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《第三军医大学》 2006年
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细丝蛋白与血管平滑肌细胞表型转化相关性的研究

朱光明  
【摘要】: 背景: 细丝蛋白(Filamin,FLN)参与血管平滑肌细胞(VSMC)的分化迁移、炎症及细胞信号转导等多方面进程,在动脉发育-成熟-功能健全-老化以及病理性动脉硬化的过程中具有重要生物学意义。利用RNA干扰技术使FLNmRNA表达降低(knock down),抑制FLN在VSMC中的生成,减少或阻断收缩表型VSMC向合成表型转化,从而改变病理状态下VSMC的功能,有可能达到从基因水平上预防或治疗动脉粥样硬化的作用,为脑血管病基因治疗开辟新的途径及基因靶点。 材料与方法: 培养兔VSMC,设计多条可诱发FLNmRNA表达沉默的SiRNA片段,构建质粒载体并转染细胞,荧光显微镜下观察GFP表达情况鉴定转染效率,实时荧光定量PCR鉴定FLNmRNA抑制效果。Westernblot检测FLN蛋白的表达。利用ox-LDL培养正常及转染细胞后,MTT及3H-TdR细胞内掺入法等了解细胞生长增殖情况。流式细胞仪测量细胞周期及凋亡坏死率。免疫荧光观察凋亡、细胞骨架及细胞形态。免疫组织化学法检测细胞多种蛋白表达情况。电镜观察细胞超微结构变化。 结果: 设计的三条SiRNA均可有效抑制FLNmRNA的表达,其中7-1、7-2片段抑制效果最明显,可达60%以上。各组FLN蛋白/Actin蛋白的比值与正常细胞或空载体细胞组相比均明显下降。转染组细胞的增殖能力明显低于正常组细胞,凋亡坏死比率相似。两组细胞的形态学、细胞骨架构型及超微结构则未见明显差异。给予ox-LDL后正常组细胞增殖能力明显增强,α-SM-Actin表达降低而FLN表达增高,细胞形态结构及功能学改变均提示多数VSMC向合成表型转化。与正常细胞组相比,FLN表达降低的转染VSMC由收缩向合成表型转化的程度较低,凋亡比例亦低于正常细胞组;细胞骨架及超微结构受损程度相对较轻。
【学位授予单位】:第三军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R743.3

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 朱光明,张微微,赵文芳;大鼠局灶性脑缺血再灌注小动脉血管平滑肌细胞表型转化的实验研究[J];中华老年心脑血管病杂志;2004年01期
2 王关嵩,钱桂生,毛宝龄,肖桃元,李淑平,陈维中;缺氧及一氧化碳对大鼠血管平滑肌细胞的作用[J];中华内科杂志;2000年10期
3 宋为,蔡英年,邓希贤,龚伊红,董继红;缺氧时肺腺泡内动脉中膜平滑肌细胞表型变化[J];中国医学科学院学报;1994年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 朱光明,张微微,郭锦秀;大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经元中细丝蛋白表达的实验研究[J];北京医学;2005年05期
2 肖国梁;陈小东;;血管平滑肌表型转化及其影响、调控因素的研究现状[J];广东医学院学报;2010年03期
3 李谧;周同甫;刘瀚旻;华益民;王献民;;卡托普利对大鼠左向右分流模型肺小动脉重构的影响[J];四川大学学报(医学版);2006年02期
4 毛秦雯,张立藩,张乐宁,马进;模拟失重大鼠不同部位动脉血管壁超微结构的变化[J];航天医学与医学工程;1999年04期
5 石琳,曾和平,汤秀英,杜军保;CO/HO体系影响缺氧性肺动脉高压幼年大鼠肺动脉超微结构的研究[J];解剖学报;2003年02期
6 孙金华;陈丽星;陈兰芳;;雷米普利对肺动脉高压大鼠肺血管平滑肌细胞的增殖和重构的影响[J];昆明医学院学报;2009年11期
7 朱光明;张微微;李娟;;脑梗死患者脑内不同节段小动脉硬化程度差异的相关性[J];中华老年心脑血管病杂志;2006年01期
8 王关嵩,钱桂生,周德山;血红素氧合酶基因的调控[J];生命的化学;2003年04期
9 袁春平,吴平,谢雪峰;游泳运动对大鼠主动脉弓壁超微结构影响的研究[J];现代康复;2001年13期
10 王关嵩,钱桂生,蔡文琴,关崧;一氧化碳促进肺动脉平滑肌细胞血红素氧合酶基因的表达[J];中国病理生理杂志;2002年07期
