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《第三军医大学》 2008年
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以MRSA多重耐药蛋白PBP2a为靶点从中药中寻找抗菌增敏剂的实验研究

董燕  
【摘要】: 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)是医院感染的重要病原菌,也是引起烧伤、严重创伤后感染的最常见致病菌之一。在金黄色葡萄球菌感染中,MRSA所致的医院感染越来越流行,尤其在ICU、烧伤病房等,MRSA的检出率都有明显增高趋势,最高可达90%以上,给临床治疗护理工作带来了极大的困难。其中,老年患者、危重病患者、免疫功能低下者及新生儿等是MRSA感染的高危人群;长期使用抗生素,侵入性操作以及消毒隔离措施等医源性因素均可导致MRSA感染率增加。 MRSA的耐药机制主要与其mecA基因大量表达产生的一种特殊青霉素结合蛋白PBP2a有关,该蛋白由668个氨基酸组成,分子量为76.1 kDa,对所有β-内酰胺类抗生素亲和力低。水溶性的PBP2a为去除N-末端23个氨基酸后的蛋白质(不影响PBP2a与β-内酰胺类抗生素的结合),含有两个功能域:N-末端非青霉素结合域(24~326 aa),负责蛋白的延伸和锚定;C-末端功能域(327~668 aa),具有转肽酶活性和β-内酰胺酶的作用。当β-内酰胺类抗生素抑制了由敏感金葡菌产生的PBPs时,PBP2a可以替代其转肽酶功能,继续维持细菌细胞壁的合成,表现出耐药性。 MRSA临床分离株大多是多重耐药,仅对糖肽类抗生素如万古霉素敏感。然而,随着其广泛应用,已出现一些耐万古霉素金黄色葡萄球菌的报道。1996年在日本分离到万古霉素中度敏感的MRSA,随后2002年在美国发现了万古霉素耐药的MRSA,至今尚无其它治疗MRSA感染的有效药物。所以,更新研究策略、寻找新的药物来抑制PBP2a的活性,恢复MRSA对抗生素的敏感性或降低MRSA耐药性具有十分重要的临床意义。 目的 本研究基于PBP2a在MRSA耐药机制中的重要性,拟从MRSA临床分离株中获得多重耐药蛋白PBP2a,以此为靶点应用生物传感器技术筛选具有与PBP2a高结合力的中药,从中药中寻找抗菌增敏剂,恢复抗生素的敏感性,为MRSA感染的防治研究提供新的策略。 方法 1.可溶性重组蛋白PBP2a的表达、纯化与鉴定:采用PCR方法从MRSA临床分离株中扩增编码PBP2a可溶性全片段的mecA基因(76~2007 bp),构建原核表达载体pQE30-mecA,经酶切鉴定后进行DNA测序;将pQE30-mecA转化入大肠杆菌M15并诱导表达PBP2a可溶性全片段,对重组蛋白PBP2a进行Ni2+亲和层析纯化后,测定其纯度;并进行氨基酸测序与分子量鉴定。然后,对PBP2a的生物学活性与结合活性进行评价。采用分光光度法对PBP2a分别进行转肽酶及β-内酰胺酶活性测定,并通过二倍微孔稀释法与激光共聚焦技术观察PBP2a与抗生素的体外结合作用。 2.以PBP2a为靶点筛选拮抗MRSA的中药:将PBP2a包被于生物传感器的样品池作为固相配基,通过对26种中药水煎液与PBP2a结合活性的测定,选择结合力较高的10种中药,再结合直接抗菌实验,以及10种中药与苯唑西林的联合抗菌实验,筛选出对MRSA具有抗菌增敏作用的中药。 3.夏枯草中对MRSA抗菌增敏组分的分离提取及活性评价:首先通过生物传感器测定夏枯草不同部位水煎液与PBP2a的结合活性,再经联合抗菌实验对它们的抗菌效果进行初步测定;利用AB-8大孔吸附树脂分离富集夏枯草全草水煎液中的有效组分,追踪检测其与PBP2a的结合力,通过抗菌实验与联合抗菌实验确定抗菌增敏组分,并对其物质属性进行鉴定;观察其与苯唑西林联用的抑菌曲线、与β-内酰胺类抗生素的联合抗菌作用,然后通过透射电镜观察其对MRSA细菌形态的影响,评价可能的抗菌作用机制。 结果 1.