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《第一军医大学》 2007年
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复制型HBV转基因小鼠的建立、生物学特性、应用及无免疫耐受研究

刘光泽  
【摘要】: 人类乙型肝炎病毒具有严格的种属特异性,一直缺乏理想的动物模型;.通过转基因技术建立HBV转基因小鼠模型,在国内外已被广泛用于乙型肝炎发病机理、抗乙肝治疗和药物筛选评价研究。 作者建立的复制型HBV全基因组转基因小鼠,经不断选育现已稳定遗传20代以上,且可用常规ELISA和荧光定量PCR检测到乙肝病毒在血清中的复制和表达,与国际上普遍认同的由Guidott建立的复制型HBV转基因小鼠相当。该复制型HBV转基因小鼠模型为研究HBV的发病机制研究以及抗乙肝药物开发研究提供了良好的实验动物模型。目前已被国内近百家科研单位应用。本论文的研究内容包括:(1) HBV转基因小鼠模型的建立;(2) HBV转基因小鼠生物学特性;(3) HBV转基因小鼠在抗乙肝药物药效评价中的应用;(4)利用siRNA短暂基因沉默技术制备无免疫耐受HBV转基因小鼠;(5)总结与展望。 第一章复制型1.3copy D基因型HBV转基因小鼠的建立。本实验将1.3copy的D基因型HBV全基因组作为目的基因,采用显微注射技术将其注入小鼠受精卵细胞雄原核,然后将受精卵移植于受体假孕母鼠输卵管内,发育产生子代小鼠。仔鼠尾组织提取DNA进行HBV基因PCR整合检测,再用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清乙型肝炎表面抗原及e抗原,荧光定量PCR检测血清HBV DNA。结果:共获卵数1210枚,注射882枚,存活397枚,成活率45%;移植卵数337枚,受体数14只,怀孕鼠9只,产仔54只,移植成功率为16.02%(54/337),用PCR法检测54只仔鼠尾组织,15只为整合阳性。G0代经血清检测HBVDNA和HBsAg阳性4只;G1代检测61只仔鼠,血清HBsAg阳性13只。可遗传子代Founder2只。定量检测血清中HBsAg表达量为80~930μg/L。取转基因小鼠肝、脾、肾、小肠及股动脉等组织,进行HBsAg、HBcAg免疫组化检测,仅发现肝及肾组织有HBsAg、HBcAg散在不均匀表达。 第二章对已制备获得的稳定传代复制型1.3copy D基因型HBV转基因小鼠的F14-F20代小鼠进行了生物学特性研究。所观察的主要内容包括以下几个方面:(1)乙肝病毒指标复制表达水平及稳定性;(2)免疫学特性及病理观察;(3)乙肝病毒基因在各组织的转录水平;(4)传代培育。 首先,本研究应用ELISA和荧光定量PCR的方法对血清乙肝相关指标进行了分析,发现转基因小鼠血清中存在HBsAg、HBeAg、HBcAg、pre S1及HBV DNA,其中HBsAg的表达水平较高,达5107.5±4144.8IU/ml,个体间有明显的差异但性别之间无显著差异;而HBeAg表达水平较低,仅为(1.94±1.66s/co),血清中存在HBV DNA含量达到10~4~10~6copy/ml。通过超高速离心的方法,在透射电镜下观察到HBV转基因小鼠血清中存在HBsAg颗粒和Dane氏类颗粒,此结果证实了该转基因小鼠中整合的HBV基因组DNA可复制包装成病毒颗粒并分泌入血,本转基因鼠为复制型。 免疫组织化学结果显示:转基因小鼠肝细胞中表达HBsAg和HBcAg蛋白两种病毒蛋白,但并不是所有的肝细胞同时表达HBsAg、HBcAg蛋白。HBsAg分布于肝细胞质中,HBcAg蛋白分布于肝细胞核中。肝组织H-E染色分析发现,转基因小鼠肝组织中未见肝细胞病变。采用流式细胞术和Elispot法对该品系转基因小鼠脾细胞悬液DC的特异性标志CD11c及其上TLR2或其胞内TLR9的表达检测发现,HBV转基因小鼠自身除对HBV病毒存在免疫耐受外,其天然和获得性免疫功能未见异常。利用real-time RT-PCR荧光定量技术对转基因小鼠肝、肾、脾等十余多种组织中的总RNA进行定量检测,分析了HBV基因在转基因小鼠中各组织的转录特征,结果表明转基因小鼠基因组中整合的HBV基因主要在肝、肾组织能够转录出乙肝的mRNA,并以肝组织转录水平最高。 