增生性瘢痕裸鼠模型的建立及其形成过程中MMP-1、TIMP-1、TGF-β1表达的动态观测

【摘要】： 目的：本研究建立了一种烧伤后的增生性瘢痕（HS）裸鼠模型，通过观察其大体形态、组织形态的变化，初步验证该模型的有效性和可行性；并利用该模型，研究MMP-1、TIMP-1、TGF-β1在烧伤创面修复和HST形成过程中的表达、关系和作用。 方法：将整形手术中获得的正常人全厚皮片，通过植皮手术移植到裸鼠背部，皮片的成活率达到了95%以上。移植皮片成活后，我们用加热后的铜棒在皮片中央做1个深II度烧伤创面。分别在创面形成后的12小时、2天、3天、5天、7天、15天、28天、3月、5月，观察、分析创面标本的大体形态学变化；并将裸鼠身上的标本组织全层地切取下来，对所获得的标本，将其均匀切成A、B两部分，A用来做组织形态学观察，包括HE和VG染色。B用来做冰冻切片，用免疫组化的方法检测MMP-1、TIMP-1、TGF-β1表达的变化情况。 结果：1、该模型中，烧伤后的创面经历了炎症期、增生期、重塑期三个独特而又重叠的阶段，创面修复至瘢痕形成全过程的大体和镜下特性与在人体时基本相同。形成的瘢痕在3月左右增生达到了高峰，增生最厚者厚度可达0.6cm；至5月左右，瘢痕已经软化和挛缩。2、MMP-1于烧伤后第2天在焦痂和真皮出现，第3天~15天在真皮中逐渐表达明显，第28天已下降到基底值。MMP-1的阳性染色在焦痂-真皮交界处、创面边缘的表皮-真皮接合部、真皮组织里残存的上皮附件中、以及血管周围均有分布。TIMP-1于烧伤后第2天在焦痂和真皮出现，很快就表现为类似于MMP-1的接触界面的表达模式，并且阳性染色一直持续到烧伤后5月瘢痕的形成。TIMP-1的阳性呈一种不一致、不规则的表达模式，散发性地在接触界面、残存的上皮附件中被发现，但是在血管周围有明显的分布。TGF-β1于烧伤后12小时在真皮中出现，其阳性染色一直持续到烧伤后5月瘢痕的形成，并在真皮、接触界面、上皮附件、血管周围都有广泛的分布。 结论：1、该HS裸鼠模型，能够较客观的反映人类皮肤烧伤创面愈合和HS形成全过程，形成的瘢痕组织为增生性瘢痕。它是一种有效的、有价值的HS动物模型。2、在伤口愈合的炎症期和增生期，MMP-1和TIMP-1两种力量处于动态平衡；在重塑期，TIMP-1通过抑制MMP-1的表达，减少胶原降解，从而诱导HS形成。TGF-β1在伤 WP=7 口愈合过程中广泛和长期的表达模式，与它对细胞功能广泛的调节作用是一致的；与它对MMP-1的抑制、对TIMP-1刺激作用也是一致的。3、MMP-1、TIMP-1、TGF-β1可能在具有不同流动性组织的界面起着特殊的作用。