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《第一军医大学》 2007年
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亚健康状态的流行病学调查及其脾气虚证唾液代谢组学研究

霍云华  
【摘要】:【背景】 亚健康状态(Sub-health)是健康与疾病之间的临界状态,是机体在无器质性病变情况下发生了一些功能性改变,其临床表现多种多样,但临床检查无异常,且不能确诊为疾病。世界卫生组织(WHO)最近公布的一项预测性调查表明,全世界处于亚健康状态的人口有75%,真正健康的人仅有5%,其危害性已经被医学界认为是与艾滋病并列的21世纪人类健康头号大敌。近年来,国内已陆续开展了亚健康状态的研究,取得了一定的成绩。然而,还有不少关键问题急待解决,主要有:(1)亚健康状态的发生率到底是多少?(2)导致亚健康状态的确切病因及发生机制是什么?(3)亚健康状态的临床表现有哪些?(4)亚健康状态如何干预或防治? 亚健康状态缺乏明确诊断为“某病”的理化依据,不能确诊为疾病,它实际上是机体生理活动规律失常的综合表现,是一种还达不到器质性改变的功能性变化,是人体身心整体调节异常的早期反映。因此,以具体的“形态结构学”为基础,以单纯的“生物性疾病”为研究对象,以数字化的检验数据为诊疗依据的现代医学很难把握亚健康状态的诊治规律。而中医学是一门以整体观念为指导,以辨证论治为主要诊疗特点的医学理论体系,其有别于现代医学的最大特点之一就是对人体“生理特性”和“功能活动规律”的重视。所以中医学在对亚健康状态的辨识、分类、诊断、治疗等方面较现代医学具有全方位的优势。辨证论治是中医学诊治疾病的基础,是中医学中最富有特色的科学精华。证候是辨证论治的前提和基础,是连接中医理论和临床诊疗体系的桥梁和关键。但中医的证具有明显的经验医学特征。现阶段研究方法,多采用整理性研究、验证性研究,虽然制定了多个证候诊断的标准,但难以被广泛推广。究其原因,这些标准多依据一些专家的个人经验,具有一定的主观因素。另外,这些证候常常伴有相关疾病,不同疾病对证候又有重要影响,哪些是证候特有症状,哪些又是疾病影响而发生的症状难以分清。如消化系统脾虚证和妇科脾虚证难以采用同样标准。这些问题一直困扰着证候的标准化研究。而亚健康状态中医证候则可以排除疾病影响,有利于探索证候固有症状特点,为证候标准化研究提供科学依据,从而提高辨证水平,促进中医药学的发展。因此,开展亚健康状态的中医证候研究具有重要的科学意义。 脾胃学说是中医理论体系中的重要组成部分。中医学认为,脾胃为后天之本,水谷之海,气血生化之源,而脾虚证是临床上多种疾病最常见的证候,本课题组研究发现脾虚证亦是亚健康状态的最常见证候之一。因此,很有必要开展脾虚证的现代研究。目前,虽然已有内科、儿科、妇科等疾病脾虚证的临床特征研究,但迄今为止尚未见有亚健康状态脾气虚证的证候特征研究报道。“脾在液为涎”为中医藏象理论的经典学说之一,它是长期临床实践的经验和规律的总结,必然具有其科学的内涵。目前对于脾脏证候(即“脾病”)与唾液之间的关联研究取得了一定的成绩,其中唾液淀粉酶已作为脾气虚证的诊断参考标准之一。然而,已有研究尚存在不少问题:如主要停留在简单理化检测、单个蛋白质的水平,研究内容相对单一,存在着低水平重复,研究深度不够,缺乏多指标同步监测研究等。因此,这样往往仅能解释某一局部的现象,无法揭示脾气虚弱时唾液的成分变化真实本质。要解决上述瓶颈问题,必须把中医药学传统理论与现代生命科学的新理论和新技术结合起来,引入新的思路和方法。 