在早期培育阶段,将两个首建鼠(Founder)分别与正常鼠杂交进行传代,在每一世代仔鼠中进行检测发现其阳性率始终保持在40%—50%之间。这说明1.3copyD型HBV已稳定整合表达,并能可靠地遗传给下一代。为增加外源基因的拷贝数,提高阳性率和表达水平,本研究把两个首建鼠分别传代至F14代进行互交并检测互交后生产仔鼠,其阳性率达到80%左右,这说明不同的首建鼠基因的整合位点不同且呈多位点整合,互交后可显著提高阳性表达率。 上述实验结果表明我们建立的复制型1.3copy D基因型HBV转基因小鼠是国内比较理想的乙肝转基因动物模型。 第三章利用HBV转基因小鼠对多种抗乙肝药物进行药效评价研究。(1)抗乙肝病毒复制药物拉咪呋啶或阿德福韦酯可显著降低转基因小鼠血清HBV DNA滴度,停药后HBV DNA又恢复至原来水平,该结果与临床应用药效及国外同类研究结果一致;(2)大剂量乙肝治疗性疫苗的应用可抑制HBV DNA的复制,动物体内IL-2和IFN-γ水平升高;(3)IFN-α1b可显著降低HBV转基因小鼠体内HBV DNA的复制,但5周后药效开始减弱;(4)人源化HBsAg单抗在4小时内可使血清HBsAg滴度迅速下降。上述实验结果与此类药物临床治疗效果相符,说明我们制备HBV转基因小鼠模型不仅可通过临床上经典有效的抗乙肝药物得到验证,而且可用于抗乙肝药物药效评价。这充分证明该转基因动物模型在乙肝发病机制、抗乙肝药物药效评价和新药开发研究中的科学意义及应用价值。 第四章无免疫耐受HBV转基因小鼠的建立研究。由于HBV基因在转基因小鼠胚胎期即表达,导致小鼠对HBV的免疫耐受,不能模拟肝炎患者的肝损伤症状,因而在一定程度上限制其应用。本文利用siRNA暂短基因沉默技术,通过胚胎腹腔或孕鼠尾静脉注射质粒pU6-siHBV11,以期制备无免疫耐受HBV转基因小鼠。该质粒根据siRNA靶点选择的原则,以2.2.15细胞中HBV的序列为基准,在保守区域选出12条序列作为抑制靶点。通过2.2.15细胞和HBV转基因小鼠模型体内抑制实验,从中筛选出一条高效抑制作用的siRNA质粒即pU6-siHBV11。本研究对14天—18天胚胎时期转基因仔鼠RNA干扰,使HBV基因转录启动延迟和抑制。我们对所获实验仔鼠在6月龄进行肝组织病理切片检查,观察到有轻度~中度肝浊肿病变,这为制备无免疫耐受HBV转基因小鼠及乙肝发病机制研究提供新的途径。 第五章总结和展望我们培育出复制型HBV转基因小鼠模型,现已稳定传代20代以上,有多种乙肝指标表达已达到实用阶段,可与国外公认Guidotti建立的HBV转基因小鼠模型相媲美。利用我们制备的HBV转基因小鼠模型现已初步建立抗乙肝药物评价体系,可从DNA、mRNA水平、细胞水平、机体免疫水平对抗乙肝药物进行药效评价和开发抗乙肝新药研究。经典有效的抗乙肝药物对HBV转基因小鼠疗效反证了该动物模型可真实的模拟表现人类乙型肝炎疾病许多生物学特征。通过提高目的基因的拷贝数的育种手段可有效提高转基因仔代鼠的阳性率、表达水平。应用RNA干扰短期基因沉默技术制备无免疫耐受有肝损伤的HBV转基因小鼠,可模拟乙肝患者肝损伤的病理变化。 HBV转基因鼠基础与应用研究结果对慢性乙肝治疗研究具有指导和验证作用。抗乙肝病毒药物结合提高免疫力是慢性乙肝治疗的重要原则。单纯应用抗病毒药物治疗有效率为30%左右,药物只在少数患者体内对病毒有持续抑制作用。慢性乙肝治疗多数采用抗病毒药物联合免疫干预剂。这种免疫干预包括增强特异性免疫和机体固有免疫两个方面。HBV转基因小鼠自身除对HBV病毒存在免疫耐受外,其天然和获得性免疫功能未见异常,这为上述治疗提供很好的理论依据;另一治疗思路,与上述传统慢性乙型肝炎治疗原则相反,不是提高机体免疫,清除病毒,而是努力保持慢性乙型肝炎患者免疫耐受状态,避免机体免疫反应引起肝损伤肝炎。HBV转基因小鼠免疫耐受状态不出现肝损伤,对这一新的治疗思路形成具有借鉴意义。 综上所述,本实验应用HBV转基因小鼠进行乙肝发病机理和药效评价研究,其结果支持临床上应用抗病毒药物联合增强免疫剂的治疗原则。但对那些通过垂直传播感染的患者则与通常的临床治疗思路相反,而是积极维持慢性乙型肝炎患者免疫耐受状态,以避免机体免疫反应引起肝损伤肝炎。
