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《第一军医大学》 2004年
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补阳还五汤对实验性脑缺血损伤保护作用的机制研究

廖春来  
【摘要】:目的:探讨补阳还五汤对实验性脑缺血损伤保护作用的机制。 方法:1.观察补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠模型病理改变的影响;大鼠局灶性脑缺血模型由栓线法阻塞大鼠大脑中动脉(MCAO)制成,观察神经体征改变,用TTC和HE染色观察脑组织病理学形态变化,图像分析软件计算其梗塞体积;2.从NO-NOS机制探讨补阳还五汤对实验性脑缺血早期保护的作用;用硝酸还原酶法检测NO含量,NOS试剂盒紫外分光光度法测定NOS活性;3.观察补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血nNOS免疫阳性神经元表达的影响;用免疫组化SABC法测定大鼠局灶性脑缺血后不同脑区及不同时间段nNOS免疫阳性神经元表达的变化。4.初步探讨补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血细胞凋亡及相关基因表达的影响。用Hoechst荧光染色计数神经元细胞凋亡数目,半定量逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)测定大鼠脑缺血半暗区Caspase-3 mRNA的表达。 结果:1.大鼠局灶性脑缺血模型后,缺血灶体积和病理改变随缺血时间延长而不断扩大和加重,神经体征评分无显著性差异(p>0.05),补阳还五汤((12.96g/kg体重))能显著性减少脑缺血后梗塞灶体积,改善病理学形态变化,以缺血4h以上作用更为明显。2.缺血后脑组织内NO含量和NOS活力显著性升高(p<0.05)以缺血4h达峰值,补阳还五汤能显著抑制缺血后升高的NO和NOS(p<0.05)起脑保护作用,以缺血4h抑制作用最明显;3.大鼠脑缺血侧半球各脑区nNOS免疫阳性神经元表达较正常对照组显著性升高(p>0.05),随时间延长而递增,不同的脑区表达的程度有不同。在大脑皮层纹状区与尾壳核表达增加程度最高。补阳还五汤组nNOS免疫阳性神经元比模型对照组显著性降低(p<0.05),早期即起效,并随缺血时间延长而递增。4.Hoechst荧光染色显示模型组脑缺血半暗区细胞凋亡数目较假手术组显著性增加,补阳还五汤预给药能降低脑缺血半暗区的神经元细胞凋亡数目,RT-PCR显示Caspase-3 mRNA的表达在 缺血24h显著性升高,补阳还五汤能抑制CasPase-3 mRNA的表达,但 高、低剂量组间无差异印0.05)。 结论:1.补阳还五汤能明显缩小实验性脑缺血的缺血梗塞灶体积, 改善病理学形态变化。2.补阳还五汤能抑制缺血后脑组织内NO含量和 NOS活性的升高,对缺血脑组织具有保护作用。3.补阳还五汤能抑制脑 组织缺血后早期表达的nNOS活性,对脑缺血早期具有保护作用。4.补 阳还五汤能抑制局灶性脑缺血半暗区的神经元细胞凋亡和Caspase一3 mRNA的表达。
【学位授予单位】:第一军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R285

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【参考文献】
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