成功扩增出mecA基因片段(76~2007bp),构建了重组质粒pQE30-mecA,基因序列分析表明,mecA基因片段的大小与预期一致,但序列中出现了9个碱基突变,所编码蛋白质与GenBank收录的蛋白质同源性为96%;在大肠杆菌M15中实现了可溶性PBP2a的高效表达,经分离纯化后得到的重组蛋白PBP2a纯度达到90.6%;蛋白质N端15个氨基酸测序结果为:MRGSH HHHHH GSKDK,与预期一致;质谱分析其相对分子质量约为74 kDa,与预期相符;所获得的重组蛋白PBP2a具有转肽酶活性与β-内酰胺酶活性,并且在体外与β-内酰胺类抗生素具有一定的结合活性。 2.成功地将PBP2a包被于生物传感器的羧甲基葡聚糖样品池上,从26种中药中筛选了10种与PBP2a有较高结合力的中药;体外抗菌实验显示,黄芩、夏枯草、黄连对MRSA的单独抗菌效果较好;10种中药与苯唑西林的联合抗菌实验显示,夏枯草与苯唑西林的联合抗菌效果最好。 3.夏枯草的全草与果穗中均含有与PBP2a具较高结合力的活性成分,其抗菌效果差别不明显;夏枯草全草水煎液经过AB-8大孔吸附树脂分离富集,得到SP2组分;SP2组分不仅与PBP2a具有较高的结合力,而且与苯唑西林联用能够明显抑制MRSA的生长速度;可以使苯唑西林、青霉素、舒氨西林、氨苄西林对MRSA的MIC分别降低256、8、16及4倍,SP2与苯唑西林、青霉素、舒氨西林、氨苄西林的FIC分别为0.007、0.151、0.064、0.276;SP2能够通过破坏MRSA的细胞壁结构发挥抗菌增敏作用;SP2为水溶性组分,含有大量的酚羟基类物质,其有效成分的分子量范围大约为3~5kDa。 结论 采用基因重组技术,成功实现了MRSA临床分离株中可溶性PBP2a的高效表达;以多重耐药蛋白PBP2a为靶点,应用生物传感器建立了筛选拮抗MRSA中药的技术平台。利用该平台,我们从26种中药中筛选出与PBP2a有较高结合力、与苯唑西林联合抗MRSA效果最好的夏枯草;进一步从夏枯草全草水煎液中分离得到水溶性有效组分SP2,SP2具有恢复β-内酰胺类抗生素对MRSA敏感性的作用;SP2组分中有效成分的分子量范围大约为3~5kDa,有望通过进一步的分离纯化得到有活性的小分子化合物作为抗菌增敏剂,为MRSA感染防治提供新的方法。
【学位授予单位】:第三军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R285

【引证文献】
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1 周洪昌;韩江余;顾福萍;;大蒜素、川穹嗪与万古霉素联用抗MRSA的作用研究[J];中国抗生素杂志;2012年01期
【参考文献】
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1 吴翀;蒋栋能;周红;郑江;;大蒜抗内毒素组分的分离及活性分析[J];重庆医学;2006年07期
2 许斌,李莉,徐焰,李亚斐;SZ植物消毒剂对悬液中细菌和病毒的灭活作用[J];第三军医大学学报;2005年09期
3 李晓蒙,廖华卫;夏枯草中熊果酸的含量测定[J];广东药学院学报;2002年01期
4 杨媛;黄芩苷与β-内酰胺类抗生素对β-内酰胺耐药性金黄色葡萄球菌的协同作用[J];国外医药(抗生素分册);2001年03期
5 林秋凤,王凌云,李药兰,岑颖洲;AB-8大孔吸附树脂分离长瓣金莲花总黄酮[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2003年01期
6 董剑英,杨静,赵春芝,单俊杰,王宏军;夏枯草提取物的薄层层析及体外抗菌活性研究[J];军事医学科学院院刊;2005年05期
7 李仝,胡凯文,陈信义,孙颖立,李英林;浙贝母对呼吸系统耐药金黄色葡萄球菌逆转作用的临床研究[J];北京中医药大学学报;2001年05期
8 何伟,李伟;大孔树脂在中药成分分离中的应用[J];南京中医药大学学报;2005年02期
9 赖晓全 ,王洪源;重症监护病房MRSA感染及相关因素的研究[J];内科急危重症杂志;2005年04期
10 张来彪,赛敏;难治性呼吸系统感染性疾病与儿茶精吸入疗法[J];日本医学介绍;2001年09期
【共引文献】
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1 宣寒;赵林;;AB-8大孔吸附树脂对黄芩苷吸附性能的研究[J];安徽化工;2007年05期