【学位授予单位】:第一军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R-332

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王洪敏;刘光泽;贾彦征;熊一力;张宜俊;;adr型乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠的制备[J];传染病信息;2000年01期
2 熊一力;贾彦征;王洪敏;刘光泽;张宜俊;;高表达乙型肝炎病毒转基因小鼠的制备[J];传染病信息;2000年04期
3 张宜俊;;慢性乙型肝炎免疫治疗若干问题[J];传染病信息;2005年03期
4 胡卫江,李建秀,余宏宇,戴德顺,王新民,孙伟,郝光荣,王肖鹏,胡以平;乙型肝炎病毒(adr亚型)转基因小鼠的研究[J];第二军医大学学报;1999年04期
5 蒋黎,毛青,王宇明,李俊刚,刘俊;HBV感染的人鼠嵌合肝动物模型的建立[J];第三军医大学学报;2003年05期
6 耿士忠,鞠辉明,杨跃飞,成勇;乙肝病毒基因在转基因小鼠中高效表达的研究[J];扬州大学学报;2002年04期
7 斯崇文;;慢性乙型肝炎的现状和问题[J];临床药物治疗杂志;2006年04期
8 郑曲波,张宜俊,刘惠萍,易学瑞,祖萍,章谷生;慢性HBV感染者外周血树突状细胞和T细胞体外应答功能的检测和分析[J];上海医学检验杂志;2003年02期
9 刘光泽,贾彦征,王洪敏,熊一力;乙型肝炎病毒转基因小鼠外源基因的复制和传代稳定性观察[J];实验动物科学与管理;2001年01期
10 张靖溥,劳为德,张旭晨,魏影允,刘晔;外源基因在转基因小鼠中遗传和表达的稳定性[J];遗传学报;1999年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 管晓斌;李春笑;赖松家;;用牛αS1-酪蛋白基因构建乳腺生物反应器表达载体的研究[J];安徽农业科学;2006年23期
2 王善慧,梁文竹;谈病毒性肝炎患者的健康教育[J];安徽预防医学杂志;2000年01期
3 闫妙娥;张华;;HBV宫内传播与胎盘滋养细胞丝裂素活化蛋白激酶信号转导通路的研究进展[J];北京医学;2011年12期
4 田一梅;李秀惠;李晶莹;张佳莹;王宪波;郝新洁;姚鹏;张方平;;618例慢性乙型重型肝炎临床分布特征及不同因素对预后影响研究[J];北京中医药;2010年03期
5 赵桂琴;王宏伟;李平;;乙型肝炎抗病毒治疗药物研究进展[J];承德医学院学报;2009年03期
6 林铁军;;甲胎蛋白检测对肝病患者的临床意义[J];传染病信息;2006年04期
7 王选举;黄正明;宋建国;;乙型肝炎病毒感染模型的研究进展[J];传染病信息;2009年03期
8 马丽娜;赵中夫;;DC IL-10与慢性乙型肝炎的关系研究进展[J];长治医学院学报;2006年04期
9 王麟;赵中夫;;HBV慢性感染与树突状细胞功能异常研究进展[J];长治医学院学报;2007年02期
10 张芸;李瑞娟;邢媛;王麟;明慧香;宋红娇;赵中夫;;核苷(酸)类似物对不同疗效乙肝患者DC功能影响[J];长治医学院学报;2010年05期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 刘文兰;张炎;车念聪;唐佐青;油红捷;;HBV转基因小鼠的舌色研究[A];全国第十二次中医诊断学术年会论文集[C];2011年
2 康爱君;田枫;郑杰;董宇红;王美华;郭长占;周淑佩;王兆绰;;乙型肝炎病毒转基因小鼠病理学观察[A];中国实验动物学会第五届学术年会论文汇编[C];2000年
3 徐向田;;中医“治未病”思想与乙肝三级防治技术理论探讨[A];中医理论临床应用学术研讨会论文集[C];2007年
4 张绍军;;孕妇乙型肝炎病毒感染情况调查与母婴传播阻断方案探讨[A];浙江省第十七届农村医学暨乡镇卫生院管理学术会议大会论文集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张传涛;HH胶囊体内外抗乙肝病毒作用及其部分作用机制研究[D];成都中医药大学;2010年