中医学认为脾主运化水谷、运化水液,为气血生化之源,能充养先天之精,促进人体的生长发育,是维持人体生命活动的根本。那么脾气虚弱(即脾病)必然影响到多脏器的功能活动和物质代谢过程,最终在代谢产物中体现出来,引起“涎(即唾液)”的代谢物变化。现代生命科学认为,代谢产物处于生命调控的末端,所以代谢物比基因、蛋白质更接近于生物的表现型。因此,从唾液代谢物方面有可能更容易寻找脾气虚证的生物标志物(Marker),这就需要更全面更系统的资料以评价机体的代谢状态,而这正是代谢组学(metabonomics)所能解决的问题。代谢组学是一门在新陈代谢的动态进程中系统研究代谢产物的变化特征,揭示机体生命活动代谢本质的科学,是继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后,系统生物学的重要组成部分。基因组学、蛋白质组学一般是发现和鉴别潜在的变化,而代谢组学研究则是发现和鉴别真实的变化,正如Billy David所言:“基因组学和蛋白质组学告诉你可能发生什么,而代谢组学则告诉你已经发生了什么”。随着核磁共振(NMR)、高效液相色谱(HPLC)、质谱(MS)、生物信息学及计算机等生命科学技术和方法的飞速发展,使得代谢组学的技术平台日臻完善。 【目的】 首先,通过流行病学调查,研究亚健康状态的发生状况、临床表现及相关影响因素,研究亚健康状态的中医证候分布及其常见证候脾气虚证的证候特征;其次,应用代谢组学的研究方法,探讨亚健康脾气虚证唾液的代谢物特征,为脾气虚证的客观化研究奠定基础。 【方法】 (1)应用横断面研究方法,采用现场调查方式,让调查对象填写亚健康调查问卷,结合临床检查结果,判断健康状况(包括健康、亚健康状态、疾病)。同时通过医师访谈采集调查对象的中医四诊信息资料,按有关中医证候的辨证标准进行辨证。然后,将上述合格的调查问卷经过信息处理后录入Epidata3.02数据库,应用SPSS11.5软件进行描述性分析、x~2检验、Logistic回归分析、因子分析等方法,以研究亚健康状态的发生状况、临床表现、相关影响因素、中医证候分布及其脾气虚证的证候特征。 (2)选择亚健康状态脾气虚证为实验组,以正常人作为正常对照组,以亚健康肾阴虚证为实验对照组,运用pH仪测定唾液的pH值,应用全自动生化分析仪测定唾液中的生化指标,应用核磁共振(NMR)等方法测定唾液的~1H NMR谱,并将其积分值进行中心化和比例换算,用Simca-P 10.0软件进行主成分分析(PCA),以研究亚健康状态脾气虚证唾液的代谢特征。 【结果】 (1)本次调查6110名企业、医科高校等特定人群中,有3981人处于亚健康状态,现患率为65.1%,其中女性高于男性(P<0.01),年龄在30岁以下亚健康人群最多(占79.4%),随着年龄的增大亚健康状态的现患率降低(P<0.01)。 (2)本次调查分析结果显示,与亚健康状态相关的因素有学历、职业、加班、体育锻炼、休闲活动、工作能力、遇到挫折事故、外形、收入、居住条件、人际关系、生活环境、安全感等15项(P<0.05)。根据B值判断,其中学历、加班、遇到挫折事故为亚健康发生的危险因素,职业、体育锻炼、休闲活动、工作能力、外形、住房满意度、收入、人际关系、健康状况、生活环境、安全感等其余12项为亚健康发生的保护因素。 (3)本次调查结果显示亚健康状态的临床表现非常复杂,涉及到躯体、心理和社会等多个症状。