收藏本站
《第三军医大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

乳腺癌淋巴管生成及Podoplanin表达MRI评价的实验研究

逄鑫  
【摘要】: 目的(1)观察大鼠乳腺癌生长分化病理特点及淋巴管生成;(2)合成靶向podoplanin的MRI金磁微粒对比剂,体外观察该纳米粒对比剂理化特性;(3)Podoplanin分子靶向MRI活体显像,评价乳腺癌淋巴管生成。 方法 (1)利用金磁微粒(GoldMag-Coreshell, GoldMag)兼有磁性粒子的超顺磁性及胶体金偶联生物分子的性能,螯合抗podoplanin抗体合成靶向podoplanin的MRI金磁微粒对比剂(PodAb-GoldMag),螯合非特异性抗体IgG合成含IgG的MRI纳米粒(IgG-GoldMag)为对照,测量螯合前后两种抗体在280nm处吸光值,计算抗体在GoldMag表面的偶联效率;ELISA双抗体夹心法测定纳米粒的免疫活性。(2)用激光粒度仪分别对GoldMag核心微粒超小超顺磁性氧化铁(USPIO)、GoldMag、IgG-GoldMag和PodoAb-GoldMag进行Zeta电位测定;透射电子显微镜观察USPIO、GoldMag和PodoAb-GoldMag纳米粒形态变化并测定其粒径变化。(3)以磷酸盐缓冲液(PBS)为稀释剂将USPIO和GoldMag分别稀释为0.5~1000μg/ml的47个不同的浓度,以PBS液为对照,共获得48个浓度,行FSE T1WI、FSE T2WI和GRE T2*WI磁共振成像。观察不同浓度USPIO和GoldMag在3种序列中的信号强度变化规律,计算信号强度变化比率,绘制浓度-信号强度曲线图。(4)Wistar雌性大鼠80只,二甲基苯蒽(DMBA)灌胃诱发乳腺肿瘤,75只大鼠成功诱发乳腺肿块,随机分为A、B、C、D 4组,A组(PodoAb-GoldMag组)30只大鼠,B组(IgG- GoldMag组)、C组(GoldMag组)和D组(Gd-DTPA组)各15只大鼠。用1.5 T磁共振成像系统分别行FSE T1WI、T2WI、压脂序列、弥散加权成像,A、B、C组分别于注射对比剂前、注射对比剂后即刻、5 min、15 min、30 min、1 h和2 h行乳腺肿块GRE T2*WI增强扫描,D组于相同的时相点行FSE T1WI增强扫描,测量信号强度,绘制动态增强扫描时间-信号强度曲线。(5)扫描完毕后,灌注法固定标本,同一乳腺肿块分别于中央区和周围区取材,HE染色和podoplanin相关抗原免疫组化染色、免疫荧光染色以及普鲁士蓝铁染色,观察乳腺肿瘤病理类型和淋巴管生成情况,同一肿瘤分别观察中央区和周围区2个不同部位淋巴管生成情况。(6)乳腺肿瘤HE染色、免疫组化染色和LVD检查结果与MRI图像对照分析,分析乳腺肿瘤MRI表现的病理学基础,探讨podoplanin分子靶向MRI活体显像评价乳腺癌淋巴管生成的效果。 结果 (1)成功螯合抗podoplanin抗体与GoldMag,合成靶向podoplanin的PodAb- GoldMag,抗podoplanin抗体与GoldMag的平均结合率为64.81%,抗podoplanin抗体的免疫活性为43%。(2)USPIO的Zeta电位为12.0±18.9 mv,粒径分布范围15~30 nm;GoldMag的Zeta电位为25.2±95.2 mv,粒径分布范围40~80 nm;IgG-GoldMag的Zeta电位为18.2±1.6 mv,PodAb-GoldMag的Zeta电位为25.5±20.8 mv,粒径分布范围80~100 nm。(3)GoldMag与USPIO的MRI信号变化规律基本一致,不同成像序列信号强度比较,随浓度增加,FSE T1WI信号强度呈升高趋势,FSE T2WI信号强度略有下降,GRE T2*WI信号强度明显降低。两种对比剂信号强度比较,在FSE T1WI,浓度高于30μg/ml时信号强度有显著性差异(P 0.05),在FSE T2WI,浓度为40~90μg/ml时信号强度有显著性差异(P 0.05),在GRE T2*WI,两种对比剂信号强度无显著性差异(P 0.05)。(4)75只大鼠成功诱发乳腺肿块,68只大鼠诱发1个乳腺肿块,7只大鼠诱发2个乳腺肿块。75只大鼠中,乳腺增生性疾病21只,炎性肉芽肿2只,乳腺癌52只,乳腺肿块诱发成功率为93.8%,乳腺癌诱发成功率为69.3%。(5)在MRI平扫T1WI,乳腺良、恶性病变均表现为低信号或等信号;在T2WI,乳腺良性病变表现为高信号和等信号为主的混杂信号,乳腺恶性肿瘤中,42只表现为高信号和等信号为主的混杂信号,其余10只表现为低信号为主的混杂信号;在压脂序列T2WI,乳腺脂肪高信号被抑制,良、恶性病变均表现为高信号。