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促凝中草药的筛选及其凝血实验的研究

王秀琴  
【摘要】:目的:对药典已有记载或文献报道凝血效果较好的20多种促凝中草药,通过体外、体内促凝实验及创面止血实验,筛选出凝血时间最短,促凝效果最好的中草药。为创面止血寻找一种方便易行、更为理想的中药止血敷料奠定基础。 方法: 1.促凝中草药的筛选:①20种中草药采用水、醇、石油醚分别粗提获得初提物,以凝血板法、试管法、凝血酶原时间(PT)、血浆复钙时间(RT),进行体外凝血实验的比较研究;②对HB(本课题所研究的一种草药的简称)、三七、紫珠水提物几种有机溶剂萃取物及萃取后的水相提取物进行体外凝血实验的比较研究。 2.有效部位的确定:对HB水提物及氯仿萃取后的水相提取物(后面简称水相提取物)进行多次重复体外凝血实验比较研究。 3.有效部位的成分分析:采用化学定性鉴别及薄层层析法对其成分进行分析,用紫外分光光度法测其主要成分含量。 4.有效部位止血功能的研究: 毒理实验:①全身毒性实验即LD_(50)的测定:以小鼠为研究对象,按不同用药剂量分组,采用腹腔注射,一次性大剂量给药后观察小鼠七天内死亡率,由第四军医大学NOSA统计程序处理。②局部毒性实验:以Wistar大鼠为研究对象,分为完整皮肤、破损皮肤刺激性实验和皮肤过敏实验。 体内促凝实验:①氯仿萃取后的水相提取物对大鼠凝血时间及PLT的影响:以Wistar大鼠为研究对象,腹腔注射给药,按不同剂量(0.5mg、1mg、5mg、10mg、20mg/kg)分组给药,每天用药一次,连续用药10天,末次用药后2小时自腹主静脉抽血,标本送检验科化验,进行凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血活酶时间(APPT)、纤维蛋白原含量(FIB)、凝血酶时间(TT)及血小板计数(PLT)的测定。②氯仿萃取后的水相提取物对小鼠凝血时间、出血时间的影响:以昆明种小鼠为研究对象,随机分为空白对照、生理盐水对照组和用药组(0.5mg/kg),每组13只。每日腹腔注射1次,连续10d,末次给药后2小时采血。小鼠凝血时间的测定采用毛细玻管法;出血时间的测定:采用田岛改良法。②病理:取动物的肝脏、肾脏,用HE染色法染色,进行常规组织形态学


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