2 徐玉梅;夏枯草种子发芽特性的研究[J];安徽农学通报;2005年02期
3 戴玉锦;王凤仙;张筱娟;;用离子交换法从柚皮中提取果胶的研究[J];安徽农业科学;2006年03期
4 庞振凌;田龙;王小立;;微波辅助法提取猕猴桃果实多糖的研究[J];安徽农业科学;2006年11期
5 徐飞;钮福祥;张爱君;朱红;贺峰;;不同提取工艺对山楂汁质量的影响[J];安徽农业科学;2006年11期
6 周建青;徐爱列;王永宁;黄莉;;正交实验法研究芦荟中黄酮类化合物的提取及含量的测定[J];安徽农业科学;2008年20期
7 葛淑敏;于源华;张艳飞;;蒙古口蘑多糖组分分析及结构初步鉴定[J];安徽农业科学;2009年01期
8 夏翠;熊双丽;彭天蓉;田春秋;徐国波;;夏枯草多糖脱色工艺研究[J];安徽农业科学;2009年06期
9 巫冠中;苏欣;;DM130大孔吸附树脂富集葎草中总黄酮的工艺研究[J];安徽农业科学;2009年36期
10 王飞;丁玉;陈明达;鞠明里;尹瑞卿;;天花粉蛋白的纯化技术进展及其药理概况[J];安徽农业科学;2010年01期
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1 赵东欣;卢奎;;腋花玉兰辛夷挥发油的化学成分分析[A];中国化学会第十二届全国应用化学年会论文集[C];2011年
2 魏兆勇;张分明;高素琴;;26例重型病毒性肝炎医院感染临床分析[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(下册)[C];2007年
3 彭振丽;罗彦丽;魏秋玲;申慧蓉;孟炜丽;董桂英;向艳君;;综合ICU病房近三年病原菌调查分析[A];第二十二届航天医学年会暨第五届航天护理年会论文汇编(下册)[C];2006年
4 彭振丽;罗彦丽;申慧蓉;孟炜丽;董桂英;时艳华;;现况调查研究在重症监护病房中的应用[A];第二十二届航天医学年会暨第五届航天护理年会论文汇编(下册)[C];2006年
5 林素珍;张满娥;毛平;赖善城;;我院2009年临床分离主要病原菌耐药预警通报[A];第二届全国药物性损害与安全用药学术会议——抗感染药物不良反应与临床安全应用专题研讨会论文汇编[C];2010年
6 马弛;林居纯;胡廷秀;戈锐;舒刚;;禽源金黄色葡萄球菌的耐药性监测与中西药联合作用[A];中国家禽科学研究进展——第十四次全国家禽科学学术讨论会论文集[C];2009年
7 刘清泉;;中药抗感染现状及进展[A];全国危重病急救医学学术会议论文汇编[C];2007年
8 何玉明;;中药对细菌耐药性干预的研究进展[A];第二届临床中药学学术研讨会论文集[C];2009年
9 潘发愤;李德周;;我院耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药特点及耐药机制分类检测[A];第十次浙江省中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2008年
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1 王明华;分子模拟辅助研究氨苄青霉素残留快速检测免疫传感器的特异性[D];浙江大学;2011年
2 张雷;利奈唑胺在中国人群的群体药代/药效动力学研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
3 李渊;痰热清注射液对产ESBLs大肠埃希菌耐药性影响的研究[D];北京中医药大学;2011年
4 曹颖;双黄连及清开灵对产ESBLs大肠埃希菌抑菌作用的研究[D];北京中医药大学;2011年
5 姚琦;青蒿琥酯增加大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素敏感性及相关机制探讨[D];第三军医大学;2011年
6 蒋为薇;青蒿琥酯增强β-内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)脓毒症模型小鼠的保护作用及机制研究[D];第三军医大学;2011年
7 龚明福;新疆苦豆子内生细菌多样性及其抗菌作用研究[D];西北农林科技大学;2011年
