收藏本站
《第四军医大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

NDRG2对结肠癌细胞生物学行为的影响

王建勋  
【摘要】:NDRG (N-myc downstream-regulated gene)基因家族由NDRG1、NDRG2、NDRG3和NDRG4共四个成员组成,它们在细胞增殖和分化方面起重要作用,它们彼此之间有53 %-65 %的同源性,其中NDRG2基因由我校首先发现并克隆,其染色体定位于14q11.2,含有16个外显子和15个内含子,该基因转录的mRNA全长为2,024 bp,其编码的蛋白含357个氨基酸残基,分子量约为40 kDa。目前研究发现NDRG2在众多肿瘤组织中低表达,如肝癌、胰腺癌、甲状腺癌和脑膜瘤,被认为在肿瘤抑制中起一定的作用。我们前期的研究也发现在结肠癌及高危腺瘤中NDRG2表达量明显低于正常组织,并且随着Dukes′分级的增高,NDRG2表达有下降趋势。此外,NDRG2的表达与结直肠癌的再发呈负相关,这均提示NDRG2在结肠癌发生发展过程中起着抑制作用。为进一步研究NDRG2的功能,分析其对结肠癌细胞侵袭和转移力的影响,并初步揭示NDRG2抑制侵袭、转移的作用机制,我们进行了如下实验: 实验一 NDRG2对结肠癌细胞SW620的迁移和侵袭力的影响 目的:观察NDRG2对结肠癌细胞SW620侵袭、转移等生物学行为的影响,探讨其可能的调节机制。方法:利用阳离子脂质体转染方法分别转染pcDNA3.1-Ndrg2和SiRNA-Ndrg2于SW620细胞内48h,上调/下调NDRG2的表达,同时以转染pcDNA3.1空载体与siRNA-negtive作为对照;检测NDRG2基因mRNA及蛋白表达水平的变化;通过划痕试验及transwell细胞侵袭试验进一步对上调/下调NDRG2表达水平后的结肠癌细胞迁移和侵袭能力进行分析。结果: pcDNA3.1-Ndrg2转染入SW620细胞后,NDRG2的mRNA和蛋白表达水平明显升高,细胞迁移和侵袭能力下降;SiRNA-Ndrg2转染入SW620细胞后, NDRG2的mRNA和蛋白表达水平明显降低,细胞迁移和侵袭能力上升;与各自对照组相比差异具有统计学意义(P0.05)。结论: NDRG2作为抑癌候选基因能够降低结肠癌细胞转移和侵袭能力。 实验二 慢病毒介导NDRG2对结肠癌细胞SW620生长的影响 目的:观察NDRG2对结肠癌细胞SW620生长、细胞周期调控等的影响,并探讨其可能的调节机制。方法:利用第二代慢病毒载体系统,将包装质粒psPAX2、包膜质粒pMD2.G和载体质粒pLenti6.3/V5-DEST-Ndrg2共转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带NDRG2基因的病毒颗粒,将病毒颗粒感染结肠癌细胞SW620,并筛选出NDRG2过表达稳定转染的结肠癌细胞系SW620-NDRG2,用MTT法测定生长曲线,通过流式细胞仪测定细胞周期。结果:生长曲线显示:NDRG2转染入SW620后,细胞的增殖受到明显抑制;细胞周期测定:NDRG2转染入SW620后,细胞出现明显G1期阻滞。结论: NDRG2作为抑癌候选基因能够抑制结肠癌细胞的增殖。
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R735.35

