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《第二军医大学》 2000年
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亚低温再灌注肾保护作用的实验研究

张世林  
【摘要】:目的:证实亚低温再灌注对肾缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨 其保护作用的机理;观察缺血再灌注损伤对远期肾功能的影响;进一步揭示缺 血再灌注损伤与急性排斥反应之间的联系机理。方法:参照Takada等人的原位 灌注法并加以改良,建立了大鼠的肾冷缺血45min再灌注损伤的模型。动物分为常 温再灌注组、亚低温再灌注组和假手术组。然后监测早期血清肌酐、尿素氮的动态 变化,观察肾组织病理学和肾小管细胞超微结构学的改变;随访 24 w,以大鼠 24 h 尿蛋白排泄量为指标,观察远期肾功能的变化;生物化学方法测定血浆MDA含量、 SOD活力及肾组织中Na~+、K~+一ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶和磷脂酶A_2的活力;采用逆转录─ 定量聚合酶链式反应技术检测肾组织内B7、TNF—a、IL—2的mRNA表达水平的变 化。结果:亚低温再灌注组与常温再灌注组比较,血清肌酐、尿素氮水平明显降低 (P<0.01),再灌注 24 h后的肾组织病理学和肾小管细胞超微结构学改变与常温再 灌注组比较损害程度明显减轻,从术后 8 w起,冷缺血再灌注损伤引起大鼠 24 h 尿蛋白排泄量进行性升高,亚低温再灌注组 24 h尿蛋白排泄量与常温再灌注组相比 明显减少(P<0.05);亚低温再灌注组与常温再灌注组相比,再灌注后 MDA含量、 磷脂酶A_2的活力有所下降(P<0.05),而SOD 活力、Na~+、K~+─ATP酶和Ca~(2+)─ATP 酶的活力有所升高(P<0.05);正常肾和冷缺血期肾组织中B7、TNF—a、IL—2的 mRNA表达水平极低,几乎检测不出,再灌注后其表达水平逐渐升高,均于再灌注3 天达高峰,亚低温再灌注组B7、TNF—a、IL—2的mRNA表达水平明显低于常温再 灌注组(P<0.01)。结论:亚低温再灌注对冷缺血再灌注损伤后的早期肾功能、结 构及远期肾功能具有明显保护作用,亚低温再灌注能抑制再灌注损伤后肾组织中脂 质过氧化物升高,增加自由基清除剂的活力,防止肾脏缺血再灌注损伤时组织中 Na~+、K~+─ATP酶和 Ca~(2+)─ATP酶活力的降低,抑制磷脂酶A_2活力的升高;亚低温再 灌注能降低肾组织的免疫原性,使肾组织内的急性炎性反应减弱;冷缺血再灌注损 伤作为一个独立的因素足可引起远期慢性肾功能不全;冷缺血再灌注损伤使共刺激 分子B7、炎性细胞因子TNF—a、IL—2的mRNA表达升高,提示缺血再灌注损伤可 使移植肾免疫原性升高,炎症反应加强,这些均能促进急性排斥反应的发生。如果 对肾移植受者术前实施亚低温措施,可能具有双重保护作用,即既能减轻移植肾的 缺血再灌注损伤,又有利于急性排斥反应的控制。
【学位授予单位】:第二军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2000
【分类号】:R699.2

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【参考文献】
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