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《第四军医大学》 2004年
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体内外HCMV感染对宿主细胞表型的影响及其机制

杨国嵘  
【摘要】:霍奇金淋巴瘤(Hodgkin’ slymphoma,HL)是一类发生在淋巴系统的恶性肿瘤,发生率约占所有原发肿瘤的1%,发达国家主要发生于青壮年,而在发展中国家主要发生于儿童。在最新WHO疾病分类中,根据其组织学特征分为结节性淋巴细胞为主型(nodular lymphocyte predominant HL,NLPHL)和经典型(classical HL,CHL)2种类型。CHL的组织学特征是,在复杂的炎症细胞背景中出现特征性的、有诊断价值的多核巨细胞——RS细胞。RS细胞以及形态与RS细胞相似的单个核细胞(霍奇金细胞),合称为HRS细胞。HRS细胞和各种变异体细胞是CHL的肿瘤细胞。目前研究认为,在大多数病例中,CHL的肿瘤细胞约98%起源于生发中心的B细胞,约2%来源于T细胞。但有关HRS细胞表型的研究表明,HRS细胞与其起源的生发中心B细胞在表型上有很大不同。那么,是何种机制导致了这种表型改变?该问题的解决在HRS细胞的形态发生学、甚至HL发生学中有重要意义。已知HL的发生与多种病毒的感染有关,其中又以EB病毒的研究最多,但不能用EB病毒解释所有病例,因为约有50%的病例中并不能找到EB病毒感染的证据。二十世纪九十年代以来,黄高昇教授等人用多种方法在EB病毒阴性的HL病例中发现存在HCMV的证据,从而为HL的病因学和发生学的研究开辟了新的途径。 人巨细胞病毒(HCMV)为β疱疹病毒亚家族成员,是一种分布广泛的人类病原体,在健康的儿童和成人通常引起无症状性感染;在某些接受了HCMV污染的血制品人群可引起单核细胞增多症;在胎儿和免疫抑制个体可引起严重的疾病;并与宫颈癌、前列腺癌、结肠癌、卡波西肉瘤、霍奇金淋巴瘤等多种恶性肿瘤的发生有关。HCMV可感染多种细胞,由于HCMV有嗜涎腺性,因此涎腺导管上皮细胞最常受感染。HCMV感染细胞后,不仅可引起宿主细胞发生形态学改变,而且可导致细胞功能的改变。细胞功能的改变又包括与细胞受体相互作用引发的反应、调节宿主细胞的转录和蛋白质合成、影响宿主细胞的增殖、细胞膜的变化、诱导细胞凋亡等。但 第四军医大学博士学位论文 有关HCMV对细胞免疫表型影响的研究尚未见报道。 在该课题中,我们首先详尽地研究了HCMV感染对涎腺导管上皮细胞 的影响,然后以此结果为疾病对照初步探讨了CHL病例中HRS细胞表型改 变及其与HCMV感染的关系。所有这些结果将为深入研究HCMV在CHL HRS 细胞免疫表型改变中的作用打下基础。研究内容和结果简述如下: 1、以腮腺巨细胞包涵体病(PCID)为疾病模型初步研究了HCMV 感染对腮腺导管上皮细胞的表型所产生的影响。 选取11例腮腺巨细胞包涵体病尸检标本,HE染色后观察发现部分腮 腺导管中,柱状上皮细胞细胞体积增大、出现周围有晕包绕的嗜碱性核内 包涵体等形态学改变。免疫组织化学法显示绝大多数包涵体巨细胞HCMV D陇9/CCHZ抗原阳性,而且阳性颗粒主要分布于核内包涵体,提示包涵 体巨细胞为H咪V感染细胞。进一步研究表明该包涵体巨细胞的免疫学表 型发生改变,作为上皮性标志物的上皮细胞膜抗原(EMA)、广谱角蛋白(Pan CK)和角蛋白8(c KS)的表达缺失,而角蛋白18(c K18)的表达转为强 阳性。 2、为了证实从尸检标本中所得结果,建立了涎腺导管上皮细胞体外 感染HC剧模型。 体外培养人涎腺导管上皮细胞(HSG),该细胞呈上皮样贴壁生长,用 免疫细胞化学初步鉴定显示CKS和CK18抗原的表达呈阳性。在人胚肺成 纤维细胞(HELF)中繁殖HCMV,并测定其TCID,,。已知滴度的HCMV感染 HSG后,用多种方法检测培养细胞中的HCMV。倒置显微镜下观察发现,感 染后12小时即可见细胞病变,感染后60小时细胞病变已极为明显,72 小时绝大部分细胞出现病变,而对照组保持着良好的生长状态。透射电镜 检铡发现在细胞核、内质网、细胞质中出现数量不等的3种不同形态的疤 疹病毒样颗粒。RT一PCR及ne st一RT一pCR法在宿主细胞中可检测到HCMV IEI/IEZ基因的转录。免疫细胞化学方法在宿主细胞中可检测到HCMV IEI/IEZ蛋白的表达。 