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 董世山;细胞钙信号转导与肉鸡腹水综合征发生发展的关系[D];中国农业大学;2003年
2 刘海伟;CREG表达调控人血管平滑肌细胞HITASY表型转换机制研究[D];第四军医大学;2004年
3 冯晓东;缺氧,内皮素-1和一氧化氮对肺动脉平滑肌细胞增殖,迁移和胶原合成的影响及其细胞分子生物学机制的研究[D];中国协和医科大学;1996年
4 韦安阳;糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌表型转化及白膜纤维成分改变的研究[D];第一军医大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 田占坤;急性一氧化碳中毒后大鼠脑内小血管变化的初步研究[D];大连医科大学;2011年
2 岳勇;模拟失重条件下家兔股静脉顺应性变化及其相关组织学研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
3 朱光明;缺血性脑卒中小动脉平滑肌细胞表型转化的实验研究[D];第三军医大学;2003年
4 杨年娣;缺氧缺血新生大鼠脑HO-1的表达变化及其与脑细胞凋亡的关系[D];第四军医大学;2004年
5 傅炜萍;中国西南人群血红素氧化酶(HOX-1)和微粒体环氧化物水解酶(mEPH)基因多态性和COPD疾病遗传易感性的关系[D];昆明医学院;2005年
6 刘学银;精索静脉曲张血管重塑的实验研究[D];重庆医科大学;2008年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 王关嵩,钱桂生,杨晓静,陈维中;2种酶消化法培养大鼠血管平滑肌细胞生长特性的比较[J];第三军医大学学报;1999年10期
2 申洪;免疫组织化学染色定量方法研究(Ⅲ)[J];中国组织化学与细胞化学杂志;1995年01期
3 王玉,李晓玫;α-SM-肌动蛋白在血管平滑肌细胞重塑过程中的变化及其调控[J];生理科学进展;1998年02期
4 王志勇,邹祖玉,刘维新;血管平滑肌细胞的表型标志α-SM-actin的表达与调控的研究进展[J];数理医药学杂志;2001年05期
5 李红兵,刘其光,吴康健,张宏,李长城,孙仁宇,严仪昭;低氧性肺动脉高压大鼠的肺动脉壁变化及764-3和异搏定的保护作用[J];中国病理生理杂志;1993年04期
6 王关嵩,钱桂生,杨晓静,陈维中,谢崧;低氧肺微血管内皮细胞培养液对肺动脉平滑肌细胞的作用[J];中国病理生理杂志;1999年10期
7 王关嵩,钱桂生,杨晓静,陈维中;一氧化碳对大鼠血管平滑肌细胞低氧性增殖反应的作用[J];中国病理生理杂志;2000年02期
8 王林,熊密,车东媛,袁永辉,刘绍春;低氧对肺血管周细胞增殖及分化的影响[J];中华结核和呼吸杂志;1999年03期
9 孙波,刘文利;右心导管测定大鼠肺动脉压的实验方法[J];中国医学科学院学报;1984年06期
【相似文献】
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1 肖国梁;陈小东;;血管平滑肌表型转化及其影响、调控因素的研究现状[J];广东医学院学报;2010年03期
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3 陈刚;吕伯东;黄晓军;;阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化及其影响因子的研究进展[J];中华男科学杂志;2010年03期
4 王生兰;刘辉琦;曹学锋;刘杰;吴穹;;同型半胱氨酸促进大鼠血管平滑肌细胞增殖和表型转化[J];中国病理生理杂志;2010年07期
5 马莲环;张晓敏;;血管紧张素-(1-7)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞表型转化的影响[J];临床合理用药杂志;2009年20期
6 庞玲品;黄石安;;血管平滑肌细胞表型转化相关因素及机制的研究进展[J];广东医学院学报;2010年03期
7 张健,蔡生业;血管平滑肌细胞表型转化及相关信号转导机制探讨[J];心血管病学进展;2005年02期
8 姜晓刚;粘洪晓;孔灵玲;曹慧玲;王旭;李永华;崔文;朱任之;;低密度脂蛋白对肾小球系膜细胞表型转化作用[J];中国公共卫生;2007年10期
9 王玉,李晓玫;肾脏固有细胞的表型转化特征及其病理生理意义[J];中国病理生理杂志;2002年10期
