中枢神经损伤与修复的研究

吴中亮  

【摘要】： 本文分两部分。第一部分是关于纤维蛋白胶包裹的嗅粘膜固有层碎片移植，促进全横断脊髓轴突再生；第二部分是关于肌苷和安定对大鼠脑梗塞后细胞坏死和凋亡的保护作用。 脊髓损伤后轴突再生能力极其有限，其原因是多方面的，包括局部微环境的影响。脊髓内移植不同组织(如胚胎组织、周围神经、雪旺氏细胞和巨嗜细胞等)则是多年来尝试的改善损伤局部微环境的主要修复方法之一。嗅神经鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)是其中较为理想的脊髓损伤修复细胞。OECs可分泌NGF、BDNF、NT-3、NT-4等多种神经营养因子，为受损的中枢神经再生提供合适的微环境。再生轴突可依附OECs分裂增殖形成的细胞索支架生长至靶组织并建立功能联系，因而成为脊髓损伤修复研究中的热点。Ramon—Cueto等将嗅神经鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)移植于成年大鼠脊髓全横断断端实质内，可使损伤轴突跨越断端再生，并获得部分后 第四军医大学博士学位论文 肢运动功能的恢复。他们所用的OECS是从同种异体成年动物嗅球获 得，但其中的技术困难和伦理学问题限制了临床应用。Lll等的研究为 这一问题的解决带来了希望，他们移植取自成年大鼠自体鼻腔富含 OECs的嗅粘膜固有层…lfactory larnina propria，OLPX 同样取得跨越脊 髓断端的轴突再生和截瘫后肢运动功能部分恢复的结果，更使自体移 植成为可能。 脊髓全横断后两断端的连接状况，是再生轴突通过损伤区以及进 一步的功能恢复的首要前提。本研究将富含嗅神经鞘细胞的大鼠嗅粘 膜固有层（OLP）碎片裹以纤维蛋白胶（ibrin glue，FG人移植到脊髓 全横断断端间隙内，观察对脊髓两断端连接及轴突再生的影响。全横 断大鼠胸 10节段脊髓，分别于脊髓断端间隙内移植 OLP（OLP组）。 FG包裹的 OLP（FG－OLP组）或等量的 FG仅G组X 每组 6只：另 6 只仅行脊髓横切（单纯全切组）。10周后处死动物，取材观察四组大 鼠脊髓断端的连接情况。结果显示，单纯全切组和OLP组脊髓两断端 连接较差；FG组和FG－OLP组断端连接较好，少有空洞。 生长相关蛋白－43（growth－associated protein 43，GM－43）是一种 与神经轴突生长和再生相关的蛋白质，在发育的神经元及再生的轴突 中表达，通常作为轴突生长和再生的象征。在我们的结果中，单纯全 切组和FG组损伤区可见少量NF及GAP－43免疫反应纤维，分布弥散， 纤维细小，排列方向凌乱。OLP组可见较多NF及G APAP－43免疫反应 纤维，但未见跨越脊髓横切部位；而FG－OLP组损伤区内有大量NF 及GAP43免疫反应纤维，并跨越脊髓横切部位。NF和GAP－43免疫 荧光双标结果显示，二者在损伤区的分布相同。 结论：FG包裹的OLP碎片脊髓断端间隙内移植可促进脊髓两断 端的连接及轴突的再生。 在本文的第二部分，我们探讨了肌昔和安定对脑梗塞后细胞坏死 一二一 第四军医大学博士学位论文 和凋亡的影响。脑梗塞是由梗塞中心区和处于低灌流状态的周边区即 缺血性半影区（ischemic penumbra）组成。由于梗塞中心区的脑组织氧和 能量很快耗竭，在数分钟内即发生不可逆性损伤，导致细胞坏死；而 半影区的脑细胞由于仍保留了正常供氧的20～50％，损伤相对较轻， 可继续维持数小时，如能及时恢复血流或采用药物治疗，则可能被挽 救，否则转变为不可逆性损伤，使梗死灶扩大。半影区细胞主要的死 亡方式是凋亡，这是由于这些细胞仍保持了部分蛋白合成能力并表达 某些凋亡相关基因。治疗脑梗塞的重点在于挽救缺血性半影区内的神 经元，减少死亡（包括坏死和凋亡）：抑制凋亡过程。 肌昔 门nosine）是腺瞟吟核昔酸分解代谢中间产物，临床上长期 作为治疗肝病等的辅助用药。肌昔的基本作用是促进组织更有效地利 用氧，并在脑缺血状态下保持高水平的嘿吟核昔酸。最近研究显示， 肌昔能提高体外培养的神经元和胶质细胞对缺氧、缺血以及硫酸锌的 耐受性，促进神经元存活：刺激交感神经和视网膜节细胞突起生长： 诱导正常皮质脊髓束大量向损伤侧出芽。安定也是临床用于镇静、催 眠、抗惊厥的常用药物。近年来有研究显

【关键词】：脊髓损伤 移植 嗅粘膜固有层 嗅鞘细胞 纤维蛋白胶 生长相关蛋白-43 神经丝 脊髓全横断 缺血 脑梗塞 凋亡 坏死
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R651.15
【DOI】：CNKI:CDMD:1.2002.081430
【目录】：

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