3、探讨了HCMV体内外感染对涎腺导管上皮细胞生长状况的影响。 用免疫组织化学法研究尸检腮腺巨细胞包涵体病组织中PCNA和氏 的表达时发现,大部分包涵体巨细胞PCNA呈弱阳性,而包涵体巨细胞氏 均阴性。用MTT法研究HCMV对体外培养涎腺导管上皮细胞增殖活性的影 第四军医大学博士学位论文 响时发现,HCMV对体外培养的HSG细胞增殖具有抑制作用,且该抑制作 用具有剂量依赖性和时间依赖性。进一步用流式细胞仪检测HCMV对体外 培养HSG细胞周期的影响时发现,HCMV的抑制作用主要发生在细胞周期 的Gl/S关卡,使HSG阻滞于Gl期。用Western blotting检测HCMV感染 细胞中周期素Dl的表达时发现,感染病毒的宿主细胞周期素Dl表达下调。 用免疫细胞化学法和Western blotting检测HCMV感染细胞中PCNA的表 达后发现,HCMV感染细胞中PCNA的表达下调。 4、研究了体外HCMV感染可否引起涎腺导管上皮细胞免疫表型的改变 并初步探讨了组织蛋白酶D在涎腺导管上皮细胞免疫表型改变中的作用。 用western blotting法研究HCMv对体外培养的涎
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R363

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 闫庆国,黄高昇,王哲,朱德生;用显微切割技术和催化信号扩增法检测何杰金病瘤细胞(H/RS)中的人巨细胞病毒[J];病毒学报;2000年04期
2 李磊,徐进平,叶林柏;人巨细胞病毒立即早期基因功能的研究进展[J];中国病毒学;1998年01期
3 黄从新,王德胜,杨波,尹丽娅,王晶,江洪,李庚山;人巨细胞病毒对培养人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响[J];中国循环杂志;1999年06期
4 吕庆杰,闻德亮,李冠群,王伟;小儿巨细胞包涵体病组织中病毒抗原检测及其临床意义的研究[J];中华儿科杂志;1999年08期
5 王志新,闻良珍,谢杏美;人巨细胞病毒活动性感染对绒毛细胞增殖活性的影响[J];中华妇产科杂志;2002年08期
6 王哲,黄高昇,阎庆国,陈协群,张晓晖;在霍奇金病患者淋巴结中检测巨细胞病毒基因[J];中华血液学杂志;2000年05期
7 潘思年,何政贤,陈奋华,王清文,邹小兵,黄略峰,杨默;人巨细胞病毒抑制人巨核系祖细胞增殖的体外研究[J];中华血液学杂志;2001年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵月萍,马明英,王建军,谢东,任军;一起爆发型柯萨奇病毒性脑炎的病原分离与鉴定[J];安徽预防医学杂志;2001年06期
2 赵月萍,周淑洁,唐继海,罗光焘,潘福龙,夏志才,覃德芹;腮腺炎病毒抗体检测在腮腺炎并发脑膜脑炎诊断中的应用[J];安徽预防医学杂志;2003年06期
3 李国兰;郭玲;李治悦;卜戈;于昌军;张威;杨帆;李建国;王伟;;RT-PCR法在快速检测肠道病毒71型(EV71)核酸中应用[J];安徽医学;2008年04期
4 刘辉;潘家华;;EV71感染临床特点及治疗进展[J];安徽医学;2008年04期
5 江杨帆;刁慧敏;周秀红;何素冰;吴纳新;盛晓蓉;;射岑含片体外抗腺病毒3型作用的实验研究[J];安徽医学;2010年09期
6 顾建华;;百贝宁治疗婴幼儿轮状病毒肠炎[J];安徽医药;2007年01期
7 张宝华;;重组人干扰素a2b治疗流行性腮腺炎临床观察[J];安徽医药;2008年12期
8 夏仁飞;周迎春;黄海军;;番石榴叶水煎液及其总黄酮抗轮状病毒作用研究[J];安徽中医学院学报;2009年03期
9 陈晓琦,曹涛,王继麟,徐葛林;单克隆抗体在呼吸道合胞病毒感染诊断和防治中的应用[J];氨基酸和生物资源;2004年01期
10 王勇,陈淑霞,薛颖,董杰,金奇,侯云德;中国历年H_3N_2亚型人流行性感冒病毒血凝素基因的序列测定及分析[J];病毒学报;2002年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 韩金乐;贾继宗;李川;杨亮;何德磊;李娟;叶祥忠;李益民;;肠道病毒71抗原ELISA定量检测方法构建及其应用[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
