收藏本站
《第四军医大学》 2002年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

肿瘤细胞抗脱落凋亡分子机理及其人工干预的初步研究

韩炯  
【摘要】: 脱落凋亡(anoikis)是凋亡的一种形式,它是由于正常的上皮细胞或内皮细胞脱离与ECM的联系而引起的。其生物学意义在于防止这些脱落的细胞种植于其他不适当的地方继续生长。大多数来源于上皮或内皮组织的肿瘤细胞,尤其是容易发生转移的恶性肿瘤细胞,则失去了这种特性,由于瘤细胞从瘤体上脱落后并不发生凋亡,因而可以种植到其他部位继续生长。这种存在于某些肿瘤细胞中的对脱落凋亡的敏感性降低被认为是肿瘤发生转移的一个重要机制。转移瘤的发生是临床上肿瘤病人死亡的一个重要原因,而且这种现象极其多见,例如乳腺癌、肺癌、肝癌、胃癌、前列腺癌等恶性肿瘤都很容易发生转移。因此,阐明肿瘤细胞抗脱落凋亡现象的信号转导过程将会是一项非常有前景的研究课题。一方面对于理解参与脱落凋亡和抗脱落凋亡过程的信号分子和信号转导途径具有重要的理论意义,另一方面对于发展抑制肿瘤转移新策略同样具有重要的应用价值。 为深入理解肿瘤细胞抗脱落凋亡的分子机制,我们首先通过DNA ladderring检测、FCM检测以及软琼脂集落形成实验筛选了一些乳腺癌细胞系,包括Bcap-37、MCF-7、MDA-NB-231以及SK-BR-3,观察它们对脱落凋亡的敏感性。结果显示,来源于狗正常肾脏上皮的阳性对照MDCK细胞对脱落凋亡是敏感的,表现为琼脂糖凝胶电泳检测到凋 第四军医大学博士学位论文 第6页 亡特征性的片段化DNA,细胞周期中高比例的亚二倍体峰的出现,以及在软琼脂中不 能形成集落。而Bcap-37、MCF-7、MDA-n-231三种乳腺癌细胞则具有抗脱落凋亡的特 性,分别与它们各自贴壁培养的细胞比较,胞浆DNA琼脂糖凝胶电泳表现无明显差异, FCM所检测到的凋亡峰也无明显区别。而且,这三种乳腺癌细胞在软琼脂中都具有形 成集落的能力。SK.BR-3细胞同样是抗脱落凋亡的;但它却不能在软琼脂中形成集落, 也许与ECM联系的失去对SK-BR-3细胞的悬浮生长有一定的影响。 对于筛选出的三种抗脱落凋亡的肿瘤细胞系,它们的抗脱落凋亡特性究竟与哪个 或哪些信号分子有关呢?首先,我们观察了一些信号分子的特异抑制剂对肿瘤细胞抗 脱落凋亡特性的影响,期望通过对脱落凋亡的抑制来提示我们与脱落凋亡相关的信号 分子。其中包括:HERZ的特异抑制剂AG825;,PDGFR的特异抑制剂AG17;p38MAPK 的特异抑制剂sB203580:*D-K的特异抑制剂LY 29以m2;MAP KK(K)的特异抑 制剂PD98059。胞浆DNA电泳显示在短时间内(15h),这些抑制剂未能诱导悬浮培养 的肿瘤细胞出现凋亡现象,但在软琼脂集落形成实验中,每种抑制剂对肿瘤细胞在软 琼脂中的生长则具有不同的影响。AG17对三种乳腺癌细胞均有明显的抑制作用, PD98059可以部分抑制MDA-MB-231的集落形成。其余的抑制剂则没有明确的生长 抑制现象。这些结果提示我们,PDGFR信号通路可能与三种乳腺癌细胞的抗脱落凋亡 特性相关。另外对于 MDA.MB.231细胞来说,MAPK信号转导通路在其抗脱落凋亡 过程中也许起着一定的作用。由于信号转导网络系统的复杂性,这两种信号转导通路 究竟扮演着什么样的角色尚待进一步的研究。 在抑制剂分析实验中,作用比较明确的是广谱蛋白酪氨酸激酶抑制剂genistein, 尽管短期(24小时内)作用不是很明显,胞浆DNA琼脂糖凝胶电泳以及FCM均未 能检测到它对悬浮培养的三种乳腺癌细胞的诱导凋亡作用。但它可以完全抑制它们在 软琼脂中的生长,经 western blotting检测,在 genistein的作用下细胞中总体蛋白酪氨 酸的磷酸化水平也有不同程度的下降。这提示我们肿瘤细胞的抗脱落凋亡特性很可能 仍然是由蛋白酪氨酸激酶来介导的。 我们进一步检测了几种相关信号通路中的关键信号分子在贴壁培养与悬浮培养 时的表达水平及磷酸化状态的改变。发现两种重要的参与细胞存活信号通路的信号分 子ERKI/2以及AKT(分别参与MAPK信号通路以及PD-K信号通路)的表达水平在 Doann’Uat ofBtochemtw and ilecUler Btotort FMMU 第四军医大学博士学位论文 第7页 贴壁细胞与悬浮细胞中没有明显的差异。