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冷血持续微量灌注保存供体心脏

李忠东  
【摘要】:本课题采用离体工作心模型,以Euro-Collins液为保存液,比较不同保存方法对离体兔心的保存效果,探讨和评价在以晶体保存液为灌注液的心脏保存过程中,微量灌注方法的心肌保护作用和实用性。为寻找一种适合我国国情的有效心脏保存方法和进一步提高供体心脏保存质量,借鉴体外循环手术持续温血灌注保护心肌的研究成果,设计了经冠状静脉窦冷血持续微量灌注的方法,本课题的第二、三部分通过在体动物实验和临床应用,探讨和评价冷血保存液结合持续微量灌注保存技术对供体心脏的保护作用和临床应用的可行性、实用性。 实验的第一部分将32只健康新西兰白兔分为4组,每组8只。离体兔心低温停搏后主动脉逆行灌注4℃ Euro-Collins液15ml/Kg,随后离体心升主动脉接微量输液泵,以5 ml·g heart wt~(-1)·24 hr~(-2)的流量4℃灌注保存4~6小时,设不保存和冷晶单次灌注保存为对照组。保存后建立离体工作心模型,再灌注60分钟时测定心脏功能指标:左心室收缩峰压(LVSP);左心室内压力变化最大速率(LV±dp/dt max);心率(HR);心输出量(CO)。记录心脏工作45分钟时主动脉压超过100cmH_2O的例数,测定心肌含水量,电镜观察心肌细胞超微结构的改变。 实验结果提示:本实验所建立的离体工作心模型性能稳定,所测指标可靠,容易获取,重复性好,适用于心脏保存效果的评价。各微量灌注保存组再灌注后心脏功能指标与不保存对照组相比无明显差异,超微结构观察无心肌细胞不可逆改变;而单次灌注保存组心脏功能较不保存 第止军医大学 冷血持续微黛灌注保存供体心脏 博十论文 对照组和微量灌注组明显降低,差异显著,超微结构出现心肌细胞不可 逆改变。,。月几含水量微量灌注组与对照组相比无明显增加。 微量灌注方法(Microper九sion,MP)的优越性在以胶体保存液为灌 注液的实验中得到肯定,其低流量使得保存期间无需维持组织供氧,这 样就避免了再灌注后的氧自由基损伤。另外,微量灌注能够在支持组织 无氧代谢需要的同时,控制酸中毒并及时冲洗除去组织内毒性代谢产物。 目前主要用于临床,心脏移植的是晶体保存液,如St.Thomas液、Collins 液和Euro一Collins液等,本实验以Euro一Collins液为灌注保存液,结合微 量灌注方法保存离体兔心6小时,结果表明微量灌注方法明显优于单次 灌注方法,证明对目前常用的晶体保存液,微量灌注能提高保存质量, 从而推论组织酸中毒和毒性代谢产物堆积是影响保存效果的重要因素。 心肌含水量的测定结果表明,微量灌注保存前后,二肌含水量增加不明显, 说明微量灌注可以避免心肌细胞间质水肿。无氧低温微量灌注与其它灌 注方法相比,具有简单实用的特点,保存期间无需充氧,保存效果可靠。 2小时内的延迟微量灌注,其保存后心脏力学指标、泵功能、超微结构 等与连续微量灌注和正常对照组相比,无明显差异,因而同样具有提高 保存质量、延长保存时间的效果,并更具临床应用价值。 课题的第二部分将26条体重14.9士2.2 Kg的杂种犬相近体重配对 后,随机分为冷晶体停搏液单次灌注保存组(对照组)和冷血保存液持 续微量逆灌保存组(实验组)。实验组冠状静脉窦内插入带气囊防倒流逆 灌管连接便携式微量输液泵,以0.05ml/Kg/min的速度持续灌注氧合冷 血保存液(一。℃,PO:28.36士4.33k一,a,I,一I:7.48,Ilerr:一8一20%,K’:8- gmmol/L),保存时间1 68.57士1 9.45 min,随后作犬心的原位移植,术中 第二军医大学 冷血持续微量灌注保存供体心脏 博士论文 改用机器氧合温血做持续逆灌(速度:2一4ml/Kg/min,温度:28一32 ℃)。移植后结果显示:各组心脏复跳后心电监测均显示窦性双P波,血 压、,讼率均能在停机前恢复至术前水平,实验及对照组之间无明显差异; 但与对照组相比,冷血持续微量逆灌保存组自动复跳率高、复跳后辅助 循环时间时间短、撤离体外循环时多巴胺用量小,两组间差异显著 (P0.ool),心肌超微结构观察提示实验组心肌细胞的线粒体未发生形 态学改变和不可逆损伤。 离体,心脏保存一直被认为是低温体外循环术中,.月几保护的延续,其 理论和实验基础大多源于,心肌保护的研究成果。近年来温血持续逆灌方 法对心肌的有效保护作用已得到学术界的共认,由于该方法避免或最大 程度减轻了围手术期心肌缺血性损害和再灌注损伤,因此,实验和临床 应用都显示其心肌保护效果优于晶体停搏液。本实验所采用的晶体停搏 液顺灌后继以冷血连续逆灌的方法,既符合移植对供体保存的各项基本 要求一通畅、“干净”和低温,又最大限度减轻了缺血性心肌损害,使常 规保存过程中的心肌细胞无氧代谢变为有氧代谢,增加了能量牙!」用和储 备,减少主动脉开放后氧自由基的生成。氧合血持续灌注除不中断保存 期间氧供外,还可提供心肌代谢所需的底物,控制酸中毒和及时冲洗去 除组织内毒性代谢产物。另外,低温使停搏心脏的代谢进一步减低,供 心对氧的需求量很小,使简便实用的微量灌注成为可能。实用于临床心 脏移植的保存方法除了应具有良好的,。肌保护效果,还须具备简单可靠、 经济实用等优点。冠状静脉窦逆灌技术对离


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