晚期糖基化终产物对心肌细胞胞内游离钙浓度的影响及其机制
【摘要】：研究背景:晚期糖基化终产物(Advanced glycaton end products,AGEs,又称糖基化终极产物)是体内蛋白质的氨基部分、脂类或核酸与还原糖的羰基在无酶的条件下发生反应,形成Schiff碱,经Amadori反应重排后形成的相对稳定的糖基化产物,近年对其研究表明,AGEs在动脉粥样硬化、高血压、糖尿病心肌病等疾病发生中起重要作用且与Ⅰ型糖尿病人左室舒张功能减退有关。我们早期的研究工作发现了AGEs可以明显增加心肌细胞的凋亡率,并与时间、剂量呈正相关,抗晚期糖基化终产物受体(receptor of advanced glycaton end products,RAGE)抗体以及P38MAPK抑制剂SB203580可以阻滞这种作用,同时发现AGEs孵育可以引起心肌细胞自分泌血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)增加,Ang Ⅱ受体AT1拮抗剂络沙坦可以拮抗AGEs诱导心肌细胞凋亡的作用,并发现了在慢性肾功能衰竭的SD大鼠模型,慢性外源性AGEs灌注可导致心脏左室舒张功能减退。AGEs对心肌细胞的损伤中是否牵涉到胞内游离钙离子浓度的改变及其作用机制的研究尚少见,探明AGEs对心肌细胞胞内游离钙的作用及其机制可能为临床治疗提供新的靶点。
目的:以体外培养的SD乳鼠心肌细胞(cardiac myocytes,CMs)为对象,应用细胞培养、荧光钙离子指示剂Fluo-3/AM和激光共聚焦显微镜(Laser Scan Confocal Microscope,LSCM)技术、免疫印迹等方法测定AGEs刺激对培养的乳鼠心肌细胞胞内游离钙浓度的变化及肌浆网2型钙泵(sarcoplasmic reticulum
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