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《第三军医大学》 2004年
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肝细胞色素P4501A1、2E1、3A1在大鼠NAFL形成中的作用

胡辂  
【摘要】:目的:研究大鼠肝细胞色素P4501A1、2E1、3A1在大鼠NAFL形成中的作用,探讨大鼠NAFL的发生机制,为早期临床防治NAFL摸索理论基础。 方法:64只雄性Wister大鼠随机分为基础饲料组(C)、高脂饲料组(F),其中C、F组各含2周、4周、8周和12周4个时相点,每组8只动物。动态观察各组:①动物体重、肝湿重变化;②HE染色光镜观察肝脏组织病理变化,电镜观察肝组织超微结构;③测定肝脏组织甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、以及血清中TG、游离脂肪酸(FFA)生化指标的含量变化;④酶学测定大鼠肝脏组织CYP4501A1(7-乙氧基异恶唑0-脱乙基酶,EROD)活性;CYP4502E1(苯胺羟化酶,ANH)活性;CYP4503A1(红霉素N-脱甲基酶,ERD)活性。⑤免疫组化观察CYP4501A1、2E1、3A1在肝组织中的分布;⑥RT-PCR和Western blotting分析大鼠肝脏CYP4501A1、2E1、3A1mRNA和蛋白水平。 结果:1、大鼠体重、肝湿重的变化情况:12周F组体重及肝脏湿重明显高于C组(P0.01);2、HE染色结果显示F组肝脏在2周即可见脂肪浸润,4周时出现轻度脂肪肝,8-12周出现中、重度脂肪肝;电镜下观察F组12周肝组织显示:肝细胞胞浆内大量类圆形脂滴沉积,细胞器及胞核被挤至胞浆的一边,胞浆疏松、水肿;而对照组结构正常;3、肝脏内TG、MDA含量F组2周后明显高于C组(P0.05),随时间延长,其含量逐渐增加,以12周时最为显著(P0.01);血清中FFA、TG变化与肝组织TG、MDA也有类似变化;4、大鼠肝脏组织CYP4501A1(7-乙氧基异恶唑0-脱乙基酶,ETOD)活性、CYP4502E1(苯胺羟化酶,ANH)活性及CYP4503A1(红霉素N-脱甲基酶,ERD)的活性F组于2周后明显增强(P0.05),随时间延长,酶活性以12周时增加最为显著(P0.01);5、免疫组织化学染色显示:CYP4501A1在C组肝细胞胞浆内着色,呈黄色细颗粒,散在分布,F组2周,着色较正常加深,F组8、12周着色逐渐加深,阳性细胞数增加,在脂肪变明显的部位着色深;CYP4502E1、3A1与CYP4501A1染色结果变化趋势相似:6、Western blot检测结果显示:F组CYP4501A1蛋白的表达,2周后与C组比较即有增加,有显著性差异(P0.05),随着时间延长,12周时增加最为明显(P0.01);CYP4502E1、3A1蛋白的表达与CYP4501A1结果变化规律相似;7、RT-PCR检测肝脏CYP4501A1、
【学位授予单位】:第三军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R575.5

【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【参考文献】
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【共引文献】
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