但是未能检测到它们磷酸化水平的差异,因 而它们是否参与所检测的三种乳腺癌细胞抗脱落凋亡的过程尚不能明确。FAK的磷酸 化水平在悬浮培养的细胞中是下降的,这与文献报导一致。衔接分子 PI 30CAS在悬浮 培养的乳腺癌细胞中的表达水平与贴壁培养的细胞比较有不同程度的增加,尤其是在 MDA-MB-23细胞中,随着悬浮培养的时间延长,这种趋势更为明显。 我们同时检测了三种乳腺癌细胞在悬浮培养时总体蛋白酪氨酸磷酸化水平的改 变。大多数蛋白酪氨酸磷酸化的水平在悬浮培养的乳腺癌细胞中是下降的。例外的是 在悬浮培养的BCap-37细胞以及MDA-MB-231细胞中,在66二kD与97.4kD之间有一 条带,其磷酸化水平与贴壁培养的细胞相比明显增高。此外,在 MDA-MB-23细胞 中,有一大分子量(100kD以上)的分子的酪氨酸磷酸化水平在悬浮培养时明显?
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R737.9

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 李凤琴,张大锤,曲显俊,王惠,周玲,左春旭;芦笋提取物抗癌作用的研究[J];癌症;1993年03期
2 周振华;中药诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展[J];国外医学(中医中药分册);1998年03期
3 邹恒琴,徐峰,张忠义,孙逊;一种具有前景的抗癌药苦马豆素的研究进展[J];中草药;1997年07期
4 徐学民,袁崇均;一个具有生物活性的新紫杉烷类似物──紫杉次碱的分离及结构测定[J];中草药;1998年06期
5 阎军峰;绞股蓝抗肿瘤作用的研究进展[J];中医药研究;1998年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 夏俊,陈治文,石莹;绿芦笋提取液抑制肿瘤细胞核酸生物合成的研究[J];癌变.畸变.突变;2003年04期
2 单保恩,李俊新,张静,梁文杰,李宏芬;中药香加皮与其易混品体外抑瘤效果研究[J];癌变.畸变.突变;2005年05期
3 李俊新;蒋玉红;单保恩;;香加皮水提物对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的初步研究[J];癌变·畸变·突变;2010年04期
4 尹长森;溶栓胶囊治疗老年高粘滞血症40例[J];安徽中医临床杂志;1999年05期
5 张夏清,胡为俭;自拟参七查蒲汤治疗原发性高血压34例疗效观察[J];安徽中医临床杂志;2000年03期
6 杨爱国;自制温补肺肾丸治疗过敏性鼻炎90例[J];安徽中医临床杂志;2003年03期
7 孙云江;自拟颈舒汤配合针灸治疗椎动脉型颈椎病80例[J];中医药临床杂志;2004年05期
8 余国英,李华云,张红,萧嗥玲;中药颗粒配制自拟降脂饮治疗老年脂肪肝51例[J];中医药临床杂志;2005年02期
9 黄各宁;陈积优;;养血清脑颗粒治疗妇女更年期失眠及其对内分泌激素影响的观察[J];中医药临床杂志;2007年01期
10 徐士勇;;自拟清利汤治疗男性顽固性尿道解脲支原体感染30例[J];中医药临床杂志;2007年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 林启展;李飞;范立明;黄璟;包昆;卢富华;吴秀清;;通脉口服液对维持性血液透析患者心脏结构及功能的影响[A];自主创新与持续增长第十一届中国科协年会论文集(3)[C];2009年
2 牟金金;周佳;张莹;王卓;;从药理作用机制角度看中西药干预防治化疗性静脉炎[A];2010年临床药学学术年会暨第六届临床药师论坛论文集[C];2010年
3 朴炳奎;;中药在肿瘤治疗中的运用及有关作用机理的研究[A];中国临床肿瘤学教育专辑(2002)——中国抗癌协会第六届临床肿瘤协作中心(CSCO)学术年会论文集[C];2002年
4 茅建春;陈湘君;苏励;顾军花;吴沛宇;;益肾温督化痰活血通络内外合治治疗AS的临床研究[A];全国中西医结合强直性脊柱炎专题研讨会论文汇编[C];2007年
