收藏本站
《第一军医大学》 2005年 博士论文
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

神经干细胞培养、增殖、迁移和分化的研究

段发亮  
【摘要】:第一部分 神经干细胞培养、分化和鉴定 目的 探讨体外分离培养大鼠纹状体神经干细胞的培养方法以及神经干细胞的鉴定。方法 选用第一军医大学实验动物中心提供的普通级健康成年Sprague-dawley(SD)大鼠,合笼怀孕后取孕13-14天大鼠胚胎的纹状体,制成单细胞悬液,显微镜下细胞计数,以1×10~4/cm~2接种到24孔培养板上,分为对照组和实验组,对照组加入DMEM-F12,实验组除基本细胞培养液外同时加入20ng/ml表皮生长因子(EGF)和20ng/ml碱性成纤维生长因子(bFGF)。结果 倒置显微镜下每天观察神经干细胞的生长状况,可见实验组培养24h后大量活细胞均匀分布,大量成纤维细胞沉于培养瓶底,部分细胞悬浮于培养液中,细胞成对出现者较多,并可见细胞分裂相;72小时后出现许多4-6个细胞聚集形成的细胞团;5天后出现许多大小不等的细胞集落,每个集落由数十个或数百个细胞组成,即神经球。神经球呈悬浮生长,细胞排列紧密,部分细胞球由于营养缺乏中间可见坏死。对照组无细胞增殖生长。将实验组中漂浮的细胞球制成单细胞悬液后自然沉降分化,免疫组化结果提示培养的细胞球Nestin染色阳性,分化3天后部分细胞为神经细胞、部分细胞为星形胶质细胞。结论 我们培养的细胞球能够自我增殖并分化为神经细胞和星形胶质细胞,是神经干细胞,再将培养的漂浮神经干细胞球制成单细胞悬液用于其它实验研究。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 郑学胜,朱晓峰;抗体封闭膜受体方法在神经干细胞研究中的应用[J];黑龙江医药科学;2002年05期
2 谷海刚,龙大宏,冷水龙;新生鼠基底前脑神经干细胞的分离和培养[J];解剖学研究;2003年02期
3 祝胜;神经干细胞在脑外伤中的治疗前景[J];现代诊断与治疗;2003年01期
4 张卿,左萍萍;神经干细胞诱导分化的研究进展[J];中国康复理论与实践;2003年07期
5 何扬东,曾进胜;脑缺血后内源性神经干细胞活化的研究进展[J];中国脑血管病杂志;2004年05期
6 赵宇,吕刚;神经干细胞与脊髓损伤的修复研究现状与展望[J];解剖科学进展;2005年01期
7 周向阳,邓永文,方芳,伍军,李茗初,高峻玮,柳浩然,方加胜;星形胶质细胞诱导神经干细胞定向分化试验研究(英文)[J];中国医学工程;2005年03期
8 张全斌,黄强,兰青;脑肿瘤干细胞的热点问题及研究进展[J];中华医学杂志;2005年26期
9 ;神经干细胞能修复受损脊髓[J];生命世界;2005年11期
10 徐南飞;;干细胞在神经系统疾病治疗中的应用[J];神经疾病与精神卫生;2007年05期
11 牟科杰;刘艳辉;;神经干细胞和肿瘤干细胞在胶质瘤病因研究中的进展[J];华西医学;2009年02期
12 刘楠;侯玲玲;曹贵方;关伟军;马月辉;;Aβ_(1-42)对神经干细胞的增殖和分化的影响[J];内蒙古农业大学学报(自然科学版);2010年03期
13 ;外源性信号调控神经干细胞的增殖与分化[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年27期
14 刘仕勇,杨辉;神经干细胞和祖细胞[J];细胞生物学杂志;2000年04期
15 董艳,朱诚,江基尧;成年哺乳动物中枢神经系统干细胞[J];生理科学进展;2001年02期
16 林绿标,章翔,吴景文,李侠,费舟,刘先珍,梁景文;小鼠神经干细胞中一氧化氮合酶的表达[J];第四军医大学学报;2002年23期
17 廖可立 ,姜晓丹 ,王彦惠 ,徐如祥 ,邹雨汐;SD大鼠神经干细胞培养鉴定实验研究[J];解放军医学杂志;2002年11期
18 程映华,梁晶,王晓冬,张沛云,郑祖根,顾晓松;壳聚糖与神经干细胞生物相容性的研究[J];苏州大学学报(医学版);2002年05期
19 田玲;;蛋白可促使神经干细胞移动[J];国外医学情报;2002年09期
20 卞林,惠国桢;决定神经干细胞分化的内外因素[J];江苏医药;2003年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙一睿;胡锦;王尔松;奚才华;姚海军;;单层黏附培养技术在哺乳动物神经干细胞体外稳定增殖和多向分化中的应用[A];中国医师协会神经外科医师分会第四届全国代表大会论文汇编[C];2009年
2 李力;万琪;刘永红;张巍;;小鼠神经干细胞培养及缺血神经元对其增殖、分化的影响[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年
3 田东萍;苏敏;吴贤英;张舸;;硒、B-27在神经干细胞球存活与分化中的作用[A];中华医学会病理学分会2005年学术年会论文汇编[C];2005年
