收藏本站
《第三军医大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

肠出血性大肠杆菌EHECO157:H7的分子进化研究

姬小薇  
【摘要】:肠出血性大肠杆菌(EHEC) O157:H7作为一种重要的人畜共患传染病病原菌,其感染具有暴发流行趋势、强烈的致病性与致死性和抗生素治疗可加剧病情的危险性等特点,已成为全球性的公共卫生问题,对人们的健康构成了巨大威胁。此外,EHEC O157菌培养容易、感染力强、传播途径多样,使O157菌极有可能作为未来军事斗争的细菌武器和生物恐怖战剂;O157菌的烈性致病因子还有可能用于基因武器的构建。美国疾病控制中心已将其列为B类生物恐怖病原体严加防范。因此,无论从公共卫生还是生物反恐的需要出发,加强其流行病学研究对预防和控制O157感染具有重大的战略意义。 病原体在进化的过程中通过自然突变、转导和转化等方式发生遗传物质的改变,而引起性状(毒力、耐药性等)的改变。EHEC O157:H7是由055:H7进化而来的,大多数毒力基因都是在进化过程中获得的,对其引起人类疾病发挥关键的作用;同时毒力基因大多数处于移动性遗传物质上,很容易重新组合产生新的致病菌株,而导致O157感染的暴发流行。因此,从分子水平对EHEC O157:H7的流行病学进行研究,观察其分子变异和进化,可为O157感染的暴发提供预警信号以应对可能出现的流行事件。 本研究在对我国分离获得的EHEC O157:H7菌株进行微生物学、血清学、生化以及分子生物学(16S rRNA)检测等全面鉴定的基础上,采用PCR检测其主要毒力基因(stx1/2、hlyA、tccP)、MLST测定和分析其保守的管家基因(aspc, icdA, uidA,clpX,mdh, fadD ,lysp )核苷酸序列,通过系统生物学和分子进化分析,以研究EHEC O157:H7分子进化和流行规律,为寻找其感染暴发流行的预警信号提供线索和依据。 主要完成了以下工作: 1.对1999~2007年江苏省疾病预防控制中心建立的O157菌株资源库以及2005~2007年重庆市主城区和三峡库区收集的O157菌株库中的105株EHEC O157:H7菌株从分离培养、血清学试验、生化试验、16S rRNA检测等进行了全面鉴定。 2.对上述105株EHEC O157:H7菌株基因组的7个管家基因(aspc, icdA, uidA,clpX,mdh, fadD ,lysp )的核苷酸序列进行了测定,获得了7个ST型分别为ST836、ST837、ST838、ST839、ST840、ST841和ST842。其中ST837、ST840、ST841属于谱系1,ST836、ST838、ST839和ST842属于谱系2。 3.对上述105株EHEC O157:H7菌株基因组的毒力基因(stx1/2、hlyA、tccP)进行了PCR检测和分析,结果:所有菌株均检出了stx2基因,stx2的检出率为100%,仅1个菌株(99G144)同时携带stx1和stx2基因, stx1的检出率为0.95%;HlyA在105株的EHEC 0157:H7中检出率是100%;在105株EHEC 0157:H7中共检测出包括3个、4个和5个重复片段三种不同重复片段的tccp基因,其中三个重复片段的有13株(12.4%),4个重复片度的有6株(5.7%),5个重复片段的有86株(82.0%),同时,人源的菌株均为5个重复片段,动物源菌株70%菌株属于5个重复片段。 4.将获得的7个新的ST基因型与EcMLST数据库比对,采用最小进化树和分解树进行溯源分析,发现ST836是这105株的来源菌株,与来源于Sakai的ST66联系紧密,而ST66又与源于EDL933的ST69属于同一群,可以认为ST836与ST69、ST66是来源于同一祖先的。初步推测在中国爆发流行的EHEC O157:H7起源可能是由最早爆发的美国EDL933株经日本传播到我国的。 5.对不同分离地点和宿主来源菌株的STs分配频率分析发现:ST842仅来源于人源的,ST838、ST840、ST839这3个STs型仅见于动物源菌株。从菌株的数量来看,ST837的菌株最多,其次是ST836,两者占到85%。 结论: 上述研究工作为建立我国EHEC O157:H7菌株基因信息库奠定了一定的基础,同时为研究我国EHEC O157:H7的分子进化和流行规律、寻找其感染暴发流行的预警信号提供了有利的线索和依据。
【学位授予单位】:第三军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R378

