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《第二军医大学》 2001年
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生脉注射液对缺血性脑损伤保护作用的实验及临床研究

李永生  
【摘要】: 目 的 (一)体外测定不同浓度生脉溶液对超氧阴离子自由基的作用,探讨生脉注 射液抗自由基作用的机制。 (二)利用沙土鼠脑缺血及缺血再灌注模型,观察生脉注射液的抗氧化作用 及对缺血后神经细胞凋亡的影响。 (三)通过对缺血及缺血再灌后沙土鼠脑组织超氧化物岐化酶(SOD)、脂 质过氧化物(LPO)的测定、缺血后神经细胞凋亡的形态观察、P53、Bc1-2、NF- κB表达的检测,论证生脉注射液对缺血性脑损伤保护作用的可能机制。 (四)应用生脉注射液加川芎注射液治疗急性脑梗死病人,从临床进一步论 证生脉注射液在缺血性脑血管疾病中的治疗作用。 方法 (一)二甲基亚砜(DMSO)在碱性有氧条件下,产生超氧阴离子自由基, 以此为实验体系。采用电子顺磁共振(EPR)方法,分别测定不同浓度药物组及 对照组中超氧阴离子信号强度。 (二)采用沙土鼠作为本研究的实验动物,随机分为对照组、缺血组、缺血 再灌注组、缺血治疗组、再灌注治疗组,每组8只。缺血/再灌注治疗组应用生脉 注射液20ml/kg、腹腔注射。各组沙土鼠均于24小时断头,获取前脑组织分别制 取脑匀浆并测定超氧化物岐化酶(SOD)、脂质过氧化物(LPO);常规固定、 包埋前脑组织、分别进行HE染色、TUNEL染色、p53、Bc1-2及NF-κB免疫组 织化学染色。 (三)选择住院或急诊留观急性脑梗死病人70例,发病72小时内,随机分 为对照组,川芎治疗组,生脉加川芎治疗组,治疗前后均进行神经功能缺损评分, 并进一步进行疗效评定。 (四)统计学处理:在体外实验部分,计算不同浓度生脉注射液的K值、R 簧二毕厘大学砚士学泣材艾 中文赧要 值;在动物实验部分,采用方差分析比较各组间SOD活性、LPO含量、凋亡细 胞数以及 p53、BclZ、NF4 B蛋白免疫组化染色灰度值,采用直线相关分析判 断缺血再灌注组中 SOD活性、LPO含量、p53、BCI上、NF-K B蛋白表达、凋亡 细胞数之间的的相关性;在临床部分,一般资料对比较采用 X‘,t检验,三治疗 组间比较用方差分析,治疗组间疗效评定用idit分析。 结果 (一)当生脉注射液浓度小于 40%时,其 K值>l,R值为 117.7%一252l %,对超氧阴离子自由基产生有增强作用;当生脉注射液浓度浓度大于60%时, 其 K值<l,其 R值在 80%习2%之间,对超氧阴离子自由基有清除作用。 (二)缺血/再灌注组中,sOD活性明显降低,LPO含量明显升高,T UNUNEL 染色阳性计数明显增多,p53、NF4 B免疫组织化学染色灰度值明显降低,BC12 灰度值明显增高,与对照组比较均相差显著中叱刀 1);缺血/再灌注治疗组中, 以上各指标变化不明显,与对照组比较相差不显著中)0刀5);SOD活性、BCI 2表达与凋亡细胞数呈显著负相关中<0刀1),LPO含量、p53、NF儿B兔疫组 织化学染色灰度值与凋亡细胞数呈显著正相关…功刀 1)。 (三)生脉注射液加川尊注射液组治疗急性脑梗死有显著疗效,与只应用川 穹注射液组比较差异显著中功刀5)。 结论 (一)体外研究表明,高浓度的生脉注射液对超氧阴离子具有直接清除作用; 低浓度的生脉注射液对超氧阴离子的产生有促进作用:生脉注射液在不同浓度时 具有双向调节作用,说明中药多组成分共存时协同效应的复杂性。 (二)动物实验表明,生脉注射液能够通过抗氧化作用保护缺血后、尤其是 再灌注后损伤的脑组织;同时通过恢复SOD活性、降低LPO水平,降低促凋亡 基因表达、促进凋亡抑制基因表达,进而减轻脑缺血后神经细胞凋亡的发生。 (三)临床应用生脉注射液治疗急性脑梗死结果表明,生脉注射液在治疗缺 血性脑血管病中有较好的疗效,可以在临床中广泛应用。
【学位授予单位】:第二军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R743.3;R285

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