2 方美玉;任瑞文;刘建伟;;我国甲病毒的研究进展及其预防[A];新发和再发传染病防治热点研讨会论文集[C];2009年
3 戚鹏;韩金祥;鲁艳芹;王传玺;栾中华;卜范峰;;病毒编码的miRNAs:基因表达新的调控因子[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年
4 刘悦越;刘艳;谷金莲;于洋;国泰;;血清抗轮状病毒IgA诊断试剂的研制[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
5 周伯平;刘威龙;谢靖婧;陈心春;徐六妹;谭艳;刘映霞;杨桂林;;肠道病毒71型重组VP1蛋白的表达和EV71型手足口病血清学诊断方法的建立[A];全国第2届中西医结合传染病学术会议暨国家中医药管理局第1届传染病协作组会议论文汇编[C];2008年
6 刘兆梅;温瑞兴;马洪涛;;中药青龙爪抗HIV-1病毒的实验研究[A];中华中医药学会防治艾滋病学术研讨会暨2006年年会论文集[C];2006年
7 袁斌;任现志;孙轶秋;邹建东;赵长江;刘光陵;陈吉庆;赵德育;徐玲;;清肺口服液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎166例临床研究[A];第25届全国中医儿科学术研讨会暨中医药高等教育儿科教学研究会会议学术论文集[C];2008年
8 傅燕;高红;刘健毅;;宁波地区婴幼儿轮状病毒VP7序列分析[A];2007年浙江省医学病毒学、医学微生物与免疫学学术年会论文汇编[C];2007年
9 张丽荣;;珠海市多起连续发生的乙型流感疫情的病毒HA1基因分析[A];新发传染病研究热点研讨会论文集[C];2012年
10 赵连红;;手足口病流行病学及防治研究进展[A];第十四届全国感染药学学术会议论文汇编[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 姜淑贞;玉米赤霉烯酮对断奶仔猪的毒性初探及改性蒙脱石的脱毒效应研究[D];山东农业大学;2010年
2 王蕾;单纯疱疹病毒Ⅰ型VP26蛋白在病毒感染过程中的分子生物学功能分析[D];北京协和医学院;2008年
3 时景伟;麻疹疫苗减毒机制及疫苗接种后我国麻疹流行病学特点的研究[D];吉林大学;2011年
4 孙晓芳;三七总皂苷防治博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的实验研究[D];北京中医药大学;2011年
5 茅凌翔;肠道病毒71型分子流行病学调查及miRNA抑制肠道病毒71型体外复制的研究[D];江苏大学;2011年
6 徐娟;肠道病毒EV71 VP1基因的优化和免疫原性的研究[D];南京医科大学;2011年
7 卢桂兰;北京地区人偏肺病毒全基因组序列、血清流行率分析及B细胞表位研究[D];北京协和医学院;2009年
8 管莹;与HSV-1 UL31相互作用的宿主蛋白TMEM140生物学功能研究[D];北京协和医学院;2011年
9 郭磊;HSV1 ICP22蛋白转录调控机制研究及其与病毒蛋白VP16、ICP0对病毒基因转录的共调控作用分析[D];北京协和医学院;2011年
10 陈慧诚;肠道病毒71型灭活疫苗(人二倍体细胞)免疫后攻毒及未免疫攻毒恒河猴婴猴丘脑组织的比较蛋白质组学研究[D];北京协和医学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郑毅;利用酵母双杂交技术研究流感病毒NS2蛋白与宿主蛋白的相互作用[D];华中农业大学;2010年
2 卢士强;甲型H1N1流感病毒NS1蛋白在大肠杆菌中的表达、抗体制备及在血清学检测中的应用[D];南京医科大学;2009年
3 张绍丽;河南省2008年手足口病病原体(EV71)分离株全基因组序列[D];郑州大学;2010年
4 于贺娟;肠道病毒71型荧光RT-PCR检测方法的建立及评价[D];郑州大学;2010年
5 殷坚;秦香颗粒对人轮状病毒致感染乳鼠血清IFN-γ、IL-2的影响研究[D];湖南中医药大学;2010年
6 雷红娟;肠道病毒71型H6株在Vero细胞上的传代适应[D];河南师范大学;2010年
7 费永亮;新疆地区人群乙型肝炎病毒基因型的初步研究[D];新疆农业大学;2010年
8 岳锋;猪瘟病毒感染靶细胞的配体表位研究[D];河南科技学院;2010年