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜自锋,林乃铨,徐梅;RAPD技术及其应用中的一些问题[J];福建农林大学学报(自然科学版);2002年03期
2 沈刚建,柴锡德,陈振东,徐强,邵振冬,黄培昌,郭秋生,郇树清,韩敬华;睢县出血性大肠杆菌O157∶H7监测结果分析[J];河南预防医学杂志;2004年02期
3 刘加彬;杨晋川;景怀琦;徐建国;;1999-2006年江苏省徐州市肠出血性大肠埃希菌O157:H7感染状况的流行病学研究[J];疾病监测;2007年08期
4 徐建国,景怀奇;中国1997~1998年O157∶H7大肠杆菌检测情况分析[J];疾病监测;1999年05期
5 陆美娟,胡万富,陶涛,虞勇;安徽省1999~2003年O157:H7大肠杆菌实验监测及其意义[J];疾病控制杂志;2005年05期
6 田舜;李韬;;AFLP技术操作流程的变革及其衍生技术[J];扬州大学学报;2006年04期
7 顾江;毛旭虎;;肠出血性大肠杆菌O157:H7 TCCP蛋白研究进展[J];微生物学免疫学进展;2009年01期
8 王茂起,冉陆,王竹天,李志刚,姚景惠,付萍,杨宝兰,徐进,李迎惠;2001年中国食源性致病菌及其耐药性主动监测研究[J];卫生研究;2004年01期
9 殷毅峥;程春荣;杨建国;安戈;武恩平;段晶晶;水艳;;郑州市肠出血性大肠杆菌O157:H7感染监测[J];现代预防医学;2007年21期
10 侯美英;大肠杆菌O_(157)∶H_7检测方法的研究进展[J];预防医学文献信息;2002年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 韩颖;;火棘基因组DNA的提取和RAPD稳定的反应体系的建立[J];安徽农业科学;2009年19期
2 樊晓霞;颜松;唐静仪;茆灿泉;李迪强;王万军;;7种菊科药用植物的RAPD分析[J];安徽农业科学;2010年17期
3 朱彬;;2007~2009年泰州兴化地区脱水裙带菜的细菌学检测状况调查[J];现代农业科技;2009年13期
4 赵春燕;易世红;李凡;;网状分枝扩增技术快速检测大肠埃希菌O157:H7及其他产志贺样毒素大肠埃希菌[J];吉林大学学报(医学版);2006年01期
5 曾志红;;断奶仔猪腹泻的生物防治效果研究[J];长春师范学院学报(自然科学版);2009年08期
6 张涛;杨青川;毛培胜;;RAPD分子标记鉴定紫花苜蓿品种的反应体系优化[J];草地学报;2006年04期
7 何长龙;毛青;;感染性腹泻常见6种病原体研究进展[J];重庆医学;2011年34期
8 王磊;樊军锋;刘永红;杨培华;王孟昌;;我国油松主要分布区种质资源遗传多样性[J];东北林业大学学报;2009年12期
9 陈智强;高仕瑛;;肠出血性大肠埃希菌O157:H7的分布及特征[J];当代医学;2010年04期
10 孙茂华;孟祥升;夏兴霞;赵攀登;张雪寒;何孔旺;王永山;;大肠杆菌O157:H7实验感染动物排菌动态检测[J];东南国防医药;2012年01期
中国重要会议论文全文数据库 前7条
1 杨小杰;卢永亮;;禽肠毒综合症的发病原因及防治分析[A];吉林省畜牧兽医学会2007学术年会论文集[C];2007年
2 苏良科;严亚贤;陆承平;;Stx2噬菌体ΦMin27的stx2基因突变株构建及其感染特性[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会论文集[C];2008年
3 来时明;陆献耀;;0157:H7大肠杆菌感染的流行病学研究综述[A];华东地区第十次流行病学学术会议暨华东地区流行病学学术会议20周年庆典论文汇编[C];2010年
4 陈卫国;汪垂章;张建民;金莞尔;王文英;于丽莉;杨瑞军;叶承华;;2002-2004年衢州市食源性致病菌监测[A];第三届浙江中西部科技论坛论文集(第九卷 预防分卷)[C];2006年
5 张文元;边敏章;何浙生;;O_(157):H_7(浙江株)的细胞毒性作用及其意义探讨[A];浙江省医学科学院建院55周年院庆论文专辑[C];2005年
6 何超;樊学军;汪东篱;刘丽英;王翠苹;裴晓方;;沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157:H7的多重PCR快速检测体系的初步探讨[A];达能营养中心青年科学工作者论坛优秀论文集2005年第6期[C];2005年
