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《第二军医大学》 2001年
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钩端螺旋体保守性抗原与疫苗研究

寇志华  
【摘要】:钩端螺旋体病,简称钩体病,是由致病性钩端螺旋体感染所致,是一种分 布广泛的人兽共患病,由于其发病急、临床症状复杂多样且不典型,极易误诊 和漏诊,因此,钩体病的实验室诊断和预防对于控制钩体病的流行具有重要的 意义。目前应用的钩体灭活疫苗及试用的外膜疫苗虽然具有很好的预防同型钩 体感染的效果,但二者都不能有效地预防多种不同血清型钩体的感染,而且免 疫持续时间短。因此研究编码钩体保守性抗原及保护性抗原的基因,对于致病 性钩体的诊断和疫苗研究具有重要的意义。本实验首次克隆分析并表达了中国 钩体特有血清型56609的四种保守性抗原的编码基因flaB、ompL1、lipL41和 lipL32;构建了3种DNA疫苗pcD-flaB、pcD-ompL1和pcD-lipL41,并进行了 在豚鼠、小鼠和仔猪体内的免疫保护性研究,以及豚鼠小鼠体内的安全性研究, 对基于 lipL32基因的 PCR方法用于致病性钩体的诊断进行了探讨。结果(1) 成功克隆了四种基因并表达了GST-FlaB、GST-LipL32和GST-LipL41;(2)三种 DNA疫苗均具有不同程度的免疫保护效果,其中pcD-flaB效果最佳,不但具有 较好的预防同型钩体感染的作用,还具有交叉保护作用;(3)pcD-flaB具有 比灭活苗和亚单位疫苗较好的保护效果;(4)DNA疫苗pcD-flaB不但激活了体 液免疫,而且也激活了Thl应答;(5)未检测出与宿主染色体DNA发生整合; (6)基于lipL32基因的比PCR法可以特异性地诊断钩体。 以上结果表明DNA疫苗pcD-flaB具有较好的免疫保护性和安全性,有望用 于钩体的预防:基于lipL32基因的PCR方法有望用于致病性钩体的诊断。
【学位授予单位】:第二军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R392

【参考文献】
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