收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

富氢水对大鼠肠缺血再灌注损伤以及四氯化碳诱导的肝损伤的保护作用及其机制

郑兴锋  
【摘要】: 富氢水对大鼠肠缺血再灌注损伤以及四氯化碳诱导的肝损伤的保护作用及其机制 背景:肠缺血再灌注(intestinal ischemia-reperfusion, IIR)损伤和药物/化学性肝损伤(drug/chemical induced liver injury)是烧伤科以及危重病领域常见的两个临床问题。严重烧伤、急性失血、休克、脓毒症、肠梗阻、肠系膜血栓等因素常常引起肠缺血再灌注损伤,ⅡR可导致肠动力不足,通透性增加,粘膜屏障功能受损,ⅡR不仅引起肠道的局部损伤,尚可引发全身炎症反应和远隔器官的损伤,是引起多器官功能障碍综合征(MODS)的重要原因。药物/化学性肝损伤也是临床常见并且棘手的问题之一,随着药物的不断开发利用,随之而来的副作用也不断增加。另外,肝脏作为体内最大的代谢和解毒器官,常常受到多种不同外源性以及内源性因素的损伤,保肝护肝成为细胞保护策略的首要任务。四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl4)是一种亲肝的细胞毒性物质,CCl4诱导的肝损伤模型被广泛用作药物/化学性肝损伤的首选实验动物模型,此外,CCl4还是工业生产中常用的化合物,CCl4中毒的处理也是危重病与急救医学的重要内容之一 在肠缺血再灌注损伤以及的四氯化碳诱导的化学性肝损伤的致病过程中,氧化应激起到了非常重要的作用。活性氧自由基的大量产生和激活作用是这两种模型共同的发病机制之一。活性氧自由基是活泼的氧自由基与具有氧自由基反应特性的其他含氧物质的总称,包括超氧阴离子自由基(·O2-)、过氧化氢(H2O2)、羟自由基(·OH)以及单线态氧(102)等。过量产生的氧自由基会导致DNA、脂质和蛋白的氧化损伤,其中·OH的毒性最强,并且到目前为止还没有发现哺乳动物体内内源性针对·OH的清除途径。近来,Ohsawa等发现了氢气分子可选择性清除细胞体系中的·OH,动物呼吸气体中一定浓度的氢气可以有效缓解脑缺血再灌注损伤。因此,本研究开发了更为安全和方便使用的氢饱和的生理盐水,这里称为富氢水,以肠缺血再灌注损伤以及的四氯化碳诱导的肝损伤为研究对象,观察富氢水是否具有保护作用并探讨其机制。 方法:(一)将健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、模型组(I/R)、富氢水处理组(I/R+H2)以及富氮水处理组(I/R+N2)。用无创小血管夹夹闭肠系膜上动脉(superior mesenteric artery, SMA) 45 min,松开血管夹再灌注120 min,建立肠缺血再灌注损伤模型。再灌注开始10 min前,于静脉分别注射5 ml/kg生理盐水、氢饱和生理盐水以及氮饱和生理盐水。再灌注结束后,取血和小肠组织。检测如下指标: 1)HE染色和病理学检查; 2)血清二胺氧化酶(diamine oxidase, DAO),组织丙二醛(malondialdehyde, MDA)、蛋白质羰基(protein carbonyl, PC)和髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO); 3)血清肿瘤坏死因子-a(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白介素-6(interleukin-6, IL-6) (二)将健康雄性SD大鼠随机分为溶剂对照组(control)、模型对照组(CCl4+N2)、富氢水处理组(CCl4+H2)。大鼠腹腔单次注射CCl4/橄榄油混合液(v:v=l:1)2 ml/kg bw制作急性肝损伤模型(生存分析实验大鼠腹腔注射CCl4/橄榄油混合液7.5 ml/kg bw)。在CCl4注射前10 min以及注射后每3小时腹腔分别给予5 ml/kg生理盐水、氮饱和生理盐水以及氢饱和生理盐水。CCl4注射12hr后,取血和肝组织检测如下指标(MAPK信号分子检测在CCl4注射3hr后取材): 1)HE染色和病理学检查; 2)血清AST、ALT、LDH活性和DBIL、TBIL水平; 3)TUNEL组织化学检查和组织Caspase-3活性; 4)组织丙二醛(malondialdehyde, MDA)和谷胱甘肽(Glutathione, GSH); 5)血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α); 6)组织MAP激酶信号分子:JNK、ERK和p38 MAPK磷酸化水平。 结果:(一)肠缺血再灌注后,组织学检查可见明显粘膜损伤,Chiu氏评分显著增加。血清DAO活性,小肠组织MDA、PC、MPO含量,血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著增高。富氢水处理可以显著缓解小肠病理学损伤,并显著抑制以上指标的升高,而富氮水处理组与模型组未见明显差别。 (二)富氢水处理可以显著延长大鼠CCl4中毒后的生存时间,减轻CCl4引起的大鼠肝脏病理学损伤,显著减少气球样变性细胞数量;显著降低CCl4引起的血清AST、ALT、LDH活性和DBIL、TBIL水平升高;显著减少CCl4引起的肝细胞凋亡,降低肝组织Caspase-3活性;显著抑制CCl4引起的肝组织MDA含量、血清TNF-a水平增高以及肝组织GSH含量的下降;显著降低肝组织JNK、ERK和p38MAPK磷酸化水平。 结论:1)富氢水可以有效减轻肠缺血再灌注损伤,其保护作用可能与富氢水减轻再灌注损伤引起的氧化应激,缓解中性粒细胞浸润和降低炎性因子升高等机制有关。 2)富氢水可以有效减轻CCl4诱导的肝损伤,其保护作用可能与富氢水抑制CCl4引起的肝细胞凋亡、减轻CCl4引起的氧化应激、降低TNF-α升高以及抑制MAP激酶信号通路激活等机制有关。 3)本研究开发并应用了富氢盐水用于静脉注射和腹腔注射的新途径,为氢气的应用范围、作用机制、给药方式、临床应用前景提供了新的参考依据,并为烧伤常见临床危重病救治提供了新的可能策略和方向。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 淤泽溥,蒋家雄,朱立华,李喆,郭晓红;丹参注射液对大鼠离体灌流肝及门静脉血管条的影响[J];中国中药杂志;1992年12期
2 王福财;龚非力;王红梅;温淦升;;大鼠间充质干细胞在小鼠肝损伤中的作用[J];江西医学院学报;2007年03期
3 蔡绍先;陈玮莹;吴健谊;张艳美;蔡尔慧;刘涛;宾向玲;温博贵;;五味子提取物对CCl_4中毒大鼠肝超微结构的保护作用[J];癌变.畸变.突变;2010年01期
4 李丰衣;张琳;;误饮四氯化碳致肝损伤1例报告[J];中西医结合肝病杂志;2010年03期
5 黄贵明;王冬梅;莫遗盛;李丽;;乐肝口服液对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用[J];中国现代药物应用;2010年14期
6 庞辉;玉艳红;汤桂芳;;三叉苦提取物对小鼠实验性肝损伤的保护作用[J];广西医科大学学报;2006年06期
7 周程艳;余海平;陶志彬;高艳山;边洪荣;;杜仲水提物对四氯化碳所致小鼠肝损伤的保护作用[J];时珍国医国药;2009年09期
8 柳占彪;王鼎;王淑珍;哈斯;李浦维;郝光霞;刘彩英;;保肝灵对四氯化碳肝损伤的防治作用[J];内蒙古中医药;1992年03期
9 易善珍;胡如华;;恩施富硒藤茶水提液对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用[J];临床合理用药杂志;2009年19期
10 李春兰;赵亮;;蒲公英多糖对四氯化碳肝损伤小鼠的保护作用[J];中国实用神经疾病杂志;2010年17期
11 喻宁华;曾富华;饶力群;;仙人掌多糖对急性肝损伤小鼠的保护作用[J];湛江师范学院学报;2007年06期
12 谢湘媚;刘志伟;林少宾;朱苑雯;林镇湖;郭晓才;马宁芳;;四氯化碳致小鼠急性肝损伤的性别差异及其与雄激素受体表达的关系[J];解剖学研究;2007年06期
13 朱海波;王长海;郑秋生;;海带多糖对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用[J];烟台大学学报(自然科学与工程版);2008年03期
14 谢明霞;汪鋆植;周媛;邹坤;;排风藤提取物及单体化合物对急性肝损伤的保护作用研究[J];中药药理与临床;2009年03期
15 祝子明;许道翠;;护肝汤对大鼠化学性肝损伤的保护作用及机制研究[J];医药导报;2010年08期
16 李光燮;朴成哲;;山茱萸总苷对四氯化碳诱导的急性肝损伤的影响[J];山东医药;2011年20期
17 黄真;毛庆秋;;三叶青总氨基酸对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用[J];中国现代应用药学;2007年03期
18 孙玉军;陈彦;周正义;周丽伟;;羊肚菌胞内多糖对小鼠急性肝损伤的影响[J];中国食用菌;2008年02期
19 冯天艳;方荣;邓改改;罗友成;邹坤;陈剑锋;薛冰洁;王雅琴;汪鋆植;;根皮苷对小鼠CCl_4急性肝损伤的保护作用[J];中药药理与临床;2010年05期
20 梁莉;乔华;王婷;常威;李丹;;南沙参多糖对CCl_4及D-氨基半乳糖致急性肝损伤的保护作用[J];中药药理与临床;2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 宁康健;;当归水煎醇沉液对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用[A];中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十次研讨会论文摘要集[C];2009年
2 郑兴锋;王广庆;杨晓妍;孙学军;夏照帆;;富氢盐水对四氯化碳诱导的肝损伤的保护作用[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
