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《南方医科大学》 2007年
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实验用西藏小型猪生长繁殖性能及ESR、PRLR基因多态性相关分析研究

曾昭智  
【摘要】: 目的:本研究对西藏小型猪在引种后的风土驯化和实验动物化培育条件下的生长繁殖性能进行了测定,同时对其两个与生长繁殖性能相关的两个功能基因(ESR基因和PRLR基因)进行多态性分析,并把这两个功能基因与生长繁殖性能进行相关性分析,目的是:(1)了解西藏小型猪的风土驯化情况和实验动物化培育的饲养管理情况,探索西藏小型猪的实验动物化培育的饲养管理途径,为小型猪的实验动物化做准备;(2)了解ESR基因和PRLR基因在西藏小型猪中是否存在多态性,以及多态性分布情况;(3)确定ESR基因和PRLR基因在西藏小型猪上的遗传效应,为确定生长繁殖性状的标记辅助选择(Marker Assisted Selection,MAS)提供依据,从而提高西藏小型猪的生长繁殖性能。 方法:本试验测定了西藏小型猪母猪的繁殖性能,包括总产仔数、产活仔数、离乳成活数、初生重、离乳重等指标;同时采用PCR-RFLPs的方法,扩增44头西藏小型猪母猪的ESR基因和PRLR基因的2个特异片段,并对PCR产物进行酶切多态性分析,研究这些多态性与生长繁殖性状之间的相关性。 结果:实验培育群母猪初产胎产仔数、产活仔数和离乳成活数显著高于与原种群初产胎和风土驯化群初产胎(t≥tmin=3.364,P≤Pmax=0.002),实验培育群母猪初产胎离乳成活数显著高于原种群经产胎离乳成活数(t=2.555,P=0.014)。实验培育群母猪初产胎仔猪初生重和离乳重显著高于与原种群初产胎、经产胎和风土驯化群初产胎仔猪初生重和离乳重(t≥tmin=3.798,P≤Pmax=0.001)。 西藏小型猪2个侯选基因均表现出多态性,并在基因座上均检测到一对等位基因,均表现为三种基因型:AA、AB和BB型三种基因型。 ESR基因120bp扩增片段经过PvuⅡ酶切后,只含有一个120bp的条带的基因型为AA型,含有三条带(120bp,65bp和55bp)的基因型为AB型,含有两个条带(55bp和65bp)的基因型为BB为型。同样,PRLR基因163bp扩增片段经过AluⅠ酶切后,含有三个条带(85bp,59bp和19bp)的基因型为AA型,含有四个条带(104bp,85bp,59bp和19bp)的基因型为AB型,含有两个条带(104bp和59 bp)的基因型为BB型。 西藏小型猪2个功能基因中,ESR基因中基因型为AA型母猪有12头,基因型频率为0.273;AB型基因型母猪有22头,基因型频率为0.500,BB型基因型母猪有10头,基因型频率为0.227;其中A等位基因频率为0.523,B等位基因频率为0.477。PRLR基因AA型基因型母猪有10头,基因型频率为0.227;AB型基因型母猪有23头,基因型频率为0.523,BB型基因型母猪有11头,基因型频率为0.250;其中A等位基因频率为0.489,B等位基因频率为0.511。 西藏小型猪2个侯选基因各基因型间生长、繁殖性能的差异显著性检验结果表明:对于ESR基因,初产胎的产仔数在不同基因型间存在显著性差异(F=3.579,P=0.037),其不同基因型间的产仔数分别是AA基因型为3.500±1.446头,BB基因型为4.900±0.994头,AB基因型为4.636±1.465头,不同基因型间产仔数呈BB>AB>AA的趋势,BB基因型母猪的产仔数分别比AB型和AA型母猪多0.264头和1.400头;初产胎和经产胎的母猪其他指标在不同基因型间均没有显著性差异(F≤Fmax=2.109,P≥Pmin=0.134)。对于PRLR基因,经产胎母猪的仔猪初生重在不同基因型间存在显著性差异(F=4.301,P=0.021),其不同基因型间的初生重为AA基因型分别是0.637±0.094kg,BB基因型为0.616±0.050kg,AB基因型为0.707±0.098kg,不同基因型间初生重呈AB>AA>BB的趋势,AB基因型母猪的仔猪初生重分别比AA型和BB型母猪的的仔猪初生重重0.070kg和0.091kg;初产胎和经产胎母猪的其他指标在不同基因型间均没有显著性差异(F≤Fmax=1.812,P≥Pmin=0.177)。 