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《第二军医大学》 2004年
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蛋白酶激活受体-2与海水浸泡伤后急性胃黏膜病变关系的研究

朱雄伟  
【摘要】:研究背景 急性胃粘膜病变(AGML)是机体在各种临床危重病,严重创伤及严重心理障碍的常见并发症,具有较高的发病率和死亡率,其发生机制尚未完全清楚。目前认为,应激状态下胃黏膜的急性病变涉及胃黏膜保护机制的削弱、损伤因素相对增强以及机体神经内分泌功能失调等诸多方面,是多因素综合作用的结果。胃酸是最常见的内源性损伤因子,氨基己糖和磷脂是重要的局部保护因子,在AGML发生发展过程中起重要作用,并且有多种神经肽参与其中。 海战时伤员落水并浸泡在碱性、高渗海水中是极常见的现象,这是一种严重的应激状态。目前有关海水浸泡伤的报道不多,既往研究AGML的动物模型均不能准确反映海水浸泡伤时特殊的病理生理学状态。 最近研究发现,静脉注射CGRP和NKA对胃黏膜有保护作用。PAR-2广泛分布于胃肠道黏膜上皮,SLp-NH_2作为PAR-2的特异性激动剂,可刺激胃黏膜辣椒辣素敏感性神经元释放CGRP和NKA,通过促进黏液分泌、抑制胃酸分泌、短暂增加胃黏膜血流量等机制保护胃黏膜,但海水浸泡伤大鼠胃黏膜与血浆中CGRP、NKA的动态变化及胃黏膜PAR-2mRNA与蛋白的表达变化尚未见报道。 本课题基于上述的最新研究设计而成。 目的 1.建立海水浸泡伤大鼠AGML模型,观察大鼠胃壁细胞泌酸功能及其超微结构改变。 2.观察海水浸泡伤大鼠胃黏膜与血浆中CGRP、NKA及胃黏膜中氨基己糖、磷脂的动态变化。 3.探讨海水浸泡伤大鼠胃黏膜PAR-2mRNA与蛋白的表达。 4.探讨SLp-NH_2对海水浸泡伤胃黏膜损伤的影响及其意义,从而为海战伤时防治AGML探索新的途径。 方法 1.在腹部开放性创伤和人工海水浸泡双重应激情况下,在应激1h、2h和3h时 第二军医大学临床型医学博士学位论文 中文摘要 段,按Guth标准评估sD大鼠胃翁膜损伤溃疡指数(Ul);采用pH计检测胃 液娜值;光学显微镜下观察胃猫膜组织病理学改变,透射电镜下观察壁细 胞超微结构变化。 2.分别用砒A法和EIA法检测海水浸泡伤大鼠胃翁膜、血浆中CGRp和NKA; 比色法测定胃勤膜氨基己糖;改良抗坏血酸还原法测定磷脂。 3.应用IHC、RT一PCR及Westem blot检测海水浸泡伤应激状态下大鼠胃薪膜 PAR.2的表达。 4.观察小剂量(0.02脚01/kg)、中剂量(0.2林mol瓜g)和大剂量(2林mol瓜g) SLP-N到[2预处理(半小时前)对应激2h大鼠胃翁膜CGRp、NKA水平及胃 薪膜氨基己糖、磷脂含量的影响,并与生理盐水治疗组和雷尼替丁治疗组的 疗效作比较。 结果 1.正常组胃黔膜未见损伤,光镜下勃膜结构完整:海水浸泡伤应激lh组勤膜表 面少量斑点状糜烂、出血,UI为n.25士1.98,明显高于正常组(产。.01); 应激2h组豁膜表面有少量血痴,散在多量点线状糜烂、出血,饥为30.50土 3.96,高于应激lh组(厂。.01),光镜下可见勒膜表层多量坏死脱落,局部腺 体结构紊乱;应激3h组瀚膜面有多量血痴,弥漫性点线状糜烂、出血及溃疡, 饥为5013士2.95,明显高于应激2h组(P0.ol),光镜下可见翁膜明显出血、 坏死、脱落、中断,溃疡呈火山口状,深达翁膜肌层。UI与应激时间呈正相 关(同,90,Po.OI)。正常组胃液PH为2.57士0.04:应激lh组为2.23士0.18, 明显低于正常组(产。.01);应激2h组为1.84士。.03,明显低于lh组(产。.01); 应激3h组为1.30士0.05,明显低于2h组(夕幻.01);胃液的PH值与胃勤膜 损伤的程度呈现明显的负相关(产一0.70,严0.01)。对照组壁细胞内可见大 量散在分布的囊泡和管泡结构,分泌小管内绒毛稀少或缺如,呈静息状态; 应激lh组可见分泌小管绒毛短少,周围有多量囊泡聚集,呈开始激活状态; 应激Zh组分泌小管增多,绒毛增多增长,胞浆内囊泡明显减少,呈激活状 态:应激3h组分泌小管密集,周围的囊泡基本消失,呈明显的泌酸活跃状 态,尚可见凋亡小体的形成。胃酸的分泌状态与壁细胞超微结构的变化一致。 2.应激lh、Zh、3h组大鼠胃戮膜NKA含量(分别为60.63士6.50、49.12*6.67、 35.2矢3,95n昨勿tissue)均比正常组(70.2肚民92ng/g勿tissue)显著降低 (产。仍),并随应激时间的延长而明显下降(厂。.05)。三个应激组大鼠血 第二军医大学临床型医学博士学位论文 中文摘要 浆NKA含量(分别为5.25士0.68、6.0肚0.71、7.3升o.58n创ml)比正常组 (3 .95士1.58n留ml)升高(厂。.05),随着应激时间的延长而显著升高(厂0.01)。 三个应激组大鼠胃翁膜CGRp水平(分别为2816土4.72,21.02料石2, 14.7人2.slPmoUg勿tissue)均比正常组(36.12士4.36Pmo魄dry tissue)显著 减低(P0.OI),随着应激时间的延长而明显下降(厂。.05)。血浆中CGR卫 含量(分别为84.2兔4‘17、957矢5.05、116.22士16.17四。腼l)则比正常组 (72.11月1.19Pm。腼l)显著升高(P0.05),随着应激时间的延长而显著升 高(尸。.05)。海水浸泡伤lh、2h及3h组氨基己糖(分别为0.5牡0.04、0.44土0.02、 0.35*0.05片岁mg protein)和磷脂(分别为0.5升0.05、0.5肚0.04、0.33士0.07卜创mg protein)较对照组(氨基己糖:0.62士0.05林留mg Protein:磷脂:0.64土0.0
【学位授予单位】:第二军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R573

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【引证文献】
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1 夏天;紧密连接蛋白CLAUDIN-1在大肠杆菌性腹泻仔猪胃肠组织中的表达及意义[D];华中农业大学;2010年
2 杨雪;伤寒沙门氏菌致病仔猪胃肠道组织中蛋白酶激活受体2的定位研究[D];华中农业大学;2007年
【参考文献】
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【共引文献】
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