5 魏明刚;孙伟;;肾脏病微炎症状态的中医认识[A];2008年全国中西医结合肾脏病南京论坛论文汇编[C];2008年
6 钱涯邻;陈维铭;张燕;;中药乙肝Ⅱ号联合α-干扰素治疗慢性乙型病毒性肝炎的临床观察[A];第二次全国中西医结合诊断学术研讨会论文集[C];2008年
7 黄建坤;孙卫;;中药注射剂静滴治疗心脑血管疾病[A];2009年全国中药学术研讨会论文集[C];2009年
8 于敏;韩冰;史耀勋;;中西医结合治疗肾性高血压55例临床分析[A];第10届全国中西医结合肾脏病学术会议论文汇编[C];2009年
9 郑国伟;黄海滨;林奕芬;陈少如;;活血祛痛饮对痛风性关节炎及血液黏度的临床研究[A];中华中医药学会血栓病分会成立大会暨首届血栓病学术研讨会论文集[C];2007年
10 黄海滨;郑国伟;陈维婵;方苗;郑晓菲;陈少如;;痛风效验方治疗痛风性关节炎的临床研究[A];中华中医药学会血栓病分会成立大会暨首届血栓病学术研讨会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐惠梅;心宁丸抗心肌缺血大鼠的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
2 李渊;痰热清注射液对产ESBLs大肠埃希菌耐药性影响的研究[D];北京中医药大学;2011年
3 朱霓;血管内皮细胞microRNA的表达谱分析和功能研究[D];第二军医大学;2011年
4 刘敬;胃宁胶囊的药效及作用机理研究[D];成都中医药大学;2011年
5 张乐;川芎嗪对模拟高原低氧暴露下大鼠肺水肿的保护作用及机制研究[D];第三军医大学;2011年
6 张旭;木香生用理气煨熟止泻原理研究[D];辽宁中医药大学;2011年
7 石绍顺;消化性溃疡的中医证治规律研究及临床疗效的系统评价[D];辽宁中医药大学;2011年
8 叶晓萦;中药益寿二参颗粒干预高脂血症的实验研究与临床观察[D];山东中医药大学;2011年
9 朱姝;ACA阳性先兆流产与CD4~+CD25~+FOXP3~+Treg细胞的关系及安子合剂干预作用研究[D];南京中医药大学;2011年
10 王明华;红藤四萜大环内酯酸钠对肝癌的药效学及作用机制研究[D];第四军医大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘振清;防风对大小鼠胃肠运动的抑制及机制[D];南京医科大学;2009年
2 何少平;柴胡三参胶囊对心肌缺血心律失常模型大鼠心肌细胞Ca~(2+)及SERCA2a表达的影响[D];湖南中医药大学;2010年
3 贺希;中西结合治疗慢性乙型重型肝炎的疗效观察[D];湖南中医药大学;2010年
4 王玉喜;木防已汤加减治疗慢性充血性心力衰竭的临床观察[D];黑龙江中医药大学;2010年
5 王艳宏;参苓白术散加味治疗复发性口疮的临床观察[D];黑龙江中医药大学;2010年
6 张强强;加味人参汤治疗脾胃虚寒型胃溃疡的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
7 王悠草;加味瓜蒌薤白汤治疗冠心病心绞痛(心肾阳虚型)的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
8 李晓明;消瘀膏治疗血栓性外痔的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
9 陈雁雁;射干麻黄散治疗小儿哮喘急性期寒哮证的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
10 赖黎丽;基于芯片杂交结果克隆疏叶骆驼刺、苦马豆相关基因的研究[D];新疆农业大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杜琰琰,莫自耀;绞股蓝总皂甙致突变和抗诱变作用研究[J];癌变.畸变.突变;1995年03期
2 蔡幼清;绞股蓝皂甙对过氧化氢导致氧化剂损伤的血管内皮细胞的保护作用[J];国外医学(中医中药分册);1994年03期
3 程小跃,许金波,孙兆泉;绞股蓝总皂甙抗突变的实验研究[J];湖南中医杂志;1995年06期
