收藏本站
《第二军医大学》 2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

乙型肝炎病毒preS2-S基因(adr亚型)转基因小鼠的建立

苏小平  
【摘要】: 人类乙型肝炎病毒属嗜肝DNA病毒科,至少有4种亚型:ayw、adr、ayr、和adw。其中adr亚型是中国人的主要流行株,其基因组DNA已被克隆,全长3.2kbp,与其他3种亚型在DNA水平和蛋白水平具有一定差异。HBV基因有4个开放阅读框(open reading frame,ORFs),其中编码外膜蛋白分子的同一阅读框被两个框内(in-frame)起始密码子分割为preS1、preS2和S。preS/S基因表达L蛋白,包含preS1、preS2和S。preS2-S基因表达M蛋白,包含preS2和S。目前,对中蛋白在乙型肝炎病毒生活周期中的功能及与其它乙型肝炎病毒蛋白间的相互作用尚不清楚。转基因技术是研究基因功能的理想方法。建立表达中蛋白的转基因小鼠将为中蛋白功能的研究提供理想的动物模型。 本研究采用已经构建了的含有CMV启动子和preS2-S基因(adr亚型)开放阅读框的preS2-S基因表达载体pcDNA3-S2-S,酶切鉴定证实载体构建成功,DNA测序证实插入的preS2-S基因序列与报道的序列一致。该载体转染入Hela细胞后,免疫细胞化学检测发现M蛋白可在Hela细胞的细胞质和/或细胞核中表达。将该载体经BglⅡ限制性内切酶线性化后,用原核显微注射法将其注射入受精卵雄原核,制备转基因小鼠,共得到23只存活的新生鼠。经PCR方法检测后获得5只Founder转基因小鼠,转基因整合率为21.7%(5/23),以抗HBs进行肝组织切片免疫组化检测,3只小鼠呈阳性,阳性率为60%,命名为C57-TgN(preS2-S/adr)SMMU。将该建立者小鼠与正常同系小鼠交配,获得14只小鼠,PCR检测发现8只阳性,阳性率为57.1%(8/14),将F_1代PCR阳性鼠再和正常同系小鼠交配获得28只F_2代小鼠,PCR检测发现6只阳性,阳性率为21.4%(6/28)。 上述结果表明,目的基因不但可以在转基因小鼠体内稳定地遗传,而且可以在转基因小鼠体内表达目的蛋白。该品系转基因小鼠的建立为研究乙型肝炎病毒中蛋白的功能及基于中蛋白的治疗性DNA疫苗提供了一个候选的动物实验模型。
【学位授予单位】:第二军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R346