7 陆彦;赵红玉;张中文;候晓林;吴国娟;;禽源沙门氏菌多重耐药和Ⅰ型整合子流行调查[A];2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周论文集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王春阳;秀丽隐杆线虫益生菌动物模型的建立及应用研究[D];山东农业大学;2009年
2 任二军;蓝狐自咬症及遗传学基础研究[D];中国农业科学院;2011年
3 李蓓;蒙古马毛色性状相关基因多态性分析及组织表达研究[D];内蒙古农业大学;2011年
4 陈发波;茎瘤芥(Brassica juncea var. tumida Tsen et Lee)种质资源遗传多样性与育种潜势分析及起源进化探讨[D];四川农业大学;2010年
5 张雪寒;EHEC O157:H7 Stx2B-Tir-Stx1B-Zot重组菌的构建及其免疫原性的研究[D];南京农业大学;2011年
6 蔡继峰;苍蝇群落演替及MtDNA分子标记的法医学研究[D];四川大学;2005年
7 孙卫邦;濒危植物三棱栎的保护生物学与园林应用前景研究[D];南京林业大学;2006年
8 马颖;抗肠出血性大肠杆菌O157:H7志贺样毒素Ⅱ基因工程抗体的实验研究[D];第三军医大学;2006年
9 刘伟;西南区野生狗牙根种质资源遗传多样性与坪用价值研究[D];四川农业大学;2006年
10 陈红;嫁接及其接合部变异的研究[D];四川农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王小龙;沙门氏菌invH基因亚单位疫苗和C3d分子佐剂核酸疫苗的制备与免疫效果研究[D];山东农业大学;2011年
2 张霖;鼠伤寒沙门氏菌对鸡致病性及其对药物敏感性的试验[D];山东农业大学;2011年
3 张凌云;鸡场沙门氏菌的分离鉴定及耐药性研究[D];吉林农业大学;2011年
4 魏琼;沙门氏菌、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌多重荧光定量PCR快速检测方法的研究[D];吉林农业大学;2011年
5 罗德;寄主胁迫下小菜蛾种群适应性及遗传变异的研究[D];福建农林大学;2011年
6 孔繁娟;凉拌菜大肠杆菌O_(157):H_7污染状况及风险评估[D];中南大学;2011年
7 张辉建;畜禽肠道大肠杆菌耐药性及整合子—基因盒检测[D];四川农业大学;2011年
8 覃春红;动物源沙门氏菌耐药性及质粒介导喹诺酮类耐药基因的流行病学研究[D];四川农业大学;2011年
9 廖成水;鼠伤寒沙门氏菌Δcrp、Δcya缺失菌株的构建及其生物学特性比较研究[D];河南科技大学;2011年
10 杨曦;大肠杆菌O157 Stx噬菌体裂解酶的原核表达及活性研究[D];上海交通大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 汪永庆,徐来祥,张知彬;RAPD技术的标准化问题[J];动物学杂志;2000年04期
2 杨远庆,杨胜学,朱冬雪;贵州苦丁茶植物学特征及分类鉴定[J];贵州农业科学;1996年06期
3 史学群,刘国民,徐立新,唐碧军,陈圣政;冬青属苦丁茶不同种质材料之过氧化物酶同工酶和酯酶同工酶研究初报[J];贵州科学;2003年03期
4 刘国民;中国木犀科代茶植物的多样性与开发状况[J];贵州科学;2003年Z1期
5 刘国民,李娟玲,陈榆,罗文杰,潘学峰;我国苦丁茶冬青种质资源的形态学研究 Ⅰ.茎叶的形态学研究[J];贵州科学;2004年03期
6 付乾堂,张桂和,刘国民,彭国全,蒙海俊,史学群;冬青属苦丁茶不同种质材料的过氧化物酶同工酶分析[J];贵州科学;2004年04期
7 鄢东海;郑道君;梁远发;令狐昌弟;刘国民;田永辉;;粗壮女贞RAPD-PCR实验体系优化的研究[J];贵州科学;2007年02期
8 郭维植,程法稷,林成水,林杰,董新平,杨劲松,陈建辉,陈亢川;福建省O157大肠杆菌初查[J];海峡预防医学杂志;1997年04期
9 马宏,王建丽,王殿法,徐强,傅炳南,涂光理;产志贺毒素大肠杆菌多重PCR与Vero细胞毒实验对比研究[J];海峡预防医学杂志;2002年02期
10 庄菱,顾玲,郭喜玲,史智扬,潘浩,施平,周伟忠,张艺飓;大肠杆菌O157∶H7抗菌药物敏感性研究[J];疾病监测;2001年04期
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026