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 田永刚;许军;;人工气腹环境对结肠癌细胞增殖的影响[J];哈尔滨医科大学学报;2009年04期
2 周阿成;金黑鹰;张春霞;王水明;;槲皮素对结肠癌作用及其机制的研究进展[J];世界华人消化杂志;2011年09期
3 ;结肠抑素[J];生物化学与生物物理进展;1977年05期
4 蒋明方;结肠癌的基因变化[J];国际遗传学杂志;1990年06期
5 黄孝立,张虹,李靖若,杜晓光,王宪远;P_(53)蛋白在结肠癌、癌旁和正常粘膜的表达[J];郑州大学学报(医学版);1993年03期
6 曹俊!200080,蔡文伟,花天放!200080;外源性脂肪酸对结肠癌细胞的影响[J];中华消化杂志;2001年07期
7 徐康,范钰,林庚金,钱立平,黄富春;羟基喜树碱对结肠癌LoVo细胞凋亡及bcl-2、p53基因表达的影响[J];上海医学;2002年10期
8 程艳丽,张桂英,肖志强,李萃,陈松;吲哚美辛抗人结肠癌细胞系HCT116的功能蛋白质组研究[J];中华消化杂志;2004年12期
9 李传伟,徐英萍,苗芳,康莉;莪术油抗小鼠结肠癌效应的实验研究[J];泰山医学院学报;2005年02期
10 王雄飞;刘志苏;钱群;唐胜利;;羟基磷灰石纳米粒子抑制结肠癌SW-480细胞生长的体外实验[J];武汉大学学报(医学版);2006年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 郭鸿飞;李岩;;土槿皮乙酸对结肠癌细胞体外迁移和侵袭的影响及机制[A];第二十二届全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨消化疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2010年
2 武立华;张超;单保恩;艾军;;CD40L基因转染小鼠结肠癌细胞抗肿瘤作用的研究[A];河北省免疫学会第六次免疫学大会资料汇编[C];2010年
3 曹俊;于皆平;周岚;罗和生;于红刚;;胃泌素对结肠癌细胞Colo320WT中β-catenin/Tcf-4通路的影响[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
4 蒋海萍;王浩浩;王琦;张行;曹江;滕理送;;ERα 46介导雌激素对结肠癌细胞HT-29的生长抑制及凋亡[A];浙江省免疫学会第六次学术研讨会论文汇编[C];2007年
5 王国强;方淯靖;卢震海;万德森;;吲哚美辛体外对结肠癌细胞HCT116的影响及机制探讨[A];中华医学会肿瘤学分会第七届全国中青年肿瘤学术会议——中华医学会肿瘤学分会“中华肿瘤 明日之星”大型评选活动暨中青年委员全国遴选论文汇编[C];2011年
6 艾军;武立华;张超;单保恩;;CD40L基因转染小鼠结肠癌细胞抗肿瘤作用的研究[A];2010’全国肿瘤分子标志及应用学术研讨会暨第五届中国中青年肿瘤专家论坛论文汇编[C];2010年
7 沈克;刘建文;;IGF通路抑制对结肠癌细胞多药耐药性影响的分子机制研究[A];2011医学科学前沿论坛第十二届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2011年
8 关明;彭海霞;;△Np73基因沉默对结肠癌细胞5-氟尿嘧啶化疗敏感性的影响[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
9 陈立君;王崴;卢润章;;结肠癌细胞P~(21)和P~(53)的表达与DNA倍体相关性的研究[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
10 王毅;宿晓云;王芳;石毅;王阳;周余来;陈月;;PSA体外诱导结肠癌特异性免疫应答的实验研究[A];吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 张孟军;加科学家发现一种蛋白质[N];科技日报;2000年
2 王振岭;抑制结肠癌肝转移有新解[N];科技日报;2004年
3 刘吉勇;5-FU和抗Fas单抗联合治疗结肠癌[N];中国医药报;2004年
4 湖北 胡献国;蚕豆药用新发现[N];民族医药报;2000年
5 麦国荣;环氧化酶与新药的开发[N];中国医药报;2003年
6 王生;细菌杀癌没商量[N];医药经济报;2001年
7 张田勘;基因的对垒与相互依存[N];大众科技报;2000年
8 记者 毛磊;动物实验显示姜可能具抗癌功效[N];新华每日电讯;2003年
9 新华;丁化并可降低患者对化疗的抗药性[N];中国医药报;2001年
10 毛 磊;动物实验显示姜可能具有抗癌功效[N];中国中医药报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐春盛;NDRG2对结肠癌细胞增殖分化的影响及其机制研究[D];第四军医大学;2012年
2 彭程;整合素αvβ6调控结肠癌细胞恶性生物学行为的实验研究[D];山东大学;2010年
3 高硕徽;c-Met信号传导通路在结肠癌中的蛋白表达及SU11274对结肠癌细胞的增殖抑制作用的研究[D];吉林大学;2011年
4 吴星烨;RNA干扰结肠癌细胞HIF1-α基因的蛋白质组学分析[D];重庆医科大学;2011年
5 王成果;NDRG2在人甲状腺髓样癌中的表达及其功能的初步研究[D];第四军医大学;2011年
6 郑瑾;NDRG2在肝癌细胞与肝星形细胞相互作用中对肝癌转移的影响[D];第四军医大学;2010年
7 禹化龙;骨桥蛋白表达对人结肠癌细胞生物学行为影响的实验研究[D];山东大学;2012年
8 王枫;电针预处理通过EAAT2调节NDRG2诱导脑缺血耐受的研究[D];第四军医大学;2012年
9 初大可;NDRG2基因在结直肠癌中的表达、功能和作用机制研究[D];第四军医大学;2011年
10 李力;NDRG2截短肽的抗肿瘤作用及NDRG2与胶质瘤预后的关系[D];第四军医大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王建勋;NDRG2对结肠癌细胞生物学行为的影响[D];第四军医大学;2011年
2 苏婧;去甲基化对结肠癌细胞核内转录因子的影响[D];中南大学;2010年
3 萨日娜;5-氟尿嘧啶及西妥昔单抗筛选残存结肠癌细胞的上皮—间质转化特性及其与耐药关系的研究[D];第三军医大学;2011年
4 高飞;化疗介导结肠癌细胞免疫原性死亡的实验研究[D];河北医科大学;2011年
5 陈苏平;共刺激分子CD40在结肠癌细胞中的表达及其临床意义[D];苏州大学;2010年
6 马冬华;PI3K抑制剂LY294002对结肠癌细胞SW480细胞株的影响及机制[D];重庆医科大学;2012年
7 隋御;REV3基因对结肠癌细胞遗传信息表达的影响[D];宁夏医科大学;2010年
8 苗雨;维生素D3抑制Runt相关转录因子3依赖的结肠癌细胞增殖的研究[D];宁夏医科大学;2010年
9 伍洲颂;HIF-1α与Snail在结肠癌细胞中的表达及意义[D];南华大学;2011年
10 徐厚巍;低分子柑橘果胶杀伤结肠癌细胞过程中关键凋亡蛋白的活化[D];广州医学院;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026