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄愈玲;毕锡明;梁雪莹;;广州市2005年-2009年从业人员乙肝病毒感染状况分析[J];中国卫生检验杂志;2011年07期
2 李慧莲;;慢性乙型病毒性肝炎患者的自我护理[J];内蒙古中医药;2010年08期
3 郭华英;;中西医结合治疗肝炎的护理体会[J];医学信息(上旬刊);2011年09期
4 金哲龙;;龙井市2006~2009年食品和公共场所从业人员HBsAg携带情况的初析[J];医学信息(上旬刊);2011年08期
5 杜增兰;王岐;;乙型肝炎外膜大蛋白血清学检验及临床意义[J];临床医药实践;2011年08期
6 樊代明;;消化病 几多“是”中几多“非”[J];医学争鸣;2010年02期
7 余瑞芳;刘亚;刘怀印;;2004—2010年商丘市丙肝流行病学分析[J];河南预防医学杂志;2011年04期
8 孟连柱;高爱武;韩丽娟;边剑飞;杨胜芬;;检测慢性乙型病毒性肝炎患者血清硝基酪氨酸的意义[J];河北医药;2011年14期
9 ;看点[J];家庭之友(爱侣);2011年09期
10 邵爱东;张彦;;147例丙型病毒性肝炎临床治疗回顾性分析[J];中国医药导报;2011年23期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 黄育华;盛国光;张建军;;海珠益肝胶囊的抗乙型肝炎病毒作用疗效观察[A];2002全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2002年
2 谭太昌;;HBsAg和HbcAb阳性患者血清前S1抗原检测的临床意义[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
3 王鸣;余育胜;周建平;雷文兰;张莉;;咸宁烟厂工人乙型肝炎抗原抗体系统检测结果分析[A];生命科学与微生物专辑[C];2004年
4 白伟利;王晓云;;针对HBV-P基因的RNA干扰抑制乙型肝炎病毒研究[A];濮阳市首届学术年会论文选编[C];2006年
5 吴志强;熊焰;;乙型肝炎病毒荧光定量检测与其血清标志物检测结果的相关性研究[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
6 苏海霞;闫永平;徐德忠;李端;卢娟;;乙型肝炎病毒前C/C和前S/S基因异质性及其与宫内感染关系的初步研究[A];全面建设小康社会:中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集(下)[C];2003年
7 张涛;;荧光定量PCR测定抗体阳性HBV-DNA[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
8 周飞;王灵台;陈建杰;赵钢;张斌;;乙型肝炎病毒BCP联合点突变与中医证型的关系[A];第十三次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2004年
9 侯远沛;宋丽;;乙型肝炎标志物定量检测结果与HBVDNA含量相关性分析[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
10 陈欣如;侯岩岩;燕顺生;;肝炎病毒动物模型的研究进展[A];中国实验动物学会第六届学术年会论文集[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;乙型肝炎病毒宫内感染的早期诊断[N];科技日报;2005年
2 徐超;专家提出肝炎病毒检测新见解[N];科技日报;2010年
3 本报记者 李健 健文;专家指出文身和穿耳洞是潜在的肝炎病毒传播途径[N];中国消费者报;2010年
4 张孟军;美将两种肝炎病毒列为致癌物[N];科技日报;2005年
5 白庭;肝炎病毒的空气中能存活多久[N];农村医药报(汉);2007年
6 李民 阿不力克木·土尔逊 土逊克孜;重视肝病的防治[N];喀什日报(汉);2005年
7 王有国;肝炎病毒争霸[N];家庭医生报;2006年
8 王有国;肝炎病毒争霸[N];家庭医生报;2006年
9 周华英;新肝炎病毒可经宫内母婴传播[N];大众卫生报;2002年
10 佘峥李静 顾影;国际顶尖科学家在厦向肝炎病毒宣战[N];厦门日报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陆荫英;乙型肝炎病毒相互作用蛋白编码基因的克隆化及新基因功能的初步研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2003年
2 倪宏;乙型肝炎病毒感染与肝细胞凋亡的关系研究[D];第一军医大学;2001年
3 邵俊斌;乙型肝炎病毒细胞核转位动态监测及HBV cccDNA荧光定量PCR分析研究[D];浙江大学;2004年
4 王刚;HBV感染HepG2细胞早期过程研究[D];山东大学;2005年
5 张志超;乙型肝炎病毒表位PreS1基因工程抗体的获得——天然及免疫人源单链抗体库的构建[D];大连理工大学;2002年
6 吴健;肝移植病人乙型肝炎病毒再感染的临床和基础研究[D];浙江大学;2001年
7 孙殿兴;复制缺损型HBV的构建及其表达反义RNA和显性阴性突变体抗HBV作用的研究[D];第三军医大学;2001年
8 李伯安;乙型肝炎病毒e抗原相互作用蛋白基因的克隆化及功能的初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
9 王迅;á干扰素诱导的细胞蛋白与乙型肝炎病毒相互作用关系的研究[D];复旦大学;2004年
10 邢同京;HBV转录后调节序列在非细胞毒机制中的作用及其异质性的生物学意义[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 葛军辉;乙型肝炎病毒变异型s基因疫苗逆转转基因小鼠免疫耐受的研究[D];第二军医大学;2003年
2 贺启贵;门脉高压性胃病病理初步分析[D];山西医科大学;2003年
3 张胜权;N-乙酰半胱氨酸(NAC)抗乙肝病毒(HBV)作用[D];安徽医科大学;2001年
4 赵书民;乙型肝炎病毒pres_2-s基因(ayw亚型)转基因小鼠的建立[D];第二军医大学;2002年
5 张伟;乙型肝炎病毒前S区不同片段的克隆、鉴定及与PreS1基因相互作用蛋白在酵母双杂交系统中的筛选[D];第四军医大学;2002年
6 曾国兵;中国大陆地区乙型肝炎病毒基因型地理分布及临床相关研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
7 董梅;乙肝病毒基因型分布及临床意义[D];新疆医科大学;2003年
8 沈健;乙型肝炎病毒标志物时间分辨荧光免疫分析法的研究[D];华南师范大学;2004年
9 于丽君;慢性乙型肝炎患者外周血白细胞膜干扰素受体表达的临床研究[D];山东大学;2005年
10 郭培奋;乙型肝炎病毒(HBV)宫内传播及免疫前后HBV S基因变化的研究[D];第一军医大学;2001年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026