2 谢志春;荔枝核、茛芀花和罗浮粗叶木抗鸭乙肝病毒及护肝作用的实验性研究[D];广西医科大学;2012年
3 杨书兰;先天感染华南鸭乙肝模型的建立并验证肝经引经药对3TC抗乙肝病毒疗效的影响[D];广州中医药大学;2001年
4 汪琳;外源基因在家蚕中靶向整合及线粒体载体研究[D];西南农业大学;2002年
5 刘红;HBV蛋白相关免疫应答致HBV转基因小鼠肝组织病理损伤的研究[D];郑州大学;2003年
6 安志兴;绿色荧光蛋白融合基因在小鼠早期胚胎表达的研究[D];西北农林科技大学;2003年
7 钱振宇;胆管癌与乙型和丙型肝炎病毒感染的相关性研究[D];复旦大学;2003年
8 许红韬;拟蜘蛛牵丝蛋白基因在大肠杆菌和小鼠乳腺表达研究[D];中国农业大学;2004年
9 李端;拉米夫定和干扰素α对孕期降低HBV转基因小鼠血中HBV载量有效性和安全性的初步研究[D];第四军医大学;2004年
10 崔芳;HBV转基因小鼠的肝脏蛋白质组学研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 夏珂;逍遥散对肝损伤大鼠的时辰药动学、时辰药效学研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
2 王秋明;肝病Ⅰ号治疗慢性乙型病毒性肝炎的回顾性研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
3 周笛;利用人干细胞制备人鼠嵌合肝的实验研究[D];新疆农业大学;2010年
4 王钊;HBV感染不同免疫状态与sICAM-1表达的关系[D];桂林医学院;2010年
5 王晓燕;乙型肝炎病毒基因型、亚型分布及与临床关系的研究[D];山西医科大学;2011年
6 王娟;杂多化合物体外抗乙型肝炎病毒的实验研究[D];吉林大学;2011年
7 杨涤;淤胆型肝炎的临床特征分析及中西医结合治疗淤胆型肝炎的疗效评价[D];北京中医药大学;2011年
8 李泽禹;补气解毒法治疗慢性乙型肝炎的临床观察与实验研究[D];广州中医药大学;2011年
9 辛磊磊;转植酸酶基因和抗粘液病毒基因猪环境安全评价[D];中国农业科学院;2011年
10 张新伟;微小RNA前体区域基因多态与肝细胞肝癌遗传易感性关联的研究[D];南京医科大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王洛权;乙型肝炎病毒基因转基因鼠的肝脏肿瘤癌基因及生长因子[J];北京医科大学学报;1995年06期
2 鞠胜芝,孙长华,赵红梅,郭峥;乙肝患者血清HBV-DNA含量与性激素水平的相关关系[J];滨州医学院学报;2001年06期
3 王洪敏;刘光泽;贾彦征;熊一力;张宜俊;;adr型乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠的制备[J];传染病信息;2000年01期
4 熊一力;贾彦征;王洪敏;刘光泽;张宜俊;;高表达乙型肝炎病毒转基因小鼠的制备[J];传染病信息;2000年04期
5 张宜俊;;慢性乙型肝炎抗病毒治疗的浅见[J];传染病信息;2002年03期
6 胡卫江,李建秀,余宏宇,戴德顺,王新民,孙伟,郝光荣,王肖鹏,胡以平;乙型肝炎病毒(adr亚型)转基因小鼠的研究[J];第二军医大学学报;1999年04期
7 徐红,张跃新,魏来,肖琳,鲁晓擘;新疆汉族人群HBV基因型与临床病情的关系[J];实用肝脏病杂志;2005年01期
8 陈湖光,马亦林,刘克洲;乙型肝炎病毒转基因小鼠的研究进展[J];国外医学(流行病学传染病学分册);1998年05期
9 焦成松,贾战生,周永兴;转基因小鼠在乙型肝炎研究中的应用[J];国外医学(流行病学传染病学分册);1998年05期
10 蒋黎;人鼠嵌合肝:研究肝脏病学的新工具[J];国外医学(流行病学传染病学分册);2002年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴庆洲;佟明华;张伟永;蔡咏芬;刘光泽;孔祥平;;应用荧光原位杂交检测HBV基因在转基因小鼠染色体上的整合[J];华南国防医学杂志;2010年03期