(6)GoldMag靶向增强扫描,A、B、C 3组乳腺癌信号强度均在注射对比剂即刻显著下降(P0.01),并随时间推移逐渐回升,注射后1 h信号强度不再变化,此时A组信号强度较注射前低,其差异有显著性(P0.05),B、C两组信号强度基本回复到注射前水平,差异无显著性(P0.05)。不同组织类型乳腺癌信号强度在注射对比剂前后无显著性差异(P0.05),不同分化程度乳腺癌信号强度在注射对比剂即刻至5min内差异有显著性(P0.05),其它时间点无显著差异。(7)LVD随乳腺癌分化程度的降低而显著增高(P0.05),LVD与A组乳腺肿瘤信号降低程度呈显著负相关(r =-0.814,P = 0.000),与B、C两组乳腺癌信号强度降低程度无显著相关性(P0.05),与D组乳腺肿瘤信号强度增高程度呈显著正相关(r = 0.972,P = 0.000)。 结论 (1) GoldMag作为一种核壳结构的超顺磁性复合微粒,其核心为USPIO,USPIO与GoldMag MRI信号特点变化相似,随浓度增加,FSE T1WI信号强度呈升高趋势,FSE T2WI信号强度略有下降,GRE T2*WI信号强度明显降低。GRE T2*WI为USPIO和GoldMag的最佳MRI成像序列。 (2)成功螯合靶向PodAb-GoldMag纳米粒对比剂,抗podoplanin抗体与GoldMag的平均结合率为64.81%,抗podoplanin抗体的免疫活性为43%,PodAb-GoldMag的Zeta电位为25.5±20.8 mv,粒径分布范围80~100 nm。 (3)大鼠诱发性乳腺癌MRI平扫T1WI表现为低信号或等信号;T2WI多数表现为高信号和等信号为主的混杂信号;压脂序列T2WI病变均表现为高信号,与人乳腺癌MRI表现相似。 (4)乳腺增生性疾病仅可见少许新生淋巴管和少量较大、较成熟淋巴管。乳腺癌新生淋巴管多位于肿瘤边缘部位癌巢周围的间质中,LVD随乳腺癌分化程度的降低而升高。 (5) PodAb-GoldMag增强扫描乳腺癌周边区信号强度降低较中央区明显;不同分化程度和不同组织类型的乳腺癌,PodAb-GoldMag增强扫描信号强度变化基本相似。 (6) PodAb-GoldMag靶向增强MRI与肿瘤微淋巴管密度相关,根据大鼠乳腺肿瘤PodAb-GoldMag增强扫描,可初步鉴别其淋巴管生成情况,可活体评价乳腺癌淋巴管生成。
【学位授予单位】:第三军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R737.9

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杜红文,刘继汉,郭佑民,史大鹏;恶性淋巴瘤MRI诊断[J];现代医用影像学;1994年04期
2 黄敏华,郭勇,胡向红,安维民,张永文;手推法肝脏MRI动态增强扫描的临床应用[J];中国医学影像学杂志;2002年02期
3 许冬明!200072,顾伟中!200072,叶强!200072;原发性支气管肺癌MRI相对信号强度与PCNA相关性的研究[J];临床放射学杂志;2000年07期
4 耿进朝,时高锋,李彩英,李如迅,梶间敏男,伊藤胜阳;成人白血病骨髓MRI及其临床应用[J];中国医学影像学杂志;2002年05期
5 丁峰;;髌骨软化症的MRI表现[J];现代医药卫生;2007年21期
6 张丽娟;磁共振灌注成像在诊断冠心中的应用[J];中国医学影像学杂志;1999年01期
7 任守君;王晓红;高霁;朱本祥;于平年;王文甲;;白血病的MRI临床应用价值[J];当代医学;2011年23期
8 王国良,施增儒,马健,刘士远;闭合性颅脑损伤MRI的表现[J];临床放射学杂志;1990年01期
9 魏锐利,王海青,周韵秋,周浩,陶晓峰;鼻源性眼球突出的MRI及CT表现分析[J];临床眼科杂志;1996年03期
10 朱锡旭,陈自谦,陈君坤;原发性肝癌门静脉癌栓MRI和DSA比较[J];医学研究生学报;1999年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 肖梦强;刘金丰;郭治平;李玉英;谭丽容;;跟腱损伤的MRI表现[A];第十一次全国中西医结合影像学术研讨会暨全国中西医结合影像学研究进展学习班资料汇编[C];2010年
2 郭治平;刘金丰;肖梦强;;关节软骨MRI进展[A];第十一次全国中西医结合影像学术研讨会暨全国中西医结合影像学研究进展学习班资料汇编[C];2010年
3 陈燕萍;卢晓丹;周和秀;;胎盘植入的MRI表现及其诊断价值[A];中华医学会第十八次全国放射学学术会议论文汇编[C];2011年
4 翟昭华;任勇军;徐文杰;陈浩林;;急性Co中毒中枢神经系统MRI表现[A];第十一次全国中西医结合影像学术研讨会暨全国中西医结合影像学研究进展学习班资料汇编[C];2010年