3 邱爽;李国力;;三七总皂甙对实验性肝损伤的防治作用及其机制[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
4 朱勇;徐建雄;;微生物源性抗氧化剂对大鼠自由基代谢和肝脏损伤的保护作用[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
5 郭忠;;益肝补肝汤对四氯化碳致肝损伤的保护作用[A];“以岭医药杯”第八届全国青年药学工作者最新科研成果交流会论文集[C];2006年
6 周鸣;张永和;邓毅峰;张瑞鹏;;舒肝胶囊对化学因素所致肝损伤的影响[A];第四次中西医结合实验医学学术会议论文集[C];2000年
7 戎茜;安利国;袁金铎;邢维贤;;库拉索芦荟多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年
8 程富胜;张霞;罗永江;胡振英;;大蒜多糖对肝损伤小鼠血清及组织转氨酶影响[A];纪念《元亨疗马集》付梓400周年中国畜牧兽医学会中兽医学分会2008年学术年会华东区第十八次中兽医科研协作与学术研讨会暨兽药发展论坛论文集[C];2008年
9 蔡黔;袁建成;肖光夏;吴军;周立新;;肠源性内毒素在烧伤后诱导肝损伤中的作用[A];中华医学会第五次全国烧伤外科学术会议论文汇编[C];1997年
10 庄甲举;张维立;张亚超;姜红;刘会敏;王憬;;Losartan减轻大鼠免疫性肝损伤以及铁过负荷的影响[A];中国营养学会第十届微量元素营养学术会议论文摘要汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郑兴锋;富氢水对大鼠肠缺血再灌注损伤以及四氯化碳诱导的肝损伤的保护作用及其机制[D];第二军医大学;2010年
2 裴宗平;某市岩溶地下水水源地四氯化碳污染机理研究[D];中国矿业大学;2010年
3 于昉;激活素A-卵泡抑素系统在肝损伤中的作用研究[D];吉林大学;2011年
4 陈鹏;生理节律与一种新型功能型葡聚糖对哺乳动物肝损伤保护作用的研究[D];南京理工大学;2011年
5 申竑;骨形态发生蛋白BMP-4对大鼠肝卵圆细胞增殖和分化调控作用的实验研究[D];中南大学;2010年
6 宋明;肝再生增强因子对大鼠肝纤维化的治疗作用及机制研究[D];沈阳药科大学;2012年
7 魏华;中西医结合治疗肝衰竭系统评价及愈肝解毒汤治疗肝损伤实验研究[D];成都中医药大学;2012年
8 王晓源;复方胡黄连胶囊治疗肝损伤的药效学研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
9 白静丽;Smad蛋白在实验性肝纤维化过程中的动态变化及肝纤溶颗粒的干预作用[D];吉林大学;2006年
10 杨建新;腹部术后疲劳综合征模型及抗术后疲劳方作用的研究[D];湖北中医学院;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 贾杰;岩黄连总碱对实验性肝损伤的保护作用及其机制研究[D];广西医科大学;2009年
2 王陈红;药物0412抗慢性肝损伤作用的实验研究[D];浙江大学;2006年
3 孙丕健;维生素C对大鼠酒精性脑和肝损伤的保护作用研究[D];苏州大学;2011年
4 林都;双花颗粒对小鼠实验性肝损伤的保护作用[D];西南大学;2010年
5 常燕;生大黄在大鼠重症急性胰腺炎肝损伤中的研究[D];山西医科大学;2012年
6 沈刚;MG132调控Nrf2/Keap1-ARE通路对肠缺血再灌注肝损伤的影响[D];大连医科大学;2010年
7 路景涛;复方黄芪提取物的保肝作用及其机理研究[D];安徽医科大学;2003年
8 夏珂;逍遥散对肝损伤大鼠的时辰药动学、时辰药效学研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
9 陈小囡;丹参注射液对大鼠酒精性肝损伤的保护作用[D];浙江大学;2003年
10 陈立波;注射用盐酸苦参碱对化学性及免疫性肝损伤的影响[D];沈阳药科大学;2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 郭欣;明年起严格限制四氯化碳产购用[N];中国化工报;2009年
2 胡晓斌;四氯化碳还有出路吗?[N];中国化工报;2004年
3 王开祥;四氯化碳将于2010年淘汰[N];中国环境报;2004年
4 ;四氯化碳(四氯甲烷),CCL4)[N];中国化工报;2002年
5 特约记者 杜萍;江苏四氯化碳转化项目通过验收[N];中国化工报;2006年
6 盛文;肝损伤患者慎用厄洛替尼[N];中国医药报;2008年
7 易奕;美国警告:厄洛替尼肝损伤风险[N];医药经济报;2009年
8 蓝斌;首套四氯化碳转产四氯乙烯装置投产[N];中国化工报;2007年
9 辽宁 主任医师 王振坤;“老药罐”不会发生肝损伤吗[N];家庭医生报;2009年
10 ;关木通对大鼠致癌性的实验研究[N];中国医药报;2003年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978