2 张南;訾晓渊;熊俊;姚玉成;李文林;巴月;朱海英;李建秀;王新民;胡以平;;乙肝病毒X蛋白诱导HeLa细胞和转基因小鼠肝细胞凋亡的研究[J];癌变.畸变.突变;2007年02期
3 李潇潇;任军;王隆;马张妹;王铸钢;谢幼华;闻玉梅;;HBsAg阳性转基因小鼠肝脏中昼夜节律基因dbp转录水平变化的研究[J];微生物与感染;2008年02期
4 张政;席宏丽;公维波;李文刚;于敏;曾争;徐小元;;逆转录病毒介导双靶区反义RNA在转基因小鼠肝细胞中的表达及对HBV DNA复制的影响[J];世界华人消化杂志;2006年25期
5 赵蔚;陈红;;双靶区反义RNA抗乙型肝炎病毒的实验研究[J];兰州大学学报(医学版);2006年03期
6 陈小华;潘庆春;汤正好;余永胜;臧国庆;;PTD-HBcAg融合蛋白诱导特异性CTL抑制转基因小鼠HBV复制[J];世界华人消化杂志;2009年29期
7 王维伟;王江蓉;沈艳;宋乐冬;陈建杰;;苦参类生物碱对HBV转基因小鼠抗病毒作用的比较研究[J];中华实验和临床感染病杂志(电子版);2007年01期
8 任军;赵超;方彩云;马张妹;杨芃原;闻玉梅;;乙型肝炎表面抗原阳性转基因小鼠肝组织基因表达谱及蛋白组学的初步研究[J];微生物与感染;2006年01期
9 周乙华;姚集鲁;;乙型肝炎病毒转基因小鼠[J];国际流行病学传染病学杂志;1990年02期
10 朱丹丹;邵彬;李建锋;;浅谈我国乙型肝炎病毒的研究现状及展望[J];科协论坛(下半月);2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张政;席宏丽;公维波;李文刚;于敏;曾争;徐小元;;乙型肝炎病毒反义RNA在转基因小鼠肝细胞中的表达及对肝细胞HBV DNA复制的影响[A];中华医学会全国第九次感染病学学术会议论文汇编[C];2006年
2 康爱君;田枫;张阔;刘冕;胡建国;李东阳;;C57BL/6J-HBV转基因小鼠血清生化值的检测[A];中国实验动物学会第七届学术年会论文集[C];2006年
3 孔祥平;任向荣;;RNA干扰抑制乙型肝炎病毒的研究进展[A];2006年慢性乙型肝炎治疗进展研讨会资料汇编[C];2006年
4 陈汉源;曾位森;谢卫兵;罗琛;;分析myc小鼠的转基因复本和肿瘤发生[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
5 邵新华;刘树业;武珊珊;吴莲英;张行;;乙型肝炎病毒新标志物HBxAg/抗-HBx检测临床意义的探讨[A];天津市生物医学工程学会2007年学术年会论文摘要集[C];2007年
6 王春花;成军;王欣欣;吴煜;刘妍;郎振为;;乙型肝炎病毒前-前-S蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化研究[A];中华医学会全国第九次感染病学学术会议论文汇编[C];2006年
7 王春花;成军;郎振为;王欣欣;吴煜;刘妍;;乙型肝炎病毒前-X蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化[A];中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编[C];2005年
8 訾晓渊;张南;熊俊;巴月;姚玉成;黄洁;李建秀;朱海英;王新民;马凤云;张树忠;胡以平;;乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠的生物学特性[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年
9 刘玉刚;梁晓红;张秋;韩丽辉;高立芬;孙汶生;;不同免疫状态的乙型肝炎病毒荷载小鼠肝病发生的分子机制研究[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年