4 王济民,王俊茹,毕宏观,傅革新,赵聚宾;复方绞股蓝汤为主预防癌症手术放疗后复发转移[J];河北中医;1997年01期
5 周曾同,张水龙,李伟国,金芝贵;复方绞股蓝对金地鼠颊囊癌前病变的疗效观察[J];上海口腔医学;1996年02期
6 黄俊明,李海缨,孙步祥;绞股兰皂甙的胚胎毒性和致突变性研究[J];卫生毒理学杂志;1992年02期
7 刘华,司履生;绞股蓝总皂甙对体外培养肺癌细胞的抑制作用[J];西安交通大学学报(医学版);1994年04期
8 陈珏;;植物药绞股兰在日本的研究概况[J];浙江药学;1986年04期
9 王迎进,白元让;绞股蓝总皂甙在沙门菌试验中的抗诱变作用[J];中国药理学通报;1995年01期
10 陈未名;红豆杉属(Taxus)植物的化学成分和生理活性[J];药学学报;1990年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈伟珠;李祥勇;周克元;;PTEN体外转染对乳腺癌细胞ZR-75-1细胞周期和增殖的影响[J];右江医学;2006年02期
2 孙慧;孙蕾娜;战忠利;魏熙胤;孙保存;郝希山;;Survivin及其相关基因在BCML-TA299乳腺癌发展中的作用机制研究[J];中国肿瘤临床;2006年10期
3 王玉栋;刘巍;;肿瘤标志物与乳腺癌骨转移的诊治[J];肿瘤研究与临床;2006年04期
4 杨光;张祥宏;;骨桥蛋白与乳腺癌的关系及其影像学表现[J];中国医学影像学杂志;2007年02期
5 侯吉学;马辉;黄桂林;;VEGF-C在乳腺癌淋巴结转移中的研究进展[J];实用肿瘤学杂志;2007年04期
6 王颖;王渝东;万跃;谭兵;吴永忠;;全反式维甲酸诱导对乳腺癌细胞放射敏感性影响的研究[J];重庆医学;2007年20期
7 王文静;王茂玉;王明玉;;雌激素、Fak与乳腺癌关系的研究进展[J];实用癌症杂志;2008年01期
8 常永丽;李君;;环境内分泌干扰物及代谢酶基因多态性与乳腺癌的关系[J];环境与健康杂志;2008年02期
9 吕新玲;孙振柱;;Rho亚家族与乳腺癌的研究进展[J];医学综述;2008年09期
10 成广存;孙雪青;周晓明;王建华;;肿瘤微环境在乳腺癌发展和治疗方面的作用[J];外科理论与实践;2011年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 吕辉;文继舫;吴晓英;;REST在乳腺癌中的功能研究[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
2 李云涛;史立波;李海平;范忠林;任曙光;;睾丸酮对乳腺癌MCF-7细胞株生长影响的研究[A];中华医学会肿瘤学分会第七届全国中青年肿瘤学术会议——中华医学会肿瘤学分会“中华肿瘤 明日之星”大型评选活动暨中青年委员全国遴选论文汇编[C];2011年
3 李涛;陈正望;;炎性多肽Daintain/AIF-1在乳腺癌发生发展中的作用[A];肿瘤病因学研究与中西医结合肿瘤综合诊疗交流研讨会论文集[C];2009年
4 胡晨;陈彬;王越;陈先华;;乳腺癌中IGF信号途径及其抑制剂研究进展[A];重庆市生物化学与分子生物学学术会议论文摘要汇编[C];2009年
5 谢英;吕占军;段肖翠;侯洁;韩丽枝;王秀芳;;α-生育酚琥珀酸酯对乳腺癌细胞中Bcl-2家族蛋白表达的影响[A];河北省免疫学会第六次免疫学大会资料汇编[C];2010年
6 马琼;裘秀春;Wei Wang;范清宇;Shi Ke;;靶向IL-11Rα的特异性造影剂在乳腺癌成像中的应用[A];2010’全国肿瘤分子标志及应用学术研讨会暨第五届中国中青年肿瘤专家论坛论文汇编[C];2010年
7 董学君;郑专;陈建军;王贵珍;;逆转录结合荧光定量聚合酶链反应检测外周血乳腺癌细胞hMAM基因表达[A];2006年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2006年
8 卫红艳;任留梅;翟琼莉;邱明才;;人成骨样细胞MG-63与乳腺癌细胞相互作用的体外研究[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
9 张海谱;单保恩;;ALDH1和CD55表达在乳腺癌中的预测意义[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