进一步应用因子分析,共提取10个公因子,结合医学知识,可将亚健康状态的临床表现分为社会型(公因子6,主要表现为交往频率下降、难以承担相应的社会角色等)、心理型(公因子1,主要表现为精神紧张、情绪不稳、焦虑、压抑等)、疲劳型(公因子3、4、9,主要表现为疲倦乏力、少气懒言、头痛、头晕、胸闷气短、心慌、腹胀、腹痛、食欲不振、腰背酸痛、腿膝酸软等)、眼涩咽干型(公因子7,主要表现为眼睛干涩、眼睛酸胀、口苦、咽干等)、二便异常型(公因子2,主要表现为大便干结、大便稀溏、小便不净、夜尿频数等)、月经不调型(公因子5,主要表现为痛经、经期异常、白带过多等)以及体质型(公因子8、10,主要表现为容易感冒、恶风怕冷、容易出汗、手脚心热等)等七个亚型。 (4)本次调查结果显示亚健康状态的中医证型分布较分散,涉及到33个中医证候,其中前10个常见证候的发生频率最高,其累积百分数达到70%左右,它们是脾气虚证、肝郁脾虚证、肝肾阴虚证、肾阴虚证、肝郁气滞证、肾阳虚证、肾精不足证、心脾两虚证、脾肾阳虚证、肝阴虚证等。 (5)本研究结果显示亚健康脾气虚证的主要临床表现有疲倦乏力、食欲不振、少气懒言、大便稀溏、容易感冒、容易出汗、腹痛、反应迟钝、腹胀、恶风怕冷等。进一步应用因子分析显示其主要证候特征为:①气虚表现(主要为疲倦乏力、少气懒言等);②脾胃症状(主要为食欲不振、腹胀、腹痛、大便溏等);③体质状态(表现为平素容易感冒、容易出汗、恶风怕冷等);④舌淡,脉细弱。 (6)与正常对照组比较,亚健康脾气虚证组唾液的pH值及生化指标中钾(K)、钠(Na)、氯(Cl)、钙(Ca)、磷(P)、谷丙转氨酶(ALT)、总蛋白(TP)、尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)、尿酸(UA)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)、葡萄糖(GLU)、甘油三脂(TG)的含量等无统计学意义(P>0.05),而镁(Mg)、谷草转氨酶(AST)的含量明显高于正常对照组(P<0.05)。亚健康肾阴虚证组唾液中P、Mg、AST、TG、BUN的含量明显高于正常对照组(P<0.05),其中TG的含量明显高于脾气虚证组(P<0.05),其他与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05)。 (7)实验各组唾液的典型~1H NMR谱的主成分积分值集中分布于椭圆形散点图(95%置信区内)的3个区域:脾气虚证组、肾阴虚证组与正常对照组无明显交叉和重叠,肾阴虚证组集中分布在左方,脾气虚证组集中在右上方,而正常对照组集中分布在右下方。提示这三组的代谢谱有明显的差异。进一步分析表明,与正常对照组相比,脾气虚证组唾液中的乳酸(1.34 ppm)、N-乙酰糖蛋白(2.1 ppm)、乙醇(1.18 ppm)、主要为葡萄糖(3 ppm~4 ppm)等物质含量相对较高,而肾阴虚证组唾液中主要是醋酸盐(1.9 ppm,1.94 ppm)、丙酸盐(1.06ppm)、丙氨酸(3.78 ppm)含量相对较高。 【结论】 (1)企业、医科高校等人群中亚健康状态的现患率较高,为65.1%,其与自身素质、心理状况、生活和工作方式、社会环境等多个因素有关。 (2)亚健康状态的临床表现具有复杂性和异质性,存在多种临床亚型。 (3)亚健康状态的中医证候分布较散,脾气虚证为其常见证候之一;亚健康脾气虚证的主要临床表现特征有:①气虚表现;②脾胃症状;③体质状态;④舌淡,脉细弱。 (4)亚健康脾气虚证唾液的代谢谱明显偏离正常人群,提示“脾在液为涎”的中医理论具有科学性。
【学位授予单位】:第一军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R181.3;R256.3

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