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《中国人民解放军第四军医大学》 2003年
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HCPT、PYM单独及联合应用对人舌癌Tca8113细胞活性及端粒酶的影响

陈鹏  
【摘要】: 舌癌(carcinoma of the tongue)的发病率约为0.6/10万,在口腔癌中居首位。舌癌较多发生淋巴结转移,高达60%-80%,晚期可发生远处转移,一般多采用综合治疗,而化疗在其中有着不可替代的作用。羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)是由我国特有的珙桐科植物喜树的根、皮和果实中提取的生物碱,该碱可直接破坏DNA,并对DNA的合成有抑制作用,主要作用与S期细胞,并对G_2/M边界有延缓作用,为细胞周期特异性药物。 本研究应用MTT法,软琼脂克隆形成试验,流式细胞术,形态学观察,端粒重复扩增反应法等探讨和研究了HCPT和平阳霉素(Pingyangmycin,PYM)单独和联合用药对舌癌Tca8113细胞的生长及端粒酶活性的抑制作用。主要实验结果如下: 1.采用MTT法研究羟基喜树碱、平阳霉素、顺柏(Cisplatin,DDP)三种药单独和两两联合应用对Tca8113细胞的生长抑制作用,结果发现HCPT对Tca8113细胞在体外有很好的生长抑制作用且和平阳霉素联合应用效果最佳。两者单独及联合应用96h时,其最佳IC_(30)分别为PYM 416ng/ml、HCPT109ng/ml、PYM+HCPT(100+35ng/ml),RAA值分别为2、12和(60+39)。 2.用HCPT和PYM单独及联合应用的IC_(30)作用于细胞,可见:(1)细胞生长速度减慢,群体倍增时间延长(对照组28.4h、PYM组35.1h、HCPT组42.1h、PYM+HCPT组52.6h);(2)克隆形成率降低(对照组31.7%、PYM组15.3%、HCPT组11.6%、PYM+HCPT组4.0%);(3)HCPT组及联合应用组细胞周期发生明显变化,S期、G_2期细胞比例明显增加;(4)细胞形态及超微结构出现明显变化,巨核和多核细胞明显增加,空泡样变增多,细胞退行性变;(5)细胞端粒酶活性降低(对照组1.87±0.12、PYM组0.77±0.08、 第四军医大学硕士学位论文 HCPT组0.8 3土0.04、PYM+HCPT组0.54土0.07)。 3.应用HCPT的IC;。浓度作用于细胞24h、48h、72h、96h,检测细胞端粒 酶活性,发现从48h起端粒酶活性开始明显下降,且有一定的浓度、剂量 依赖性。 上述结果表明:HCPT在体外对舌癌TCC8113细胞林有8阶的抗癌活性, 且以和NM联用效果最佳。HCPT和NM均可降低细胞的端粒酶活性,这可 能是其发挥抗肿瘤作用的靶点之一。综上所述,HCPT可能在II$床上治疗舌 癌会有良好的前景;对于端粒酶的进一步研究有助于进一步了解化疗药的 抗癌机理,开发新的以抑制肿瘤端粒酶活性为靶的化疗药物及发展化疗敏 感性检测的新方法。
【学位授予单位】:中国人民解放军第四军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R739.8

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【参考文献】
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