8 吴敬涛;桔梗皂苷的抗氧化及脂质调节作用研究[D];山东师范大学;2011年
9 陈宇航;夏枯草规范化种植技术及其药材质量控制[D];南京农业大学;2011年
10 马筱玲;金黄色葡萄球菌耐药性、耐药机制与分子流行病学研究[D];安徽医科大学;2009年
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1 盛侠;宣木瓜中齐墩果酸的提取分离及其抗氧化作用的研究[D];安徽农业大学;2010年
2 曹磊;四种真菌多糖抗氧化和抗肿瘤及免疫调节活性的研究[D];郑州大学;2010年
3 李科玮;17种青藏高原植物提取物抑菌作用的筛选及苔草甲醇提取物抑菌机理的研究[D];甘肃农业大学;2010年
4 王永;含乌头类金匮方汤药的毒性分析[D];浙江中医药大学;2010年
5 于佳佳;杏花总黄酮提取、分离、纯化和抗氧化研究[D];新疆农业大学;2010年
6 鲍磊;淫羊藿有效成分提取工艺研究[D];长春工业大学;2010年
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10 熊正燕;苍耳活性次生物质对害虫的拒食作用及其机理研究[D];中南林业科技大学;2010年
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1 段德军;温桂兰;;丹参酮与万古霉素联合应用对MRSA的抑制作用[J];实用全科医学;2008年04期
2 赵智明;蔡辉;;中药对一氧化氮调节作用的研究进展[J];中国中医药科技;2008年02期
3 谭斌;胡明山;黄煌;喻泽兰;李元建;;大蒜素对糖尿病大鼠血管内皮损伤的保护作用[J];现代中西医结合杂志;2006年24期
4 郑燕华,陈崇宏;大蒜素对大鼠急性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究[J];中国药理学通报;2004年07期
5 李冬冬;赵菊;张志刚;沈月娥;高建明;;小檗碱和川芎嗪对猪卵母细胞体外成熟中一氧化氮生成量的影响[J];中国畜牧杂志;2008年05期
6 陈勇川;谢林利;熊丽蓉;唐敏;夏培元;;黄芩苷/黄芩素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗药性的逆转作用研究[J];中国药房;2008年09期
7 叶龙彬,奚涛,陈峰,王瑜;丹参酮ⅡA对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用[J];中国药科大学学报;2004年03期
8 华德兴;彭青;曾香连;姚芬;钱元恕;;绿茶及其提取物抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌作用研究[J];中国抗生素杂志;2010年03期
9 岳阳;董玉莹;于芝颖;;抗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌和耐万古霉素肠球菌药物的临床研究进展[J];中国新药杂志;2010年13期
【二级参考文献】
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1 李怀斌,侯建平,邵可众,符玉婷;复方天麻首乌酒中天麻素的鉴别[J];安徽中医学院学报;2002年06期
2 王嵩;中草药抗细菌感染的研究[J];北京中医;2002年04期
3 何云庆,李荣芷,冯腊枝,李作平;夏枯草化学成分的研究(一)[J];北京医科大学学报;1985年04期
4 梁兴伦,韩明向;四安胶囊对高脂血症模型的效应研究[J];成都中医药大学学报;1998年03期
5 杨颂华,任成山,高全杰,陆海华,郭中杰;内毒素致大鼠急性肝损伤时血清TNF-α、MDA的变化及其意义[J];重庆医学;2003年01期
6 郎中兵,文亮;严重创伤后血清内毒素、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的变化[J];重庆医学;2003年12期
7 马翔宇 ,易龙;医源性MRSA感染及其防治研究进展[J];临床医学;2003年05期
8 徐家毅,郭贤权;大孔树脂孔结构的测定[J];高分子通报;1999年02期