5 胡运胜;袁晓春;诸慧铭;张贵祥;;女性盆腔3.0T-MRI扫描技术探究[A];2010中华医学会影像技术分会第十八次全国学术大会论文集[C];2010年
6 陈玉琴;钱海馨;石慧敏;;MRI在垫治疗颞下颌关节盘移位效果评价中的作用[A];第八届全国颞下颌关节病学及(牙合)学大会论文汇编[C];2011年
7 蔡庆;沈玉英;;乳腺癌动态增强MRI与X线摄像的对比分析[A];苏州市自然科学优秀学术论文汇编(2008-2009)[C];2010年
8 王淑丽;张晓林;张晓光;;动态MRI及斜矢状MRI在颈椎病检查中的应用价值[A];中华医学会第十八次全国放射学学术会议论文汇编[C];2011年
9 Orest Boyko;;MRI Gadolinium contrast use:Efficacy and Safety[A];中华医学会第十八次全国放射学学术会议论文汇编[C];2011年
10 刘凡;罗娅红;于韬;满江红;路鹏;王长德;;MRI弥散加权成像图在乳腺疾病性质评价中的应用[A];2010中华医学会影像技术分会第十八次全国学术大会论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 广西 黄毓勇;一锅双星接收的另一种方法[N];电子报;2003年
2 本报记者 代希泽;详解GPS应用中最常见的几大问题[N];当代汽车报;2008年
3 河南 张进保;C/Ku波段一锅双星的收视[N];电子报;2008年
4 本报实习生 刘晓霞 本报记者 赵雷;NEC为电视手机心烦[N];中华工商时报;2005年
5 王炜 编译;MRI可有效确认卒中时间[N];医药经济报;2010年
6 江苏 伯伟萍;CDTV-430接收机调星显示信号强度的技巧[N];电子报;2005年
7 河北 王永;卫星接收机“信号强度”显示条的作用[N];电子报;2006年
8 江苏 张永根;卫星接收机信号强度和信号质量的作用[N];电子报;2009年
9 记者 白毅;新MRI技术诊断踝关节软骨病变有优势[N];中国医药报;2010年
10 贵州 黄学文;东仕数字机的信号强度与信号质量功能[N];电子报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孙翀鹏;MR弥散张量纤维束示踪及锰增强MRI评价兔坐骨神经挤压伤的实验研究[D];南方医科大学;2011年
2 潘文宇;一种新型MRI谱仪的设计及关键技术研究[D];中国科学技术大学;2011年
3 张忠和;大脑皮质生前发育的高场强MRI研究[D];山东大学;2011年
4 王荣品;3T MRI在复杂型先天性心脏病双向Glenn分流术后的临床应用研究[D];南方医科大学;2010年
5 樊令仲;基于MRI及薄层断面解剖数据的人类小脑结构分析[D];山东大学;2010年
6 宁瑞鹏;用于引导HIFU治疗的永磁开放式MRI系统研究[D];华东师范大学;2011年
7 俞哲锋;USPIO增强MRI在体无创性评价他汀对血管损伤炎症及动脉硬化作用的实验研究[D];浙江大学;2012年
8 李锦青;肩袖间隙薄层断面解剖研究及其在冻结肩常规MRI诊断中的初步应用[D];第三军医大学;2012年
9 陈志祺;原发性开角型青光眼中枢形态学及功能学改变的MRI研究[D];华中科技大学;2012年
10 李萍;类风湿性关节炎腕关节病变的超声显像与MRI对照及血清VEGF表达的相关性研究[D];山东大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 逄鑫;乳腺癌淋巴管生成及Podoplanin表达MRI评价的实验研究[D];第三军医大学;2010年
2 丁永梅;RGD-USPIO纳米粒构建及其在肿瘤MRI诊断中应用[D];苏州大学;2010年
3 王燕钰;垂体后叶MRI信号强度测量及中枢性尿崩症的MRI诊断价值[D];南方医科大学;2010年
4 耿鹤群;胎儿基底核区发育的高场强MRI研究[D];山东大学;2010年
5 王玉茂;二乙撑三胺五乙酸钆修饰卟啉配合物作为光磁双模探针的应用研究[D];中国协和医科大学;2010年
6 杨元芬;肘部尺神经的MRI应用研究[D];大连医科大学;2010年
7 陈艳丽;MRI动态增强和扩散加权成像在鉴别乳腺良恶性病变中的应用[D];吉林大学;2010年
8 翟宁;静脉血氧依赖MRI成像在体脑铁含量评价研究[D];中南大学;2010年
9 李毅;MRI辅助定位下舌鳞癌的分子边界研究[D];中南大学;2010年
10 温悦;超声、钼靶及MRI对乳腺疾病诊断的对比性研究[D];河北医科大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026