变化[J];济宁医学院学报;1995年03期
8 郑纯波,王智兴;SOD在临床的应用[J];上海第二医科大学学报;1995年S1期
9 宋道军,徐登益,万兆良,何首林;修复抑制剂对不同敏感性作物超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶活性的影响[J];核农学报;1997年02期
10 孙淑斌,卢元芳,刘常金,王转斌;大蒜鳞茎SOD的分离纯化[J];曲阜师范大学学报(自然科学版);1997年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈纯白;都霞;赵乐萍;王林;吴淑娟;潘建春;;白藜芦醇拮抗围绝经期抑郁模型小鼠的行为异常及机制研究[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
2 王光丽;周小辉;傅玉才;;白藜芦醇改善肝细胞脂肪变性的相关调节机制[A];第十八次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2009年
3 杨静玉;孟雪莲;陈国良;张丽佳;赵思奇;王笑笑;连国宁;吴春福;;白藜芦醇及其衍生物抑制小胶质细胞活化的作用研究[A];第十届全国抗炎免疫药理学学术会议论文集[C];2010年
4 都霞;陈玲;林蒙蒙;王林;潘建春;;白藜芦醇对围绝经期模型小鼠的抗抑郁及神经保护作用[A];中国药理学会第十一次全国学术会议专刊[C];2011年
5 白斌;赵彦鼎;梁凉;李聪;申烨华;;高浓度琼脂糖凝胶微球分离纯化白藜芦醇[A];中国化学会第28届学术年会第9分会场摘要集[C];2012年
6 王俊芳;刘春艳;吴本宏;范培格;段伟;李绍华;王利军;;利用UV-C辐射处理研究白藜芦醇在葡萄器官或组织中的积累和运输[A];中国园艺学会2011年学术年会论文摘要集[C];2011年
7 吕秋军;温利青;陈振花;郭绍明;叶棋浓;任建平;;白藜芦醇的雌活性研究[A];中国药理学会毒理专业委员会第十次学术会议论文摘要汇编[C];2004年
8 贾德安;周玉杰;朱鹏立;阮景明;沈阳辉;俞兆希;;白藜芦醇对血管内皮细胞CD40途径的影响[A];第十三次全国心血管病学术会议论文集[C];2011年
9 陈明亮;张桂英;李吉;简丹;谢红付;陈翔;;白藜芦醇对UVA辐射皮肤成纤维细胞增殖及iNOS表达的影响[A];2009全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2009年
10 廖章萍;邹逢琳;尹淑华;汤蕾;刘丹;何明;;C1-参与白藜芦醇抗心肌细胞缺氧复氧损伤保护作用的研究[A];第八届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 王迪;白藜芦醇渐入补充剂行业法眼[N];医药经济报;2009年
2 刘霞;新方法可分离出大量白藜芦醇[N];科技日报;2011年
3 邹永;风中把盏 笑谈白藜芦醇[N];医药经济报;2003年
4 张中桥;第四军医大学西京医院研究表明:白藜芦醇具有脑保护作用[N];中国医药报;2005年
5 张中桥;藜芦醇具有脑保护作用[N];中国中医药报;2006年
6 ;白藜芦醇的生物学作用研讨会在京举行[N];北京科技报;2002年
7 周为华;白藜芦醇有抗艾滋病病毒作用[N];中国医药报;2006年
8 ;雷氏专家谈SOD(超氧化物歧化酶)[N];上海中医药报;2004年
9 记者 李志峰 通信员 柏昌云;国内最大白藜芦醇生产线黔江投产[N];重庆日报;2010年
10 徐铮奎;美国加快开发出新型“保健饮品”[N];中国医药报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨迎暴;白藜芦醇对大鼠急性脊髓损伤后的神经保护作用与机制[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
2 王晓娟;肌萎缩侧索硬化脊髓器官型培养模型的研究[D];河北医科大学;2004年
3 舒晓宏;白藜芦醇在原发性脑肿瘤中的代谢特点、活性形式、作用靶点及其与抗癌效果的关系[D];大连医科大学;2010年
4 彭晓琳;白藜芦醇数据库建立、深圳居民摄入量评估及生物效应、代谢学研究[D];华中科技大学;2011年
5 徐强;高糖诱导血管内皮功能障碍的分子机制及白藜芦醇的干预作用[D];第三军医大学;2010年
6 敦洁宁;5-氟尿嘧啶联合白藜芦醇的抗肿瘤作用研究[D];河北医科大学;2011年
7 苟小军;超氧化物岐化酶的定向进化[D];东北师范大学;2002年
8 张瑶;白藜芦醇对宫颈癌侵袭的影响及其分子机制的研究[D];中国医科大学;2010年
9 李东升;白藜芦醇对恶性黑素瘤抗癌机制的实验研究[D];华中科技大学;2011年
10 翟吉良;白藜芦醇对兔激素性骨坏死预防作用的实验研究[D];北京协和医学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吴国宏;外源性内皮素-1导致的新生大鼠培养心肌细胞损伤[D];青岛大学;2003年
2 任俊伟;白藜芦醇对局灶脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及机制研究[D];重庆医科大学;2011年
3 闻剑飞;补充白藜芦醇对小鼠运动性骨骼肌微损伤修复的影响[D];河北师范大学;2010年
4 王莉莉;大孔吸附树脂分离虎杖中白藜芦醇的研究[D];长安大学;2010年
5 孔晓霞;白藜芦醇对大鼠卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响及其相关调控机制研究[D];汕头大学;2010年
6 张瑞;白藜芦醇抗真菌作用及其机制研究[D];河北医科大学;2011年
7 贾美玲;浆果类水果生物活性成分分析[D];辽宁师范大学;2010年
8 张硕;白藜芦醇和木樨草素对小鼠乳腺癌的抗转移作用[D];河南大学;2010年
9 孙焕顷;芦荟(Aloe)超氧化物歧化酶的分离纯化与性质研究[D];西南师范大学;2003年
10 赵赛;白藜芦醇对2型糖尿病大鼠胰岛细胞保护作用及其机制的研究[D];河北医科大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026