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雌激素在卵巢切除小鼠疼痛调制中的作用

包晓航  
【摘要】: 临床研究及动物实验均提示疼痛存在显著的性别差异。现已证实,雌激素通过雌激素两型受体(ERα与ERβ)而发挥效应,而雌激素受体广泛分布于与痛觉调节相关的神经结构,表明雌激素通过受体参与疼痛调制的解剖学基础并在疼痛的调制中发挥着重要作用,但雌激素影响疼痛的机制尚不清楚。本实验拟探讨雌激素在脊髓水平通过背角中间神经元的活化、疼痛纤维的传入及星形胶质细胞的活化参与痛觉调制中的途径与效应。 实验采用雌性C57B/L6卵巢切除小鼠,给予外源性雌激素处理,应用免疫组织化学法和痛行为测量和评分方法,观察雌激素对小鼠痛阈变化的影响。建立福尔马林致痛小鼠模型后,对卵巢切除、雌激素处理小鼠进行痛觉评分及结合脊髓L3-L5节段背角c-Fos、P物质(substance P)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein ,GFAP)、钙结合蛋白Calbindin和Calretinin观察雌激素对脊髓背角浅层神经元激活及痛觉传入的影响。结果如下: 1、小鼠行卵巢切除术(ovariectomy,OVX),消除内源性雌激素。通过连续5天的热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)和热板致痛潜伏期(Hotplate latency)的测定,发现卵巢切除小鼠均出现潜伏期缩短、痛阈降低,痛敏增加的痛行为改变,外源性雌激能够有效翻转这一效应。假手术组与正常对照组无明显差异。 2、本实验中将福尔马林注射至小鼠足底制备炎性痛模型,记录痛觉评分,观察到能够产生二相性的行为学反应。卵巢摘除增强福尔马林的致痛作用,主要作用于第二时相,而对第一时相痛反应无明显影响。雌激素对福尔马林致痛的第一时相反应无明显抑制作用,而对间歇期及第二时相早期(15~30 min)的疼痛反应有明显抑制作用。 3、免疫组织化学法显示小鼠注射福尔马林足同侧脊髓背角浅层c-Fos、P物质和GFAP免疫活性(immunoreactive,IR)产物显著升高。卵巢摘除引起福尔马林致痛后脊髓背角FLIN数的增加、P物质增加及GFAP免疫活性细胞数量增加以及Calbindin和Calretinin免疫活性(IR)产物显著减少。皮下给予外源性雌激素,能有效逆转行卵巢切除术后内源性雌激素缺失出现的痛阈降低,痛敏增加的痛行为改变的同时,抑制小鼠足底注射福尔马林后同侧脊髓背角浅层c-Fos、P物质和GFAP免疫活性(IR)产物升高以及Calbindin和Calretinin免疫活性(IR)产物减少。 以上研究结果提示雌激素可通过对脊髓背角浅层中间神经元、星形胶质细胞的活化及痛觉纤维的传入的调节,抑制伤害性刺激具有一定的镇痛作用。


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