收藏本站
《中国人民解放军第四军医大学》 2003年 博士论文
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

当归多糖的分离纯化与免疫调节作用及其机理研究

杨铁虹  
【摘要】: 目的:多糖作为一类重要的生物反应调节剂,在抗肿瘤、抗衰老和免疫调节等方面具有良好的应用前景。研究证明,当归多糖具有抗辐射、抗肿瘤、促进造血等作用。然而,当归多糖的免疫调节作用及其机理尚有待阐明,本研究采用甘肃岷县当归[Angelica sinensis (Oliv.) Diels],分离纯化当归多糖,对此进行研究。 方法:(1)新鲜当归,清洗、机械捣碎、乙醇回流萃取总挥发油成分;残渣经水煮、醇沉提取当归多糖;经透析、除蛋白、冷冻干燥得到白色粉末状当归总多糖(AP-0);再经常压凝胶过滤柱层析分离得到不同当归多糖组分。(2)采用改良苯酚-硫酸法测定总糖含量,间羟基联苯法测定糖醛酸含量,Serva Blue-G染料结合法测定蛋白质含量,HPLC法测定重均分子量,当归多糖组分经三氟乙酸完全水解后应用纸色谱分析单糖组成,溴化钾压片测定红外光谱;水溶液测定紫外光谱。(3)小鼠sc环磷酰胺或ig氢化可的松复制免疫抑制模型,ip AP-0,连续7天,碳粒廓清法测定单核巨噬细胞吞噬功能,进行外周血白细胞和股骨髓有核细胞计数,测定胸腺、脾脏重量计算脏体系数;用绵羊红细胞免疫小鼠,比色法测定血清溶血素IgG、IgM含量。(4)MTT法测定当归多糖组分AP-3对小鼠脾淋巴细胞、腹腔MΦ增殖反应以及混合淋巴细胞反应的影响;免疫磁珠法分离T、B淋巴细胞,测定AP-3对T、B细胞增殖的影响;AP-3与小鼠脾细胞共同体外培养72h,流式细胞术观察CD4~+细胞比例的变化。(5)体外培养小鼠脾细胞,加入不同浓度的AP-3,酶联免疫法测定上清液中IL-2、IFN-γ含量,定量RT-PCR法测定细胞内IL-2、IFN-γ mRNA的表达变化。 第@罗臣大亏玛士功兔生学(抢支 一 结果:O)所得 3个当归多糖组分 AP八,AP毛和 APS,水溶性强、 表观性状好。()AP刀总糖含量67.9%,糖醛酸含量26.7%,蛋白质含量 0.8%;APl总糖82.3%,糖醛酸18.l%,蛋白质0.5%,重均分子量*3-sl) X旷;AP-2总糖 73.7%,糖醛酸 38.l%,蛋白质 0.3%,重均分子量*-22) X旷;AP上总糖 68.3%,糖醛酸 37.5%,蛋白质 0.7%,重均分子量0-7) XIO\ 当归多糖各组分在单糖组成上没有明显差别,主要出o,Ara 和 Glwt组成;红外光谱呈典型的多糖类吸收光谱,在 770血’有 D-葡萄 糖毗哺环的吸收峰,在840cm-’有a-型的C打平伏键吸收峰,提示糖链 构型是 a-D叩哺型葡萄糖;*)在… 10~100 m沙g剂量范围内,当归多 糖能对抗环磷酚胺或氢化可的松引起的小鼠脾萎缩,能增加正常小鼠脾 脏重量,而对于正常及兔疫抑制小鼠胸腺无明显影响;能显著促进正常 及免疫抑制小鼠碳粒廓清率;能够对抗环磷酚胺或氢化可的松引起的白 细胞数和股骨髓有核细胞数的降低,对正常小鼠白细胞数和股骨髓有核 细胞数无明显影响;不仅对正常小鼠血清溶血素IgG、lgM的生成有较强 的抑制作用,还与环磷酚胺或氢化可的松有一定的协同作用。O)在30~ 300 lgitTll范围内,当归多糖主要组分 AP习能显著促进小鼠脾淋巴细胞。 巨噬细胞、混合淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖反应,而对B细胞增殖则 有一定的抑制作用;显著增加培养的脾细胞中**矿细胞的比例;m当归 多糖组分AP3呈时间、剂量依赖性显著增加培养脾脏淋巴细胞上清液中 IL上的含量及细胞内mRNA的表达,而对IFN-Y,则呈先升高后降低。 结论:*)当归多糖的主要组分AP上是均一性多糖,重均分子量低, 范围窄,具有潜在药用价值。O)当归总多糖能增强正常小鼠非特异性免 疫功能,能对抗环磷酚胺和氢化可的松引起的免疫抑制,而对体液免疫 功能则有较强的抑制作用;O)当归多糖组分AP上能增强巨噬细胞和T 淋巴细胞的功能,而对B细胞的增殖具有抑制作用;表明当归多糖促进 小鼠非特异性免疫和细胞免疫功能是直接激活巨噬细胞、T淋巴细胞,而 4 筹@罗庄丈学埔士村惠生官幢伦支 一 其抑制体液免疫则可能与直接抑制B淋巴细胞有关。O当归多糖升高 h七和IFN1可能与其调节机体免疫功能密切相关。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 王瑾,刘君炎,夏丰年,屈雪菊,李克国,邓子牛;当归多糖体外诱导巨噬细胞的实验研究[J];云南中医中药杂志;1999年04期