9 李家泰,魏瑾;甲氧西林耐药金葡菌(MRSA)感染的诊断与治疗[J];中国临床药理学杂志;1993年02期
10 魏瑾,李家泰;多聚酶链反应(PCR)技术在甲氧西林耐药金葡菌检测中的应用[J];中国临床药理学杂志;1994年01期
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1 和生琦;李军;吴翀;郑江;龙宇鹏;罗平;张蓉;周红;;以PBP2a为靶点应用生物传感器技术筛选拮抗MRSA中药[J];解放军药学学报;2007年05期
2 倪汶,吴荣昌;甲氧西林耐药金葡菌感染的药物治疗[J];医药导报;1994年01期
3 潘钦石,周铁丽,林晓梅,李超,张雪青;四种方法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的结果比较[J];温州医学院学报;2004年01期
4 高秀华,陶凤蓉,胡云建;MRSA医院获得性肺部感染流行趋势[J];中华医院感染学杂志;2004年10期
5 张京海,陈世敏,崔海荣,公衍文;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的研究近况[J];实用医药杂志;2004年10期
6 刘荣臻,史治国,陈建春,韩燕国,纪冰,张翠霞,谢志琴,和小华;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性观察[J];中国实验诊断学;1999年05期
7 尹维佳,陈敏,过孝敬,刘自贵,徐世兰,王志芬;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的微生物学监测及干预措施[J];护理研究;2004年15期
8 王文静;9年质控研究对耐新青霉素Ⅰ金葡菌(MRSA)报告的正确性[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;1994年04期
9 程竑;当归六黄汤对MRSA感染宿主的作用[J];国外医学.中医中药分册;1995年02期
10 易建云,莫淑霞;19株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检出及药敏分析[J];医学综述;1996年05期
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1 和生琦;周红;郑江;龙宇鹏;罗平;张蓉;刘昱竹;;以PBP2a为靶点应用生物传感器技术筛选拮抗MRSA的中药[A];全国危重病急救医学学术会议论文汇编[C];2007年
2 王祝举;赵玉英;陈雅妍;马炳娜;;夏枯草属植物三萜类化学成分及~(13)C NMR波谱特征[A];2000中药研究论文集[C];2001年
3 王祝举;赵玉英;王邠;艾铁民;陈邪妍;;夏枯草中的缩酚酸类化合物(英文)[A];2000中药研究论文集[C];2001年
4 魏敏杰;周新颖;赵海山;姚维范;金万宝;;夏枯草粗提物抑制乳腺癌细胞增殖和逆转耐药作用与机制初探研究[A];药物相关蛋白质组学专题研讨会论文集[C];2006年
5 张兰珍;巴寅颖;季思伟;姜艳艳;郭亚健;;RP-HPLC测定夏枯草不同部位熊果酸和齐墩果酸含量[A];2008年《药物分析杂志》第三届普析通用杯论文集[C];2008年
6 蒋为薇;李斌;董燕;周红;;青蒿琥酯增强β-内酰胺类药物抗MRSA的作用及初步机制研究[A];中国药理学会第十次全国学术会议专刊[C];2009年
7 蒋为薇;李斌;周红;;青蒿琥酯增强β-内酰胺类药物保护MRSA脓毒症模型小鼠的作用及机制研究[A];第十届全国化疗药理暨抗感染药理高峰论坛资料汇编[C];2010年
8 蒋为薇;李斌;周红;;青蒿琥酯增强β-内酰胺类药物保护MRSA脓毒症模型小鼠的作用及机制研究[A];第一届全国麻醉药理专业委员会第二次学术会议论文集[C];2011年
9 廖远泉;沈继龙;;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌研究新进展[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
