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《第三军医大学》 2005年
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胃癌Treg对DC免疫功能的抑制作用及其机理研究

雷晓  
【摘要】:目的:树突状细胞(Dendritic cells,DCs)是“专业的”抗原提呈细胞,是机体免疫识别与激发的基础,对机体抗肿瘤免疫有关键作用,是有良好应用前景的抗胃癌疫苗。研究认为,当DCs处于肿瘤微环境下,一般呈现免疫抑制状态,与调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)可能有关。目前Treg抑制DCs免疫的机制研究尚不清楚。本研究对胃癌Treg的表达、特点及意义进行研究,以期明确胃癌Treg对DCs免疫的抑制效应,并初步探讨胃癌Treg抑制DCs的机制,对了解胃癌Treg在DCs勉励抑制中的效应和机制有一定作用,对临床设计以DCs为基础的针对胃癌的生物治疗提供实验依据和理论基础。 方法:1、采用冰冻切片荧光抗体染色、流式细胞仪技术,分别以健康成人外周血、肿瘤癌旁正常胃粘膜及非肿瘤性疾病切除胃周淋巴结为对照组,对比分析Treg和DCs在胃癌患者中的表达,包括外周血、肿瘤组织及淋巴结中Treg的表达情况,了解Treg在胃癌中的表达状态与临床病理情况间的关系特点,初步分析胃癌Treg的表达及意义及与DCs数量和表型关系。2、进行外周血和淋巴结Treg分离方法的探讨,研究了磁珠分离方法获取Treg的效果,并对比分析外周血及淋巴结作为Treg来源的优缺点,初步分析Treg的活化以及细胞因子表达特点。3、对Treg抑制DCs免疫的效应进行研究,从DCs的表型变化、细胞因子分泌、对T细胞的活化功能等方面探讨Treg对DCs的抑制效应,并探讨Treg诱导DCs凋亡、以及IL-10对Treg抑制DCs免疫的介导机制。 结果:1、胃癌患者外周血、肿瘤周围淋巴结及肿瘤组织中Treg表达较对照组显著增高。而胃癌组织S100~+DCs表达较对照组胃粘膜组织中表达显著降低;胃癌患者外周血Treg表达与淋巴结转移及TNM分期有关,淋巴结转移阳性及TNM分期越晚,Treg表达越高。而胃癌S100~+DCs表达与TNM分期有关,TNM分期越晚,S100~+DCs表达越低;胃癌Treg表达与胃癌DCs数量相关,Treg表达越高,胃癌组织S100~+DCs表达越低。胃癌Treg表达与胃癌培养Des表型相关,Treg表达越高,CD40、CD80和CD83表达越低。2、胃癌及对照组的外周血和淋巴结中均可以通过磁珠阳性选择法分离出大量Treg及CD4~+CD25~- T细胞。目前该方法是分离Treg较好的方法,可以获
【学位授予单位】:第三军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R735.2

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