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《第四军医大学》 2001年
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血管钠肽对低氧促心成纤维细胞生长的抑制作用及其机制

郭海涛  
【摘要】: 血管钠肽(VNP)是钠尿肽家族的新成员,它有扩张血管、抑 制平滑肌细胞增殖的作用,而低氧环境是造成心成纤维细胞 (CFs)增殖的原因之一,VNP对低氧促CFs生长的抑制作用及其 机制还不清楚,因此,作者研究VNP对低氧促CFs生长的影响, 并探讨其机制。 以新生SD大鼠CFs为研究对象,采用四唑盐比色实验(MTT) 法、细胞周期测定法和~3H-TdR掺入量测定,观察了VNP对低氧促 CFs生长的影响。通过细胞内Ca~(2+)水平测定和Fos蛋白免疫组化 实验对其机制进行了初步探讨,得到了以下结果: 一.VNP对低氧促CFs生长的作用 低氧可以促进CFs生长。20 ml/L~30 ml/L低氧组MTT OD值 显著高于对照组(P<0.05)。VNP(10~(-6)~10~(-8)mol/L)对低氧促CFs 生长有抑制效应,也有剂量依赖性。VNP+低氧组MTT OD值显著 低于低氧组(P<0.05)。 二.VNP和低氧对CFs细胞周期的影响 流式细胞分析表明,与常氧对照组相比,CFs缺氧培养24h 第四军医大掌硕士学位论文 后,显著增加进入 GZ川期的细胞比例(KO.05),而显著减少进 入GO/GI期的细胞比例(RO.01)。VNP(10-’mol/U能减少缺氧CFs 进入 GZ/M期的细胞比例(HO.05),增加进入 GO/GI期的细胞比 例(RO.05);使更多的CFS处于相对静止期。 5.VNP对低 氧时队S内‘H-TdR掺入水平的影响 低氧使CFS’H-TdR掺入水平显著增高,VNP可显著降低低氧 时’H-TdR的掺入水平,而且有剂量依赖性。对照组为(100士7) %cpm,低氧时为(129土14)%cpm,当加入 10-‘、10-’mol/乙和 10-” mol/L VNP后,分别降为(105士8)%cpm、(95土14)%cpm(81土刀 %Cpm,较低氧组分别降低18.6%、26.3%及37.2%(HO.05)。当 加入 2.5x10-‘mol/L维拉帕米后,低氧及常氧组的值均降低,而 且与对照组相比有显著性差异(KO.of)。 四.VNP和呵 氧对CFs内Ca‘“水平的影晌 低氧使CFs内Ca‘”水平显著升高,VNP(10-‘mol/L)可以降低低 氧时CFs内Ca‘”水平。 五.VNP对低 氧刺激CFS白C-fos原癌基因表达的影 回 对照组(常氧、不加 VNP)有少量细胞呈弱阳性表达,20 ml/L~30 ml/卜低氧组的 Fos样免疫反应阳性 CFs占(84.6t7.8)%, 染色强度为Q.6从U(HO.05,VS对照组入 阳性产物主要存 在于细胞核中,呈椭圆形或圆形,紫黑色,可见不着色的核仁区, 偶见小核。单独用VNP ( 0‘mol/L)处理,对心肌细胞Fos蛋白 表达无显著影响。以 VNP(10-‘mol/L)预处理 30 min,可减弱 低氧增强FOS 蛋白表达的作用,F。S样兔疫反应阳性吓S 占 -2- 第四卑医大学硕士学位论文 n.10.1W染色强度为(侣4.6土10.针从以0.05,化 低氧组), 但F。S蛋白的表达仍高于对照组的基础水平。 结果表明VNP可以减弱低氧的促CFS生长作用,其机制可能 与降低细胞内Ca‘“水平以及原癌基因cdes的表达有关。
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R331

【引证文献】
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