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可诱导共刺激分子重组蛋白的研制及其在过敏性哮喘炎症中的治疗作用

王健  
【摘要】:本课题采用基因工程重组DNA技术克隆ICOS活性片段、构建ICOS-mlg融合基因真核表达载体,在哺乳动物细胞中实现ICOS-mlg的高效表达,并通过亲和层析技术纯化重组蛋白;在此基础上,进行了ICOS-mlg体内外生物学功能的研究;观察了ICOS-mlg阻断共刺激通路对过敏性哮喘炎症的影响;采用Insightll分子模拟的方法和配体亲和筛选突变点,并构建、表达获得配体高结合活性ICOS突变体融合蛋白,用异基因混合淋巴细胞增殖抑制试验检测突变体蛋白的生物学活性;另外经过反复实验,完成了基因工程人源ICOS-Ig的纯化工艺研究,为下一步中试规模的制备和实验研究打下了基础。


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