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妊娠高血压综合征时胰岛素抵抗分子机理的初步研究

张华  
【摘要】: 近年来有研究表明胰岛素抵抗可能在妊娠高血压综合征(妊高征) 的发病机理中起一定作用。胰岛素抵抗是指胰岛素在促进糖摄取及利 用方面受损,即一定量的胰岛素所产生的生物学效应低于预计正常水 平,机体为克服胰岛素抵抗而产生代偿性高胰岛素血症。现有研究表 明妊高征患者伴随有血胰岛素水平升高、糖耐量下降、胰岛素敏感系 数下降等,存在胰岛素抵抗。对胰岛素抵抗的分子机理国内外研究颇 多,目前在伴有极度胰岛素抵抗的遗传性疾病,如:Rabson-Mendenhall 综合征、矮妖精貌综合征、A型极度胰岛素抵抗综合征患者中已检测 到胰岛素受体基因突变。 本研究应用聚合酶链反应/单链构象多态性分析技术(polymerase chain reaction-single stranded conformation polymorphism, PCR-SSCP)分析29例妊高征患者(10例轻度,19例中、重度)及 19例正常孕妇足月分娩的胎盘组织胰岛素受体基因第17-21外显子的 多态性,对显示不同SSCP带型的PCR产物进行直接测序,以检测是 否存在基因突变。另外应用放射免疫分析方法检测妊高征患者空腹血 胰岛素水平。 研究目的:1、验证妊高征患者(轻度、中重度两组)是否存在胰 岛素抵抗;2、初步探讨妊高征胰岛素抵抗的分子机理。 实验结果: 1、妊娠高血压综合征患者空腹血胰岛素水平(29.8±13.1mU/L) 高于正常妊娠组(16.9±5.5mU/L),P<0.001。纠正体重指数(BMI)、 年龄、孕周的影响,该差异仍具有统计学意义。妊高征组分为两组: 轻度一组及中重度一组:轻度妊高征组的空腹血胰岛素水平 (29.7±14.9mU/L)高于正常妊娠组,P<0.005;中重度妊高征组的 空腹血胰岛素水平(29.9±12.5mU/L)同样高于正常妊娠组,P<0.001。 轻度与中重度妊高征两组之间进行比较,空腹血胰岛素水平无差异, 硕士论文 P>o.05。轻度、中重度妊高征及正常妊娠三组空腹血糖水平正常。 2、PCR-SSCP检测胰岛素受体基因外显子17显示3种不同的SSCP 带型,分别称为带型 1、11、Ill。2 9例妊高征患者中 13例表现带型 1,15例表现带型*,l例表现带型 Ill;19例正常孕妇中 5例表现带 型 1,12例表现带型*,2例表现带型 ill。妊高征组及正常妊娠组中 不同带型的出现率相比无差异。对显示不同 SSCP带型的外显子 17的 PCR产物直接测序结果:表现SSCP带型1型的外显子17的DNA序 列正常,第1058位编码基因为**C,与文献报道的一致:ss*P带型 11型的发现第10 5 8位编码基因为C AC汀,为杂合型的碱基取代;而 SSCP带型Ill型的则为纯合型的碱基取代,第1058位编码基因为CAC —CAT。此位点的单碱基取代不改变编码氨基酸,为常见的沉默型多 态。此结果表明妊高征组及正常妊娠组均出现胎盘组织胰岛素受体 基因外显子 17 的单碱基取代:HIS1058 CAC-CAT 或 CAC— CAC/CAT,此为沉默型多态,两组中的出现率无差异。 3、PCR-SSCP检测胰岛素受体基因外显子 20显示 2种不同的 SSCP 带型,但对PCR产物进行测序,却发现具有不同带型的PCR产物其 碱基序列一样,均为正常序列。外显子18、19、ZI均未检测到有不同 的SSCP带型,未行测序。 结论:l、轻度及中重度妊娠高血压综合征均存在胰岛素抵抗。 二、①妊高征组及正常妊娠组在胰岛素受体基因外显子17均出现 纯合型的或杂合型的单碱基取代:HIS 1058 CAC—CAT 或CAC— CAC/CAT,此为沉默型多态,两组中的出现率无差异。②外显子 18.ZI 均未发现有无义突变、错义突变或任何单碱基取代。3、未发现妊高征 胰岛素抵抗的发生与患者胎盘组织胰岛素受体基因外显子17-ZI 的无 义突变或错义突变有关系。


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