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《第一军医大学》 2004年
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维生素E对透析病人氧化应激的干预

武强  
【摘要】:[目的]慢性肾功能衰竭(CRF)病人循环氧化物质水平升高,异常升高的氧化水平及其造成的生物效应称为氧化应激状态。目前研究已经证实,氧化应激与透析相关的疾病,特别是心血管疾病(CVD)、β_2-微球蛋白相关淀粉样变(β_2M-A)的发生发展有密切关系,而前者是终末期肾病(ESRD)病人的常见并发症和主要死亡原因。在透析病人体内存在氧化应激产生的条件,如透析膜的生物不相容性,抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)、硒含量下降,抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)、超氧化物歧化酶(SOD)活性降低等,因此,补充抗氧化剂对改善透析病人的氧化应激状态,降低心血管疾病发病率可能会有益处。维生素E作为体内重要的抗氧化剂,广泛分布于各种组织器官的生物膜上,当机体生物膜受到氧化剂攻击时,维生素E首先被消耗,使组织器官免受损伤,从而维护了生物膜上一系列反应的正常进行。国外已有报告服用大剂量维生素E可以降低血液透析和CVD病人的心血管事件发病率和死亡率,使用维生素E修饰的透析膜可以降低病人体内的LDL水平和动脉钙化程度。 晚期氧化蛋白产物(AOPP)为Witko-Sarsat等于1996年首先描述,是血液透析病人体内发现的具有二酪氨酸结构、酸性条件下光密度在340nm有吸收高峰的氧化修饰蛋白产物。后续研究发现,AOPP在肾功能衰竭早期已有明显的升高,随肾小球滤过率的下降而逐渐升高,在血液透析病人体内达到最高峰,且比较持续稳定。另外,AOPP在体外试 验能激发中性粒细胞和单核细胞的“呼吸爆发”反应,是慢性肾衰病人 体内氧化应激的敏感标志物和炎症中介物。Witko一Sarsat等在血液透析病 人中的研究还发现,循环AOPP水平与颈动脉内膜中层厚度密切相关Is]。 H记eaki Kaneda在冠心病人群的研究发现,冠心病人群的循环AOPP较 正常对照明显升高,AOPP水平与冠心病的严重程度明显相关,是冠心 病的独立危险因素I0]。因此AOPP成为本研究的一个主要观察指标。而 丙二醛(MDA)、谷肤甘肤过氧化物酶(GHSPx)则分别是反映脂质过 氧化物、抗氧化酶系统的稳定指标也列入了研究。本研究的目的是了解 长期透析病人的氧化应激状态,以及口服不同剂量维生素E对透析病人 氧化应激状态的干预效果。 [方法]1、病例选择:维持性血液透析病人56例(男32例,女24 例)和CAPD病人4例(男2例,女2例),血肌配水平966.4士73.2阳ol/L (754.6~1215.1腼01/L),年龄52.6士16.7岁(16~84岁)。选取本科 室工作人员和门诊健康查体人员共66例(男31例,女35例)成人为正 常对照组,平均年龄49.4士17.8岁(21一83岁)。 2、干预方法:首先检测了66例健康成人的血清AOPP、MDA、GSHPx 和维生素E(VitE)浓度,制定其血清浓度正常参考值;同时,检测了 60例接受血液透析(HD)和持续性非卧床腹膜透析(CA卫D)治疗(至 少4月)的ESRD病人血清AOPP、MDA、GSHPx和VitE的浓度。然 后,观察这60例透析病人1个月,检测血清AOPP、MDA、GSHPx和 VitE水平有无变化,确定ESRD病人是否处于稳定的氧化应激水平。最 后,将透析病人随机分为2组(每组30例),分别给予不同的干预措施: (l)小剂量组口服Vit E Zoom留日,(2)大剂量组口服Vit E 400m留日。 服药1个月后复查其血清AOPP、MDA、GSHPx和VitE水平。统计采 用独立样本t检验、配对t检验比较各组治疗前后上述指标的变化。均以 P0.05为有统计学差异。 3、样本测定:全部观察对象均于晨起透析前采静脉血,不抗凝,低 温离心血清一70℃贮存备检。AoPP测定:取血清样本5伽1,用PBs10倍 稀释至50伽l,PBS50伽l做空白对照;1300orpm离心1小时(4℃);抽 取表层血脂以下液体10伽l,加入1咖l冰醋酸混匀,作为空白调零;340nm 比色测定样本OD值。脂质过氧化指标MDA测定:以四乙氧基丙烷做 标准,采用硫代巴比妥酸反应法[‘0]。抗氧化指标GsHPx活性测定:二硫 代双硝基苯甲酸比色法111]。vitE测定:菲罗琳还原法。 [结果]1、健康成人血清AoPP、MDA、GSHPx和VitE水平分别 为31.5士6.5声mol/L、3.80士1.10产mol/L、219.2士52.2U/L及12.80士2.34 u留ml,而透析病人分别为72.5士14.和mol/L、5.58士2.36召mol/L、216.5 士22.7U/L和10.31士1,58ug/ml,和健康成人比较AopP、MDA水平升高, 而GSHPx和VitE水平下降,均有显著性差异(P0.01)。 2、透析病人未服药干预观察1个月,血清AOPP、MDA、GSHPx 和VitE水平分别为72.6士13.知mol压、5.90士2.4知mol压、 123.6士19.0u/L 及10.41士1.67 ug/ml,与1个月前比较无显著性差异(p0.05)。 3、小剂量组服药前血清AOPP、MDA、GSHPx和VitE平均水平分 别为72.4士14.即mol/L、5.80士1.6取mol/L、114.6士Zo.6U/L和10.38士 1.91ug/ml;服药干预后的水平分别为70.2士15.伽mol/L、5.67士 1·11群mol/L·123·3士21.0U/L和15.09士2.37ug/ml。服药前后比较除维生 素E(P0.01)外均无统计学差异。 4、大剂量组服药前血清AOPP、MDA、GSHPx和VitE平均水平分 别为72.8士11.彻mol/L、6.00士1.1伽mol几、112.6士17.6U/L和10.43士 1.44u岁ml;服药干预后的水平分别为66.8士13.即mol/L、5.85士 1.7如mol/L、128.2士Zs.gu/L和15.13士2.SOug/ml。服药前后
【学位授予单位】:第一军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R692.5

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