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《第四军医大学》 2003年
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VAC对创面血管生成、神经肽分泌和修复细胞凋亡基因表达的影响

汤苏阳  
【摘要】:慢性难愈合性创面的治疗一直是困扰医学界的难题之一,而且其发生率逐年增高,迫切需要新的治疗手段和方法,提高其的治愈率。VAC的提出已有十年的历史,而应用VAC治疗慢性创面的历史仅几年。1997年,我科较早地在国内提出和推广VAC应用于慢性难愈创面,而且为之做了大量的临床和基础研究。本研究旨在进一步深入研究VAC对慢性创面愈合的作用机理,深入研究慢性创面的愈合过程及影响因素,为临床应用VAC提供科学的依据 首先,通过建立失神经支配的大鼠背部皮肤切割伤创面模型,利用透射电镜,免疫组织化学、免疫荧光、原位杂交技术、Western Blot和Rt-PCR等技术,从形态学上、蛋白质水平上、mRNA水平上、凋亡相关基因表达水平上对比研究大鼠背部有或无神经支配的创面和施加VAC治疗的其创面愈合过程中(1)血管生成的变化,包括血管内皮细胞形态、分泌、增殖的变化、VEGF、CD34和VEGFmRNA的表达变化;(2)对周围神经末梢分泌的神经肽类物质CGRP、P物质和NGF/NGFmRNA表达的影响;(3)对修复细胞凋亡和增殖状态的影响,包括对P53,Bcl-2和PCNA表达的影响。研究结果表明:(1)大鼠失神经支配创面较有神经支配创面,血管生成能力减低;施加VAC于失神经支配创面和正常神经支配创面后,创面血管生成能力明显增强,差异显著(P 第四军医大学博士学位论文 0.05)。(2)大鼠失神经支配创面较有神经支配创面,神经肤类物质分泌明 显减少,施加VAC治疗失神经支配创面和正常神经支配创面较未施加VAC治 疗的同类创面,神经肤类物质分泌明显增加,差异显著(P0.05)。(3)大鼠 失神经支配创面较有神经支配创面,修复细胞增殖活性降低,凋亡活动增加。 施加VAC治疗的失神经支配创面和正常神经支配创面较未施加VAC治疗的同 类创面,修复细胞增殖活性增加,凋亡活动降低,差异显著(P0.05)o 其次,矛l」用组织化学、免疫组织化学和免疚荧光的染色方法,通过临床慢 性难愈合性创面的病例,观察施加、恢C治疗前后,创缘组织中修复细胞的凋 亡相关基因蛋白的表达和修复细胞增殖活性变化。结果表明VAC施加于临床 慢性难愈合性创面后,抑凋亡相关基因蛋白突变型P53,Bcl一2表达增强,促 凋亡相关基因蛋白Fas,Bax表达减弱,修复细胞增殖活性AgNoRs明显增加。 动物实验与临床实验研究的结果在一定范畴内揭示了慢性失神经支配创 面难以愈合机理以及vAC治疗后促进创面愈合的机制,证实VAC具有使慢性难 愈合性创面由被动愈合向主动愈合过程转化的作用,为临床使用和推广封闭负 压引流技术提供了科学的实验依据。
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R641

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