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《第三军医大学》 2006年
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整合素β3亚基与DI逼尿肌细胞钙通道关系的实验研究

张远宁  
【摘要】: 背景及目的:逼尿肌不稳定(Detrusor instability,DI)是常见的一种膀胱功能障碍,常引起尿频、尿急、急迫性尿失禁等临床症状,严重者可导致肾脏、输尿管积水和肾功能损害。DI的发病机理尚不清楚,一直存在着神经源性和肌源性的争论。近年来资料显示逼尿肌具有自律性,DI与逼尿肌自发兴奋能力增强有关,发生DI的最终环节是逼尿肌细胞的兴奋性增高,是一种肌源性的兴奋改变。 Ca~(2+)在逼尿肌细胞的兴奋发生与调节机制中起着关键作用。作为次级信号分子在逼尿肌的信号转导过程中起非常重要的作用,对逼尿肌舒缩功能的调节在很大程度上取决于对Ca~(2+)的调节。逼尿肌细胞兴奋的前提是Ca~(2+)内流入胞,导致膜电位发生改变,使电压依赖性离子通道激活,细胞去极化;同时,Ca~(2+)发挥第二信使作用,激活其它依赖性离子通道与受体,共同参与细胞动作电位的引发;另外膀胱逼尿肌的收缩也依赖于逼尿肌细胞内Ca~(2+)浓度的升高。 整合素(Integrin)作为一种跨膜蛋白普遍存在于多种组织细胞,是由α及β亚基通过非共价键组成的异二聚体蛋白受体家族,它不是单纯的黏附分子,它还参与了一种双向的信号传递过程:将信息从细胞外基质传递到细胞内部,同时细胞内部的事件也可以影响它们和配体之间的亲和性。近年来在心肌细胞、血管平滑肌细胞中发现,整合素受体可介导Ca~(2+)电流信号。 本课题以此为切入点,观察正常及DI逼尿肌中整合素β3亚基的表达,研究整合素β3亚基对逼尿肌细胞Ca~(2+)通道功能的影响,以探讨整合素β3亚基对逼尿肌细胞兴奋性的影响。 方法:本实验通过膀胱颈不全结扎的方法,建立了稳定、合理的大鼠BOO后引起DI的动物实验模型。在清醒状态下膀胱测压,根据测压结果分为:逼尿肌稳定组即正常对照组(control group)、逼尿肌不稳定组(Detrusor instability group)。采用胶原酶消化法急性分离、培养逼尿肌细胞,并采用免疫组化法鉴定逼尿肌细胞。应用免疫组化法、RT-PCR及Western blotting方法,从转录和翻译水平检测整合素β3亚基基因及其蛋白在DI逼尿肌中的表达变化。采用激光共聚焦技术动态检测整合素β3亚基对逼
【学位授予单位】:第三军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R694.54

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