2 张林维,赵帜平,沈业寿;当归多糖的分离纯化及其部分性质的研究[J];生物学杂志;1998年03期
3 刘云;当归多糖的提取及含量测定[J];现代中药研究与实践;2003年01期
4 杨铁虹,贾敏,梅其炳;当归多糖组分促进淋巴细胞增殖及对IL-2和IFN-γ的诱生作用[J];中药材;2005年05期
5 夏泉,张平,李绍平,王一涛;当归的药理作用研究进展[J];时珍国医国药;2004年03期
6 杨铁虹,商澎,梅其炳,贾敏;当归多糖硫酸酯对凝血和血小板聚集的作用[J];中草药;2002年11期
7 骆传环,崔玉芳,黄荣清,梁乾德;当归多糖的制备及抑瘤作用[J];科学技术与工程;2003年06期
8 杨兴斌,梅其炳,周四元,腾增辉,王海芳;当归多糖对小鼠腹腔巨噬细胞释放细胞效应分子的诱导作用[J];细胞与分子免疫学杂志;2004年06期
9 杨铁虹,贾敏,梅其炳,商澎;当归多糖对凝血和血小板聚集的影响[J];中药材;2002年05期
10 洪艳!430071湖北,刘煜敏!430071湖北,王红玲!430071湖北,刘君炎!430071湖北,张渝侯!430071湖北,邓子牛!430071湖北,夏雪雁!430071湖北,高丽芬!430071湖北,汤红明!430071湖北;当归多糖对辐射损伤小鼠红细胞免疫粘附功能和IL-2的影响[J];中华放射医学与防护杂志;2001年04期
11 洪艳,刘君炎,王红玲,张渝侯,邓子牛,汤红明,高丽芬;当归多糖对放射损伤小鼠细胞免疫的调节作用[J];武汉大学学报(医学版);2001年01期
12 李贵荣,吕昌银,杨胜圆;当归多糖清除活性氧自由基作用的研究[J];南华大学学报(理工版);2002年03期
13 操刚,赵骥,陈红光,郑敏;当归多糖对小鼠实验性肝损伤的影响[J];咸宁学院学报(医学版);2004年05期
14 杨铁虹,贾敏,商澎,梅其炳,赵德化;当归多糖硫酸酯的合成及其对脾细胞增殖的作用[J];第四军医大学学报;2001年05期
15 洪艳,张渝侯,王红玲,刘君炎,邓子牛;当归多糖对放射损伤小鼠红细胞免疫粘附功能和外周血象的影响[J];现代中西医结合杂志;2001年08期
16 王芳,李东;当归的化学及药理研究进展[J];中国药房;2003年10期
17 石清照,汪晖,徐之良,黄星原,罗劲松;当归多糖对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓细胞周期蛋白D_2表达的影响[J];儿科药学杂志;2005年01期
18 张惠迪 ,李志孝 ,陈耀祖;当归有效成分的研究第11报—当归多糖的分离、性质及生理活性[J];兰州大学学报(自然科学版);1989年04期
19 王亚平,祝彼得;当归多糖对小鼠巨核细胞-血小板发生的影响[J];中药药理与临床;1992年04期
20 单俊杰,王易,王顺春,刘涤,胡之璧;当归多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IFN-γ的影响[J];药学学报;2002年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨铁虹;梅其炳;贾敏;;当归多糖免疫调节作用的研究[A];2003全国中青年药理学英文学术报告会论文摘要汇编[C];2003年
2 吕洁丽;段金廒;严辉;唐于平;宋秉生;;不同加工方法对当归多糖的影响[A];全国第9届天然药物资源学术研讨会论文集[C];2010年
3 吴平安;李芸;李越峰;刘峰林;金辉;杜弢;;熏硫加工对当归多糖含量的影响[A];中华中医药学会中药炮制分会2011年学术年会论文集[C];2011年
4 王君;夏雪雁;彭仁琇;李颖;;当归多糖下调乙醇诱导的大鼠Kupffer细胞CYP2E1的表达[A];中国药理学会第八次全国代表大会暨全国药理学术会议论文摘要汇编[C];2002年
5 雷燕;高倩;李阅山;陈可冀;;黄芪、当归及其组方促血管内皮细胞增殖作用的研究[A];海峡两岸中西医结合学术研讨会论文集[C];2003年
