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《第四军医大学》 2001年
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菌斑形成的超微结构研究及菌斑中变形链球菌GbpB的免疫电镜观察

周泽渊  
【摘要】: 菌斑是形成龋病的主要致病因素。牙菌斑中含有大量微生物,这些微 生物与龋病的发生密切相关。了解菌斑的结构及形成和发展过程对于防龋和 治龋都有重要的意义。 变形链球菌群(mutans Streptococci,MS,以下简称“变链群”)是公认的人 类主要致龋菌,其中与人类龋病关系最密切的是变形链球菌(以下简称“变 链菌” 或S.mutans),它包括c、e、f三种血清型。S.mutans的粘附、聚集能 力是其在菌斑中生存并致龋的重要因素。影响这两种能力的因素较多,近年 来,葡聚糖结合蛋白(Glucan-binding proteins,Gbps)日益受至重视,因为它们 在细菌间及细菌与菌斑基质间起着“桥梁”作用。本实验在建立菌斑口内模 型的基础上,系统的观察了菌斑形成的超微结构,并利用胶体金免疫电镜对 葡聚糖结合蛋白B(Glucan binding protein B,GbpB)在菌斑形成中的作用作了 初步的研究。 研究分为三部分: 第四军医大学硕士学位论文 1.菌斑的超微结构研究 将1、5、gd形成的菌斑标本制成电镜切片后用透射电镜观察。同时制 成半薄切片,分别用革兰氏和美蓝染色后光镜观察。电镜结果显示初期菌斑 的细菌较少,主要为球状菌。随着时间的延长,细菌的数量和种类开始增加, 出现丝状菌和杆状菌。成熟菌斑结构是两侧为丝状菌中间为球状菌的栅栏状 结构,其中部分细菌会出现坏死的现象。美蓝染色显示菌斑中含有球状菌、 杆状菌以及丝状菌等细菌微生物,细菌分布情况类似电镜结果。革兰氏染色 显示阳性菌大多为球状或杆状菌,呈散在分布;阴性菌多为丝状或弯曲状菌, 分布呈丛状或簇状。 2.菌斑中GbpB的兔疫电镜观察 将完整的口内菌斑标本制作成电镜切片后,做GbpB的胶体金染色。结 果显示菌斑中胶体金颗粒分布不均匀,呈单层分布于变链菌表面。变链菌团 块状聚集处的染色颗粒较为密集,提示变链菌在菌斑中不是散在分布的,而 是呈团块状聚集,在其粘附过程中,其表面特有的粘附分子起非常关键的作 用。 3.菌斑结构的激光共聚焦显微镜研究 从口内获得完整的菌斑标本,兔疫荧光染色后,用激光共聚焦显微镜观 察并利用计算机进行三维重建。结果显示菌斑是由分布不均匀的细菌。基质 以及空隙构成的复杂结构。
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R780.2

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