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含软骨细胞的纤维蛋白胶修复兔关节软骨缺损的实验研究

傅捷  
【摘要】:目的:研究关节软骨细胞、表皮细胞生长因子(EGF)、纤维蛋 白胶的混合物修复关节软骨全层缺损的效果。 方法:1用自制消化瓶消化分离原代兔关节软骨细胞并传代贴 壁培养;2.测定EGF对关节软骨细胞生长曲线、细胞倍增时间的影 响;3.通过硫酸铵沉淀法从兔血液中提取纤维蛋白原并制备纤维蛋 白胶;4.体外培养关节软骨细胞、表皮细胞生长因子(EGF)、纤维 蛋白胶的混合物,观察关节软骨细胞的表现并测定其生长曲线、细 胞倍增时间,了解软骨细胞的增殖情况;混合物培养后进行组织切 片、特殊染色、Ⅱ型胶原免疫组化检查,了解软骨基质的分泌情况;5. 用关节软骨纫胞、表皮细胞生长因子(EGF)、纤维蛋白胶的混合物 (细胞密度为2.5X10~6/ml)修复兔股骨滑车关节软骨全层缺损,分为 自体关节软骨细胞组(A组)、异体关节软骨细胞组(B组)和不含软 骨细胞组作为对照,分别在术后1、2、3 月取材。从大体观、组织 切片HE染色、特殊染色等方面了解关节软骨缺损的修复情况。 结果:1,关节软骨细胞在45~90分钟时被消化游离出来的数量 最多;随着时间的延长,游离出的细胞的台盼兰染色率增高;原代 软骨细胞克隆率为29.4%;2,EGF明显加快了关节软骨细胞的分裂 增殖(p<O.05),细胞倍增时间由2.5天降为2.0天;3.关节软骨细 胞在与EGF、纤维蛋白胶的混合物中培养时,大部分保持卵圆形, 小部分如贴壁细胞状:细胞倍增时间在第1~4天为7.0天,在第5~7 天为2.3天;AB-PAS染色阳性、Ⅱ型胶原抗体免疫组化检查阳性;4. 5 吠十学代论文 含贝骨纲胞的纤的蛋n胶修复兔x节软骨敝损的实吩研究6 大体观:白体软骨细胞组(B组)在术后3个月时修复组织己非常 类似于关节软骨,界限模糊不清。异体软骨细胞组(A组)的修复 组织与B组相比较差,但明显优于空白对照组;显微镜下观察:R 体组的修复组织的细胞结构及排列与正常关节软骨差别不大;异体 组修复组织为类软骨组织;空白对照组则为疤痕组织修复。 结论:1.自制消化瓶能加速关节软骨碎块的消化;2.EGF 能促进关节软骨细胞增殖和分泌软骨基质;3关节软骨细胞能 -在硫酸铰沉淀法制备的纤维蛋白胶中增殖和分泌软骨基质; 4.用关节软骨细胞、表皮细胞生长因子(EGF人 纤维蛋白胶的混 合物能够良好地修复关节软骨全层缺损,尤其是使用自体的关节软 骨细胞时效果更佳。


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