9 郭延锋;CSISV人工感染SPF雏鸡和商品肉仔鸡后免疫器官的细胞凋亡[D];河南科技学院;2010年
10 韩绪军;HCV核酸检测方法建立及药物靶点变异分析[D];昆明理工大学;2009年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 王哲,黄高升,陈协群;霍奇金病淋巴组织中巨细胞病毒的检测[J];第四军医大学学报;1997年02期
2 王志新,闻良珍,曾万江,钱小虎,凌霞珍;人巨细胞病毒宫内感染对胎婴儿生长发育的影响[J];中华妇产科杂志;1996年07期
3 姜宏,闻良珍,凌霞珍,陈素华;检测人巨细胞病毒晚期mRNA在诊断子宫内活动性感染的价值[J];中华妇产科杂志;1999年06期
4 熊伟,何政贤,王清文,邹小兵,周元平,林桂珍,黄略峰;巨细胞病毒对人骨髓粒-巨噬系祖细胞生长的影响[J];中华血液学杂志;1999年03期
5 史金阳,金红,高红,刘兰青,吕绳敏,陈淑荣;巨细胞病毒即刻早期基因mRNA检测方法的建立[J];中华医学检验杂志;1998年03期
6 王世俊;董永绥;;小儿巨细胞病毒相关性急性下呼吸道感染[J];中国实用儿科杂志;1994年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 乐敏,刘莉,王荷英,何介薇;电离辐射对人皮肤成纤维细胞中超氧阴离子自由基浓度和超氧化物歧化酶与组织蛋白酶D活力的影响[J];辐射研究与辐射工艺学报;1995年04期
2 李霞,苏庆光;乳腺癌预后标志物──组织蛋白酶D[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2000年04期
3 何平,石景森,王作仁,王林;组织蛋白酶D在胆管癌的表达及其与侵袭和转移的关系[J];西安医科大学学报;2001年04期
4 李日乐,田明铭,汤如勇;乳腺癌血管生成及组织蛋白酶D表达与转移的关系[J];临床与实验病理学杂志;1998年04期
5 顾晓,眭元庚,徐正铨,尤国才,吴宏飞;组织蛋白酶D在膀胱移行细胞癌中的免疫组化研究[J];临床泌尿外科杂志;2000年02期
6 牛昀,范宇,吕阿娟,刘铁菊,傅西林;组织蛋白酶D和雌激素受体联合检测对腋淋巴结转移乳腺癌病人预后的意义[J];诊断学理论与实践;2002年03期
7 谢宗佑,孙保存,郝希山;大肠癌组织蛋白酶D表达与临床病理因素和预后的关系[J];天津医科大学学报;2004年01期
8 顾晓,眭元庚,徐正铨,吴宏飞,尤国才;组织蛋白酶D及碱性成纤维细胞生长因子在33例膀胱移行细胞癌中的表达及相关性研究[J];南京医科大学学报;2000年03期
9 贾志宇;细胞凋亡在Sjgren综合征中的作用[J];国外医学.口腔医学分册;2003年02期
10 甘燕;日本血吸虫天冬氨酸组织蛋白酶D诱导的细胞免疫反应[J];国外医学.寄生虫病分册;2004年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张建华;;MRI在涎腺肿物诊断中的价值[A];中华医学会第十八次全国放射学学术会议论文汇编[C];2011年
2 徐美林;;霍奇金淋巴瘤伴胸腺囊肿一例[A];第七次全国中西医结合呼吸病学术交流大会论文汇编(二)[C];2004年
3 胡宇华;李江;;涎腺透明细胞癌10例临床病理分析[A];2004年上海市口腔医学学术年会论文汇编[C];2004年
4 欧丹;张云燕;何霞云;顾雅佳;胡超苏;应红梅;朱国培;吴永如;;磁共振影像对鼻咽癌放疗前后涎腺功能的评价研究[A];第六届全国鼻咽癌学术大会论文汇编[C];2010年
5 张运涛;勇威本;朱军;郑文;王小沛;谢彦;林宁晶;;霍奇金淋巴瘤前瞻性对照治疗研究[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
6 史莉玲;杜联芳;苏一巾;;酸性刺激前后涎腺动脉血流参数变化对干燥综合征的诊断价值[A];中华医学会超声医学新进展学术会议论文汇编[C];2004年
7 毛峥嵘;Andreas Rosenwald;章锁江;周韧;Hans Konrad Mueller-Hermelink;;霍奇金亚型Richter's综合征:IGVH基因克隆重排及突变分析[A];中华医学会病理学分会2007年学术年会暨第九届全国病理大会论文汇编[C];2007年
8 宁晓明;赵玉兰;冯占军;;组织蛋白酶D(Cath-D)与结肠癌的关系[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