10 苏美萍;邱晨;;哮喘气道平滑肌细胞表型转化调控的研究进展[J];广东医学;2014年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 朱光明;张微微;;大鼠局灶性脑缺血再灌注小动脉血管平滑肌细胞表型转化的实验研究[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年
2 杨斌;曾维政;吴晓玲;;HSCs表型转化的信号转导通路及其阻断剂的研究进展[A];中华医学会第12次全国内科学术会议论文汇编[C];2009年
3 赵丹;严志强;沈宝荣;姜宗来;;SIRT1调控周期性张应变诱导血管平滑肌细胞表型转化[A];第九届全国生物力学学术会议论文汇编[C];2009年
4 李德;何国祥;唐波;唐兵;;BTEB2反义基因转染对血管平滑肌细胞表型转化的影响[A];中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2004年
5 潘銮凤;李晓聪;;血管内皮细胞对平滑肌细胞表型转化的影响[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年
6 宋明宝;黄岚;于学军;朱光旭;张坡;于世勇;董红梅;;缝隙连接阻断剂对体外培养大鼠血管平滑肌细胞表型转化的影响[A];中华医学会心血管病学分会第十次全国心血管病学术会议汇编[C];2008年
7 杜兵;陈蓓蓓;段秋红;王西明;何善述;;DDPH对HECCM促PASMCs增殖的逆转效应研究[A];湖北省暨武汉市生物化学与分子生物学学会第七届第十四次学术年会论文摘要集[C];2003年
8 李德;何国祥;唐波;唐兵;;BTEB2反义基因转染对血管平滑肌细胞表型转化的影响[A];中华医学会心血管病学分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2006年
9 郭淑杰;吴凌云;韩卫青;高平进;朱鼎良;;补体C3参与了血管外膜成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年
10 夏育民;徐世正;丁国华;江珊;熊腊元;;IgG型抗双链DNA抗体对体外培养系膜细胞表型转化的影响[A];中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2006年
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1 方立;内皮祖细胞对血管平滑肌细胞增殖与表型转化的抑制作用及其机制研究[D];中南大学;2010年
2 曲明娟;周期性张应变对血管平滑肌细胞表型转化的影响及其机制[D];上海交通大学;2007年
3 朱光明;细丝蛋白与血管平滑肌细胞表型转化相关性的研究[D];第三军医大学;2006年
4 单发波;miR-9对缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞表型转化的影响及调控机制研究[D];第三军医大学;2014年
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6 杨桂棠;CREG抑制动脉粥样硬化血管平滑肌细胞表型转化及其分子机制的研究[D];大连医科大学;2011年
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8 栾波;E1A激活基因阻遏子(CREG)调控人血管平滑肌细胞表型转化的膜受体机制[D];第四军医大学;2009年
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1 焦磊;去甲肾上腺素对血管平滑肌细胞表型转化和增殖的影响及机制研究[D];苏州大学;2007年
2 霍雷军;可溶性表氧化物水解酶在冠状动脉粥样硬化病变中的表达及其意义[D];汕头大学;2011年
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7 郭艳红;内质网应激在高糖诱导系膜细胞表型转化中的作用研究[D];第三军医大学;2013年
8 汪洁;MicroRNA-31对E1A激活基因阻遏子基因表达及血管平滑肌细胞表型转化的调控作用研究[D];第四军医大学;2013年
9 朱光明;缺血性脑卒中小动脉平滑肌细胞表型转化的实验研究[D];第三军医大学;2003年
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