4 杨华静;徐鹏;张苏明;;低浓度β-淀粉样蛋白对神经干细胞的作用机制研究[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
5 文玉军;王登科;孙征;刘海洋;张莲香;秦毅;;成年和老年大鼠脑出血后海马齿状回神经干细胞的变化[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年
6 张波;王任直;;脑梗死后神经干细胞原位增殖及其机理的实验研究[A];中国微循环学会第五届中国微循环学术大会论文摘要汇编[C];2004年
7 邢雪松;吕威力;;Wnt-1在大鼠脑缺血再灌注海马组织内源性神经干细胞早期增殖分化中的作用[A];创新沈阳文集(B)[C];2009年
8 朱慧;李晓红;戚菁;施维;吴信华;陆玉华;鞠少卿;刘炎;;Pax3负性调控神经干细胞分化过程中胶质纤维酸性蛋白的表达[A];2010’全国肿瘤分子标志及应用学术研讨会暨第五届中国中青年肿瘤专家论坛论文汇编[C];2010年
9 李革飞;李剑平;;应用流式细胞术检测神经干细胞表面标志物-Nestin[A];中国输血协会第五届输血大会论文专集(摘要篇)[C];2010年
10 姚立松;刘天庆;葛丹;崔占峰;马学虎;;海藻酸钙微胶珠培养神经干细胞[A];第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郑敏;神经干细胞定向分化与移植治疗帕金森病的实验研究[D];重庆医科大学;2003年
2 卢洪流;成年大鼠脑内神经干细胞的在体研究[D];第二军医大学;2001年
3 李巍;神经干细胞的分化调控及BDNF基因修饰后对大鼠脊髓损伤修复的研究[D];第三军医大学;2002年
4 张力;人胚神经干细胞及骨髓基质细胞移植治疗帕金森病恒河猴模型的实验研究[D];复旦大学;2003年
5 戴宜武;骨髓基质细胞定向分化为神经干细胞及自体移植治疗中脑损伤研究[D];第一军医大学;2002年
6 张所军;神经干细胞向胶质瘤干细胞迁移及对其生长特性的影响[D];华中科技大学;2011年
7 张在金;神经干细胞移植治疗大鼠脑创伤的实验研究[D];第二军医大学;2005年
8 尹丰;人视网膜色素上皮细胞治疗帕金森病的实验与临床研究[D];第二军医大学;2006年
9 谭太贵;多通道PLGA脊髓再生介导管道治疗大鼠脊髓半横断损伤[D];天津医科大学;2006年
10 高国一;胎鼠脑神经干细胞鉴定纯化与生物学特性观察[D];第二军医大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 冯年花;人诱导性多能干细胞向神经干细胞分化的实验研究[D];南昌大学;2010年
2 宋精梅;比较新生大鼠脑部不同部位的神经干细胞被诱导分化为少突胶质细胞的差异[D];福建医科大学;2010年
3 李政;内皮祖细胞调控神经干细胞分化及其机制研究[D];第三军医大学;2010年
4 王念;绞股蓝皂苷对脊髓源神经干细胞体外培养的影响[D];陕西师范大学;2011年
5 刘朋;海藻酸钙/明胶微胶珠的制备及在神经干细胞培养中的应用[D];大连理工大学;2011年
6 郭兵;大鼠羊膜上皮细胞体外向类神经干细胞诱导分化及其移植后对视神经再生的作用[D];第二军医大学;2010年
7 吴珲;神经干细胞玻璃化冻存及其生物学特性的研究[D];大连理工大学;2011年
8 王培福;大鼠神经干细胞的培养和鉴定[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
9 刘孟宇;胶质瘤细胞条件培养基对神经干细胞迁移的影响[D];苏州大学;2010年
10 朱爱萍;重复经颅磁刺激对帕金森病模型小鼠体内神经干细胞增殖的影响[D];河北医科大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 孙国根;神经干细胞并非“全能制造者”[N];中国医药报;2009年
2 时仲省 高思敏;移植神经干细胞 瘫痪兔子可爬行[N];大众卫生报;2001年
3 王成应;能克隆的神经干细胞被分离[N];健康报;2004年
4 刘海英;脑癌源于脑下室区的神经干细胞[N];科技日报;2009年
5 孙国根 白毅;灵长类脑内神经干细胞被发现[N];中国医药报;2011年
6 北京康复中心神经外科 黄红云;神经干细胞之谜[N];健康报;2008年
7 刘霞;美将成人皮肤细胞变成神经干细胞[N];科技日报;2011年
8 沈丽 付钰;神奇的神经干细胞[N];科技日报;2002年
9 记者 吴苡婷;为脑损伤患者治疗打开希望之门[N];上海科技报;2009年
10 刘霞;美培育出能自我更新的神经干细胞[N];科技日报;2011年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978