高胆固醇血症兔Oddi括约肌细胞钙火花特征及其对Ca～（2+）转运的影响

杨向新  

【摘要】： 背景和目的：Oddi括约肌(Sphincter of Oddi，SO)是具有精细分工的肌性结构，SO与胆囊在激素与神经的作用下，产生协调的收缩、舒张功能，并通过其收缩、舒张运动维持胆道系统的压力及调控胆汁和胰液的排出。Oddi括约肌功能紊乱(Sphincter of Oddi dysfunction，SOD)是胆道系统及其它疾病发生的重要动力学诱因之一，其中高胆固醇(Cholesterol，Ch)对胆道系统动力学影响已经有文献报道。本实验采用制作高Ch血症兔动物模型、细胞培养、透射电镜及激光共聚焦显微镜技术，观测高Ch血症对SO平滑肌细胞的超微结构、Ca~(2+)转运及钙火花(Ca~(2+)sparks)特性的影响，探讨SOD的发生机制与Ca~(2+)的调节作用之间的关系。 方法：纯种新西兰兔32只，随机分为2组，每组16只。对照组饲以标准饲料，实验组饲以标准饲料+Ch，共8wk。两组SO分别进行常规制片，透射电镜观察；细胞原代培养，Fluo-3／AM负载，用激光共聚焦显微镜对照观测静息状态及3.6mmol·L~(-1)MgSO_4作用下SO胞内Ca~(2+)([Ca~(2+)]_i)浓度变化及钙火花特征。 一 结果： l 高Ch血症兔Oddi括约肌部分肌细胞骨架结构排列紊乱，密体、密斑 分布不均，数量减少，肌丝扭曲、疏松；细胞器肿胀、扩张。可见少量合 成表型平滑肌细胞及肌成纤维细胞。 2 静息状态卜，实验组SO细胞Ka》］i为O．07t0．82），明显高于对照组 O．56土1二2），…＜0刀5）；＊SO。持续作用下，实验组细胞内Ca＊荧光强度 下降速率（0．87土0．14）·s“’，明显低于对照组（l．38士0．22）·s－’，（P＜0．05），且 【Ca’＊峰谷值（16．＊士o＊5）高于对照组（6．＊士0．16），（P＜0＊5），下降幅度 （2．59土l．22）％明显低于对照组OO．77土2．56）％，（＜0．05），恢复速率（．of 士0＊0）·s1明显低于对照组（0斗1士0＊4）·s1，（＜0．05）。宇火花特征：静 息状态下，实验组与对照组钙火花频率、幅度、持续时间分别为（1．28上 0刀2）·sl·celll、（3．82土0．26）、260ms及（1．24土0刀3）·s－l·cell”1、（3．92土 0．32X260ms，两组间无显著差异…0刀5）：＊80。作用下，实验组钙火花 频率（l．39土0．02）·s一’·cell一‘，较对照组（l．61士0．02）回s一’·cell一‘明显刁慢 …＜0＊5）；钙火花幅度、持续时间 分别为（0．41上0．26）、260——，对照组为（0．4O 士0二1）、260——，两组问无显著差异…＞0．05）。 结论： l 高Ch血症影响兔SO细胞的超微结构，使质膜结构和功能受损，改变 细胞骨架的构型及数量，可能导致SO功能异常。 二 高 Ch血症引起 SO肌细胞 Ca》转运障碍，＊a》D稳态失衡，处于超载 状态。SOD与细胞r 门i高负载有关。 3 在一定范围内，＊ah］i与钙火花波幅呈正相关；＊ah］i浓度变化速率与 钙火花频率呈正相关。 4 实验组钙火花的释放频率变慢，可能导致卜型电压依赖性钙通道失活 不完全或失活间隔时间延长，＊于”内流增加，这样钙火花的生物效应未能 3 一 发挥，钙火花对VDCS的负反馈调节作用受阻，使得厂‘”h呈超载状态。 这可能是高Ch血症诱发SOD的重要原因之一。 SRyR通道释放钙火花的功能不受影响。

【关键词】：胆固醇 Oddi括约肌 超微结构 钙火花 激光共聚焦显微镜
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R589.2
【DOI】：CNKI:CDMD:2.2002.081296
【目录】：

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