10 杨安钢;刘家云;温伟红;赵晶;贾林涛;许彦鸣;孟艳玲;;针对HBV X基因的siRNA高效抑制HepG2.2.15细胞和转基因小鼠中HBV的基因表达和复制[A];第九届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 王雪飞;小肝癌疗效缘何徘徊不前[N];健康报;2007年
2 申艳丽;春季花木为何容易枯死[N];中国绿色时报;2007年
3 石家庄市第五医院妇产科副主任、副主任医师 朱宝申;浅谈乙型肝炎病毒的父婴传播[N];石家庄日报;2009年
4 周欣;乙型肝炎病毒检验[N];中国医药报;2003年
5 ;獭兔的生物学特性[N];中国特产报;2003年
6 ;我国学者成功建立一套转基因小鼠系统[N];中国医药报;2002年
7 姚克俭;桃树的生物学特性[N];陕西科技报;2009年
8 ;植物学、生物学特性[N];湖北科技报;2003年
9 于明山;转基因小鼠研制成功为克隆器官提供基础[N];中国高新技术产业导报;2003年
10 灵寿县中药材种植研究所 张合云;把握三点 半夏高产[N];河北科技报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘光泽;复制型HBV转基因小鼠的建立、生物学特性、应用及无免疫耐受研究[D];第一军医大学;2007年
2 鲁晓擘;新疆维吾尔族乙型肝炎病毒基因型分布、准种特性及其生物学意义研究[D];新疆医科大学;2007年
3 曾林;p21~(HBsAg/HBsAg)转基因小鼠发生肝细胞癌的分子病理学研究[D];吉林大学;2006年
4 李政;酵母人工染色体(YAC)介导的含HS2定点突变的人β-珠蛋白基因簇在转基因小鼠中的表达[D];中国协和医科大学;1998年
5 朱化星;mRFP1报告基因表达及Gal4-UAS二元表达系统在小鼠中的应用[D];复旦大学;2005年
6 王波;血红素加氧酶-1活性变化对肿瘤细胞体外抗药性、体内生长影响的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
7 高俊;细菌人工染色体(BAC)介导的人载脂蛋白apoA-Ⅰ C-Ⅲ A-Ⅳ A-Ⅴ基因簇转基因小鼠研究[D];中国协和医科大学;2002年
8 冯东晓;细菌人工染色体(BAC)介导的人α-珠蛋白基因簇转基因小鼠的研究[D];中国协和医科大学;2001年
9 刘庆辉;带红系增强子的人βE-珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达[D];中国协和医科大学;1992年
10 刘亚梅;疏肝健脾补肾方对CHB患者、HBV转基因小鼠的免疫调节作用研究[D];广州中医药大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张南;乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠病毒蛋白表达模式的研究[D];第二军医大学;2006年
2 黄洁;绿色荧光蛋白标记的乙肝病毒全基因组真核表达载体的构建与表达分析[D];第二军医大学;2006年
3 张成香;c-myc转基因小鼠生物学特性的研究[D];扬州大学;2006年
4 傅婷婷;10-23脱氧核酶抑制HepG2.2.15细胞荷瘤裸鼠HBV的复制和表达[D];吉林大学;2007年
5 李欣;EB病毒早期基因BHRF1转基因模型鼠的建立[D];青岛大学;2009年
6 赵蔚;双靶区反义RNA对HBV转基因鼠抗病毒疗效的研究[D];兰州大学;2006年
7 黄黎珍;1.3copyC型乙肝病毒转基因小鼠的制备研究[D];南方医科大学;2007年
8 薛璐;乙型肝炎病毒母婴传播高危因素的研究[D];天津医科大学;2005年
9 刘金霞;阿德福韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床研究[D];山东大学;2005年
10 樊和斌;α/β干扰素受体在外周血单核细胞、肝脏组织内表达及乙型肝炎病毒基因型临床意义的初步研究[D];第一军医大学;2005年
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