10 李和姐;杨莉;陶祥龄;;MRSA医院感染现状调查[A];中华医院管理学会第十一届全国医院感染管理学术年会论文汇编[C];2004年
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1 甘肃省通渭县中医院 张存龙;散结最宜夏枯草[N];中国中医药报;2008年
2 陈国华;清热散结夏枯草[N];中国中医药报;2006年
3 徐希俊;夏枯草药用小方[N];民族医药报;2004年
4 长海医院中医科 苏永华 副主任医师;清热散结夏枯草[N];上海中医药报;2010年
5 梁庆森;玉林夏枯草价扬[N];中国医药报;2000年
6 李耀亭;老人降压验方五则[N];医药养生保健报;2006年
7 桂;治甲状腺良性肿物[N];民族医药报;2003年
8 蒲昭和;单味夏枯草治小儿痱子和湿疹[N];上海中医药报;2005年
9 蒲昭和;单味夏枯草治疗小儿痱子、湿疹效果好[N];民族医药报;2005年
10 CUBN记者 熊翠红;王老吉两度“对簿公堂”的背后[N];中国联合商报;2007年
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1 董燕;以MRSA多重耐药蛋白PBP2a为靶点从中药中寻找抗菌增敏剂的实验研究[D];第三军医大学;2008年
2 蒋为薇;青蒿琥酯增强β-内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)脓毒症模型小鼠的保护作用及机制研究[D];第三军医大学;2011年
3 于旭红;夫西地酸与磷霉素对MRSA生物被膜感染联合效应研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
4 郭毅斌;白鲜皮抗内毒素的物质基础及其作用机制研究[D];第三军医大学;2007年
5 肖劲逐;夏枯草提取物对尿草酸钙结石形成及肾结石大鼠Osteopontin表达的影响[D];中南大学;2008年
6 梁蓓蓓;PK/PD参数预测金黄色葡萄球菌感染的疗效和抑制细菌耐药突变的系列研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年
7 鲁卫平;DNA生物传感器快速检测病原微生物的实验研究[D];重庆医科大学;2009年
8 赵薇;SICU多重耐药菌定植感染监测及传播动力学研究[D];吉林大学;2009年
9 潘凤;中药青蒿中NF-κB特异性抑制剂的筛选及其逆转肿瘤细胞群集耐药的作用研究[D];第三军医大学;2008年
10 张怡滨;天津地区金黄色葡萄球菌临床分离株的分子进化学研究[D];天津医科大学;2002年
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1 王娟;稀土对临床分离株MRSA·NMGY3抗药性的影响及其机理研究[D];内蒙古工业大学;2009年
2 周建党;MRSA中MecA基因表达及PBP2a含量对β-内酰胺类抗生素耐药水平影响[D];中南大学;2010年
3 和生琦;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)PBP2a C-末端的克隆、表达以及拮抗MRSA中药的筛选[D];第三军医大学;2007年
4 张可杰;夏枯草抗淋巴造血系统肿瘤作用的实验研究[D];郑州大学;2003年
5 姚婕;诃子拮抗内毒素活性组分的分离制备及生物学活性评价[D];第三军医大学;2006年
6 扈本荃;反义硫代寡核苷酸逆转MRSA耐药性的研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
7 刘杰;BlaR1信号通路阻断策略逆转MRSA耐药性的研究[D];第四军医大学;2004年
8 庞昶;利奈唑胺与其他抗生素联用对MRSA的体外抗菌活性研究[D];中国医科大学;2010年
9 荚恒敏;医院MRSA感染流行状况及其万古霉素疗效评价[D];安徽医科大学;2010年
10 张美英;夏枯草、莪术、仙鹤草配伍抗肿瘤理论与实验研究[D];山东中医药大学;2004年
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