6 周立;贾俊;师健友;叶娉;王敏;王凌;;加味天麻胶囊的薄层色谱鉴别[A];2007年中华中医药学会第八届中药鉴定学术研讨会、2007年中国中西医结合学会中药专业委员会全国中药学术研讨会论文集[C];2007年
7 潘新波;孙宇靖;肖宇奇;萨日娜;杨应文;王亚丽;;甘肃岷县不同生长年限当归药材的红外光谱分析[A];中国化学会第28届学术年会第9分会场摘要集[C];2012年
8 刘树民;张琳;李颖;罗明媚;;黄药子与当归配伍对大鼠肝脏CYP1A2、CYP2E1基因mRNA表达的实验研究[A];中医药优秀论文选(上)[C];2009年
9 杨静;杨志福;陈敏纯;奚苗苗;田云;贾艳艳;文爱东;;红花当归单煎共煎液中有效成分含量的变化[A];2009年中国药学大会暨第九届中国药师周论文集[C];2009年
10 胡芳弟;毕映燕;封士兰;石义凯;王春明;马玉凤;;高效液相色谱法同时测定复方当归栓中5种活性组分的含量[A];西北地区第六届色谱学术报告会甘肃省第十一届色谱年会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨铁虹;当归多糖的分离纯化与免疫调节作用及其机理研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
2 王庆奎;当归多糖对点带石斑鱼非特异性免疫力的影响[D];中国海洋大学;2012年
3 王惠珍;当归产量和品质形成对海拔的响应及生理机制[D];甘肃农业大学;2011年
4 杨长春;黄芪、当归防治血管再狭窄的作用机制[D];河北医科大学;2002年
5 姚成;当归和猫爪草化学成分的综合分析方法研究[D];南京工业大学;2003年
6 邱黛玉;当归抽薹的调控效应及其机理研究[D];甘肃农业大学;2011年
7 王妍;雷公藤与甲氨蝶呤、黄芪与当归联用治疗RA机制的生物信息学分析[D];中国中医科学院;2012年
8 王勤;特异性免疫吸附柱及CRRT清除血浆TNF-α的实验和临床研究[D];第三军医大学;2002年
9 曹蔚;当归多糖的结构与抗肿瘤作用及其机制研究[D];第四军医大学;2006年
10 李延光;阻塞性黄疸细胞免疫功能调节的研究[D];华中科技大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 曾芳;当归多糖参与正常机体铁代谢的分子机制研究[D];华中科技大学;2010年
2 祁晶;当归多糖的结构分析及其对大鼠复发性阿弗他溃疡模型影响的研究[D];兰州大学;2011年
3 肖希斌;当归多糖对慢性粒细胞白血病细胞诱导生成树突状细胞的影响[D];江西医学院;2003年
4 王艳琴;当归多糖对肺纤维化大鼠肺功能、细胞外基质及病理形态学的影响[D];兰州大学;2010年
5 夏黎明;利用HPLC和HPLC/MS分析比较当归有效成分的研究[D];南京工业大学;2003年
6 白洁;当归分散片的研制及质量评价[D];天津大学;2007年
7 冯懿挺;药用植物化学成分及生物活性研究[D];浙江大学;2005年
8 上官海娟;当归对心肌梗死后心肌细胞凋亡及心室重构的影响[D];武汉大学;2005年
9 阮健;当归油及相关产品的质量控制方法与标准研究[D];山东大学;2006年
10 郑洁;归芍头痛颗粒药学及稳定性研究[D];北京中医药大学;2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 高赛;“乡乡有网站”[N];光明日报;2007年
2 江西 副研究员 杨宁;贫血的中医治疗[N];家庭医生报;2005年
3 ;韩发现当归萃取物可治白血病[N];中国高新技术产业导报;2002年
4 山东中医药大学附属医院 丁元庆;当归“主治咳逆上气”临床治验[N];中国中医药报;2010年
5 记者 刘娜;昆明胜利堂当归位于建堂初衷[N];云南政协报;2011年
6 庞武;岷县特色产业链惠及百姓[N];甘肃经济日报;2006年
7 蒋明;我学者发现当归治疗脑缺血损伤机制[N];科技日报;2004年
8 李典云 李健;为坐骨神经痛择佳酒[N];上海中医药报;2008年
9 记者 晁君杰靳忠恕 通讯员 李发胜 王亚红;当归产业现代化研究与产业化开发高峰论坛在岷县召开[N];定西日报;2008年
10 本报记者 朱安明 洪锋;贫困县“制造”为何独占市场鳌头[N];中国财经报;2004年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978