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《南方医科大学》 2010年
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慢性阻塞性肺疾病患者外周血T细胞表达CXCR3的研究

杨晓霞  
【摘要】: 背景 慢性阻塞性肺疾病(COPD)由于其患病人数多,死亡率高,社会负担重,已成为一个重要的公共卫生问题。目前,COPD居全球死亡原因的第4位,在未来的几十年,其发病率和死亡率将会进一步上升。COPD发病的分子和细胞学机制尚未完全明了。参与COPD的炎症细胞主要有中性粒细胞、巨噬细胞以及淋巴细胞,淋巴细胞在COPD发病过程中如何发挥作用目前还不完全清楚。趋化因子是一类广泛参与炎症反应的小分子蛋白,通过与趋化因子受体结合,诱导淋巴细胞定向迁移至特定部位,并产生局部免疫应答,这可能是造成炎症反应的一个重要因素。趋化因子受体3(CXCR3)主要存在于T淋巴细胞表面,在T淋巴细胞向炎症部位募集过程中可能起重要作用,对于该问题的探讨,将有助于阐明淋巴细胞在COPD发病中的作用机制,为寻找新的治疗靶点提供理论依据。 目的 一.探讨外周血T细胞CXCR3的表达在COPD发病过程中所起的作用。 二.了解T细胞CXCR3表达的影响因素,如常用的治疗COPD的药物氨茶碱、糖皮质激素对其的影响。 方法 一.将研究对象分为正常对照组(n=14)、COPD急性加重组(n=20)、COPD稳定组(n=17)。急性加重期患者在入院初即采静脉血1次。经住院治疗,待患者咳嗽、咳痰、气短等症状明显缓解后,再次采静脉血1次。稳定期患者及对照组就诊时采静脉血1次。分离外周血单个核细胞(PBMCs),标记抗体,流式细胞仪检测三组患者T细胞表面CXCR3的表达。 二.入选2个月内未使用氨茶碱和激素的COPD稳定期患者(n=12),分离PBMCs,分空白对照组、氨茶碱组(1.6μg/ml、16μg/ml)以及布地奈德组(3个浓度梯度0.1nmol/l、10nmol/l、1000nmol/l),37℃CO2培养箱孵育72小时,流式细胞仪检测T细胞表面CXCR3的表达。 结果 一.COPD患者外周血T淋巴细胞表达CXCR3的研究结果:(1)三组间及COPD急性加重期组治疗前后CD4+/CD8+T细胞分别占总T细胞的百分比,CD4+/CD8+的比值,差异无统计学意义,P0.05。(2) CD8+CXCR3+T细胞占总CD8+T细胞的百分比及CD4+CXCR3+T细胞占总CD4+T细胞百分比:COPD急性加重期组较COPD稳定组及对照组明显降低,COPD稳定组较对照组明显升高,差异有统计学意义,P0.05。CD4+CXCR3+和CD8+CXCR3+T细胞上CXCR3的平均荧光强度(mean fluorescent intensity, MFI)三组间无明显差异。(3) COPD急性加重期组经治疗后CD8+CXCR3+T细胞占总CD8+T细胞的百分比及CD4+CXCR3+T细胞占总CD4+T细胞百分比,CD4+CXCR3+和CD8+CXCR3+T细胞上CXCR3的MFI,均明显降低,差异有统计学意义,P0.05。(4)相关性分析:COPD急性加重期治疗前和稳定期患者FEV1%预计值与CD4+、CD8+T细胞上CXCR3的表达均无相关性,P0.05。 二.氨茶碱及布地奈德对COPD患者T淋巴细胞表达CXCR3的影响研究:(1)氨茶碱组:CD8+CXCR3+T细胞占总CD8+T细胞的百分比:1.6μg/ml氨茶碱组、16μg/ml氨茶碱组与空白对照组比较有下降趋势,但差异无统计学意义,P0.05;氨茶碱组间两两比较差异也无显著性,P0.05。CD8+CXCR3+T细胞上CXCR3的MFI:1.6μg/ml氨茶碱组、16μg/ml氨茶碱组与空白对照组比较均下降,且差异具有统计学意义,P0.05。CD4+CXCR3+T细胞占总CD4+T细胞百分比以及CD4+CXCR3+T细胞上CXCR3的MFI:三组间差异无显著性,P0.05。(2)布地奈德组:CD8+CXCR3+T细胞占总CD8+T细胞的百分比:0.1nmol/l、10nmol/l、1000nmol/l布地奈德组均显著低于空白对照组,差异具有统计学意义,P0.05;随着药物浓度的升高,CD8+CXCR3+T细胞占总CD8+T细胞的百分比逐渐下降,1000nmol/l布地奈德组较0.1nmol/l布地奈德组显著降低,差异具有显著性,P0.05。CD8+CXCR3+T细胞上CXCR3的MFI:0.1nmol/l、10nmol/l、1000nmol/l布地奈德组均较空白对照组下降,差异有显著性,P0.05;布地奈德各组间差异无显著性,P>0.05。CD4+CXCR3+T细胞占总CD4+T细胞百分比:0.1nmol/l、10nmol/l、1000nmol/l布地奈德组与空白对照组比较呈下降趋势,但无统计学差异,P>0.05。CD4+CXCR3+T细胞上CXCR3的MFI:10nmol/l、1000nmol/l布地奈德组较空白对照组下降,差异有显著性,P0.05。 结论 一.COPD急性加重期、稳定期患者外周血CD4+、CD8+T占总T细胞的百分比及CD4+/CD8+T细胞比值较正常对照组无显著性差异。二.COPD稳定期患者T细胞上CXCR3的过度表达可能在COPD慢性炎症过程中起作用。三.COPD患者外周血T细胞CXCR3的表达与疾病严重程度无关。四.小剂量及常规剂量氨茶碱对CD8+T细胞表达CXCR3+的百分比均无影响,但可使CD8+T细胞表达CXCR3的强度下降。五.糖皮质激素布地奈德可以使CD8+T细胞表达CXCR3+的百分比及强度均下调。
【学位授予单位】:南方医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R563.9

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