10 戴建建;章静茹;陈峰;马道新;纪春岩;;EGFR抑制剂对乳腺癌细胞生物学活性的影响[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 毛黎;美发现有效抑制乳腺癌细胞生长的分子[N];科技日报;2010年
2 王炜 编译;5分钟,乳腺癌细胞检验提速[N];医药经济报;2010年
3 实习生 蒋洪涛;激素治疗应慎重,别让乳腺癌瞄上你[N];科技日报;2010年
4 记者 吴春燕 通讯员 王丽霞;乳腺癌治疗将有新途径[N];光明日报;2011年
5 刘霞;一种天然分子能阻止乳腺癌恶化[N];科技日报;2011年
6 ;专家发现抑制DNA修补可杀死乳腺癌细胞[N];中国高新技术产业导报;2005年
7 ;抑制DNA修补可杀死乳腺癌细胞[N];中国医药报;2005年
8 青锋;堵截乳腺癌细胞“逃逸隧道”防止肿瘤原发病灶发生转移[N];医药经济报;2001年
9 柯继;美国:悄然兴起“长寿饮食”[N];中国食品报;2009年
10 程维勇;乳腺癌患者面对的四大问题[N];中国妇女报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 聂秀青;拉帕替尼诱导HER2阳性乳腺癌细胞凋亡机制及其与ABT-737的协同抗肿瘤作用[D];复旦大学;2010年
2 孙西洋;新型纳米复合载体的构建及其介导NK4基因在治疗乳腺癌中的应用[D];中国医科大学;2010年
3 张莹;TSG101对乳腺癌细胞的作用及与HIF-1α、MAPK/ERK信号通路的关系[D];中国医科大学;2008年
4 袁霞;应用基因芯片(Microarray)和实时监测聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测他莫昔芬和雌二醇对人类乳腺癌细胞基因表达的调控[D];吉林大学;2005年
5 胡成进;Kallikrein6基因在乳腺癌表达、调控及功能研究[D];第二军医大学;2005年
6 刘亚芳;乳腺癌细胞中ERα和DNA甲基化调控CLDN6表达的作用及其机制[D];吉林大学;2011年
7 李红;人全长survivin基因修饰DCs疫苗的构建及其对乳腺癌作用的实验研究[D];第三军医大学;2005年
8 马小鹏;“超声增敏ADM”治疗乳腺癌的作用及机制[D];华中科技大学;2010年
9 杜红延;骨唾液酸蛋白在乳腺癌骨转移中作用的研究[D];华南理工大学;2005年
10 孙延波;采用抑制性差减杂交技术探讨Heregulin β1诱导乳腺癌细胞差异性表达基因的研究[D];吉林大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 白冰;不同转移潜能的肿瘤细胞中趋化因子差异表达的研究[D];昆明医学院;2004年
2 周媛媛;2型糖尿病与乳腺癌发病的相关性研究[D];广西医科大学;2009年
3 胡梦娜;NGF对乳腺癌细胞MDA-MB-231的作用及其抑制因子筛选[D];华东师范大学;2010年
4 郭君兰;雌激素受体α66介导乳腺癌细胞对紫杉醇耐药的研究[D];浙江大学;2011年
5 耿莹;siRNA干扰LOX基因对乳腺癌细胞MDA-MB-231生物学特性影响的研究[D];广西医科大学;2010年
6 宦大为;乙酰肝素酶和SDF-1/CXCR4生物学轴在乳腺癌中的表达及其临床意义[D];中国医科大学;2010年
7 陈国利;RNAi对乳腺癌乙酰肝素酶表达的体内外实验研究[D];福建医科大学;2011年
8 赵冀安;生育对二甲基苯蒽诱导的雌性SD大鼠乳腺癌发生的影响[D];河北医科大学;2010年
9 孙岩;变构菌素诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡机制的研究[D];大连理工大学;2011年
10 刘丽丽;三七总皂甙逆转乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM耐药的实验研究[D];大连医科大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026