9 姜广水;刘贤锡;卢志山;杨小青;卞继峰;胡海燕;耿昭;;含CpG基元的防龋DNA疫苗构建及经小鼠涎腺接种实验[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2003年学术交流会论文摘要集[C];2003年
10 谢双锋;尹松梅;聂大年;马丽萍;王秀菊;;霍奇金淋巴瘤引起嗜酸粒细胞类白血病反应一例[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 云也退;“闲人”万岁[N];东方航空报;2008年
2 卢巧音(书评人);在科学道路上[N];中国图书商报;2005年
3 记者 嵇哲;吕祖善会见英国约克恒勃大区发展署主席[N];浙江日报;2009年
4 李茜;口干舌燥多因所致[N];保健时报;2005年
5 本报记者 曲赟;ICAEW助力中国会计国际化[N];财会信报;2008年
6 河北 副主任医师 杨凯艳;孩子为啥经常流口水[N];家庭医生报;2009年
7 王素丹;无疹性的奇痒不容忽视[N];卫生与生活报;2003年
8 闫洁;舍伍德森林保卫战:救罗宾汉的“家”[N];新华每日电讯;2008年
9 王振岭;涎腺多形性腺瘤基因研究有新发现[N];中国医药报;2002年
10 本版编辑;复杂的头颈部肿瘤[N];中国医药报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨国嵘;体内外HCMV感染对宿主细胞表型的影响及其机制[D];第四军医大学;2004年
2 郭澍;蛋白激酶CK_2-β在涎腺腺样囊性癌中的变化及其与肺转移的关系[D];中国医科大学;2003年
3 刘宏;脂氧合酶抑制剂NDGA抑制腺样囊性癌生长的实验研究[D];第二军医大学;2007年
4 王旭;涎腺多形性腺瘤基因治疗的实验研究[D];河北医科大学;2005年
5 闫炳智;野生型p53基因治疗涎腺腺样囊性癌的实验研究[D];河北医科大学;2005年
6 潘同斌;低氧、运动对大鼠骨骼肌蛋白代谢及肌球蛋白重链(MHC)亚型基因表达的影响[D];北京体育大学;2004年
7 郑书深;HSV-tk与IL-2基因对涎腺多形性腺瘤细胞杀伤作用的实验研究[D];河北医科大学;2005年
8 刘凤英;难治性癫痫患者脑溶酶体、线粒体及突触功能相关基因异常表达[D];重庆医科大学;2007年
9 石宏;阻抑蛋白多糖合成对涎腺腺样囊性癌生长的影响[D];河北医科大学;2008年
10 冯骥良;组织蛋白酶D在苦参碱诱导JM细胞Type Ⅱ Cell Death中的作用及其在滤泡型淋巴瘤和淋巴滤泡过度增生中的表达研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
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1 王若峥;组织蛋白酶D、c-erbB-2基因、雌激素受体、孕激素受体表达与乳腺癌预后相关性的研究[D];新疆医科大学;2003年
2 伊大海;神经生长因子及其受体在涎腺肿瘤中的表达及意义研究[D];吉林大学;2003年
3 李春智;影响涎腺粘液表皮样癌预后的相关临床病理因素研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
4 解寒冰;组织蛋白酶D与碱性成纤维细胞生长因子在人肝细胞癌组织的表达及其意义[D];郑州大学;2003年
5 李洪梅;霍奇金淋巴瘤的免疫表型特征与抗凋亡基因Bcl-2表达的临床病理研究[D];吉林大学;2004年
6 史莉玲;超声检查涎腺对干燥综合征的诊断价值研究[D];山西医科大学;2004年
7 胡济安;MMP-2和E-CD在涎腺粘液表皮样癌的表达与局部浸润、转移和预后相关研究[D];浙江大学;2001年
8 陈玮;TNF-α联合IL-2诱导涎腺多形性腺瘤细胞调亡的实验研究[D];河北医科大学;2003年
9 贾志宇;Sj?gren综合征涎腺组织中芳香化酶与凋亡相关基因Fas及其配体FasL的表达及相互关系[D];河北医科大学;2003年
10 徐跃华;胃癌组织中尿激酶受体、组织蛋白酶D和nm23的表达及其相关性研究[D];苏州大学;2002年
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