结论:实验动物化培育条件下的饲养管理也获得了成功,为西藏小型猪的实验动物化奠定了基础。西藏小型猪存在有潜在的高产仔繁殖性能,只要改变其饲养管理方式,这种潜能就有可能转变为现实的生产力。 提高西藏小型猪猪群ESR基因的B等位基因频率,有利于提高西藏小型猪母猪的产仔数,而对其它经济性状没有不良的影响。因此,可利用ESR基因PCR-RFLP对猪群常规生产实施辅助选择,可望获得较大的遗传增益。
【关键词】:西藏小型猪 生长繁殖性能 ESR基因 PRLR基因 多态性
【学位授予单位】:南方医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S865.1
【DOI】:CNKI:CDMD:2.2007.223165
【目录】:
  • 摘要4-7
  • ABSTRACT7-10
  • 目录10-13
  • 第一章 绪论13-18
  • 1.1 西藏小型猪简介13-15
  • 1.2 西藏小型猪的研究进展情况15-18
  • 第二章 西藏小型猪生长繁殖性能研究18-24
  • 2.1 材料与方法19-20
  • 2.1.1 样本来源19
  • 2.1.2 饲养管理19-20
  • 2.1.3 数据收集20
  • 2.1.4 试验方法20
  • 2.1.5 统计分析20
  • 2.2 结果分析20-22
  • 2.2.1 西藏小型猪原代、第一代生产群和实验群母猪繁殖性能比较20-21
  • 2.2.2 西藏小型猪哺乳仔猪的生长发育21-22
  • 2.3 讨论22-24
  • 第三章 西藏小型猪ESR、PRLR基因多态性及其与生长繁殖性能的相关分析24-56
  • 3.1 材料与方法26-34
  • 3.1.1 试验材料26-28
  • 3.1.1.1 样本来源26
  • 3.1.1.2 数据收集26
  • 3.1.1.3 主要仪器设备26-27
  • 3.1.1.4 主要试剂及配制27-28
  • 3.1.2 试验方法28-34
  • 3.1.2.1 样品的采集与保存28-29
  • 3.1.2.2 基因组DNA的抽提29-30
  • 3.1.2.3 DNA浓度和纯度检测30
  • 3.1.2.4 引物的来源与合成30-31
  • 3.1.2.5 目的基因的扩增31-32
  • 3.1.2.6 PCR扩增产物的RFLP分析及基因型判定32-34
  • 3.1.2.7 统计分析34
  • 3.2 结果分析34-40
  • 3.2.1 模板DNA的抽提结果35
  • 3.2.2 PCR扩增反应结果35-37
  • 3.2.3 PCR-RFLP分析37-40
  • 3.2.3.1 西藏小型猪ESR基因PCR-RFLP分析37-38
  • 3.2.3.2 西藏小型猪PRLR基因PCR-RFLP分析38-40
  • 3.3 基因型与生长繁殖性状间的相关分析40-43
  • 3.3.1 西藏小型猪ESR基因扩增片断Pvu Ⅱ多态性与生长繁殖性状间的关系40-41
  • 3.3.2 西藏小型猪PRLR基因扩增片断Alu 1多态性与生长繁殖性状间的关系41-43
  • 3.4 讨论43-56
  • 3.4.1 关于实验方法43-47
  • 3.4.2 ESR和PRLR基因的基因型及基因频率的分布47-48
  • 3.4.3 西藏小型猪ESR基因扩增片断Pvu Ⅱ多态性与生长繁殖性状间的关联性48-51
  • 3.4.4 西藏小型猪PRLR基因扩增片断Alu 1多态性与生长繁殖性状间的关联性51-54
  • 3.4.5 ESR和PRLR基因的应用前景54-56
  • 结论56-57
  • 参考文献57-62
  • 硕士期间论文发表情况62-63
  • 致谢63-65
  • 研究生毕业论文统计学审稿证明65
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