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《第四军医大学》 2004年
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生长因子及其不同缓释系统在骨组织工程中的应用

侯锐  
【摘要】:骨缺损畸形是骨科和颌面外科临床常见病症,采用组织工程方法构建复合种子细胞、支架材料和生长因子的生物活性人工骨被认为是未来进行骨缺损修复和骨再造最有效的方法之一。本实验主要在如何保持并尽可能延长生长因子的生物活性方面作了一些研究:首先对重组人骨形成蛋白—2(rhBMP-2)和重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和分化的效应进行研究,以寻找理想的应用方式而获得大量的种子细胞。其次制备聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微球作为rhBMP-2的载体,观察其对骨髓间充质干细胞的生物学效应,明确其对rhBMP-2的缓释效果。最后构建以胶原为载体缓释rhBMP-2复合BMSCs及珊瑚的组织工程骨,观察其异位成骨及修复动物颅骨极限缺损的能力,以证实胶原的缓释效果以及胶原和BMSCs对促进成骨的重要意义。 第一部分 rhBMP-2及rhbFGF对骨髓间充质干细胞生物学效应的实验研究 实验一 rhBMP-2及rhbFGF对兔骨髓间充质干细胞增殖效应的实验研究 [摘要] 目的:检测rhBMP-2和rhbFGF单独、联合及序贯作用对兔骨髓 第四军医大学博士学位论文 间充质干细胞(BMSCS)增殖的效应。方法:采用MTT法检测单独、联 合及序贯施加rhBMP一2和rhbFGF后,BMSCs在第1,3,5,7及10天 增殖的状况,并进行统计学分析。结果:thBMP一2和rhbFGF均能显著地 促进BMSCs的增殖,并呈剂量依赖性。两种生长因子联合作用的效应高 于单独或序贯作用的效应。结论:不同生长因子的不同应用方式对BMSCs 增殖的效应不同。 实验二rhBMP一2及rhbFGF对兔骨髓间充质干细胞分化效应的实验 研究 {摘要1目的:检测rhBMP一2和thbFGF单独、联合及序贯作用对兔 BMSCS分化的效应。方法:采用碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒及考马 斯亮兰测定法检测单独、联合及序贯施加rhBMP一2和rhbFGF后,BMSCs 在第2、5、7及10天时的ALP活性及蛋白质含量水平以反映对细胞分化 作用的影响,并进行统计学分析。结果::hBMP一2能在较长时间内明显促 进细胞ALP活性及蛋白质含量,而:hbFGF则起到抑制作用,且均呈剂量 依赖性。rhBMP一2单独作用与两种生长因子联合作用的效应相近,且均高 于thbFGF单独作用或两种因子序贯作用的效应。结论:不同生长因子的 不同应用方式对BMSCS分化的效应不同。 第二部分rhBMP一2聚氰基丙烯酸正丁酷纳米微球缓释系统对 骨髓间充质干细胞的生物学效应的实验研究 实验一rbBMP一2聚氰基丙烯酸正丁酷纳米微球的制备及性质鉴定 【摘要1目的:制备rhBMP一2聚氰基丙烯酸正丁醋纳米微球缓释系统,并 对其性质进行鉴定。方法:根据正交设计法优化制备工艺,采用改良的乳 化溶液聚合法制得rhBMP一2纳米微球。采用多种方法对该纳米微球的形 态学、包裹率、异位诱骨活性、释药性、稳定性和再分散性进行检测。结 果:该纳米微球形态规整,粒径在纳米级,对thBMP一2的包裹率约为 第四军医大学博士学位论文 69.7%,具有异位诱骨活性,在体外对rhBMP一2具有缓释效果,稳定性和 再分散性好。结论:该纳米微球性质优良,可作为:hBMP一2的缓释载体。 实验二rhBMP一2聚氰基丙烯酸正丁酷纳米微球缓释系统对骨髓间充质 干细胞增殖及分化作用的实验研究 l摘要】目的:检测thBMP一2聚氰基丙烯酸正丁酷纳米微球缓释系统对兔 BMSCS增殖和分化作用的效应。方法:在rhBMP一2纳米微球作用于BMSCS 后,采用MTT法和A叨ORs染色法检测细胞的增殖状况,采用ALP试 剂盒检测细胞的ALP活性以反映其分化状况,采用透射电镜观察细胞的 超微结构,并与单纯:hBMP一2的作用进行比较。结果:该纳米微球缓释 系统能显著促进BMSCS的增殖及分化,并呈剂量依赖性。其效应高于单 纯施加thBMP一2的效应。该纳米微球作用细胞后,超微结构显示细胞处 于旺盛的分裂增殖状态。结论::hBMP一2纳米微球缓释系统促进BMSCs 增殖分化的作用明显优于单纯thBMP一2的作用。 实验三rhBMP一2聚氰基丙烯酸正丁醋纳米微球缓释系统对骨髓间充质 干细胞成骨标志蛋白的实验研究 I摘要1目的:探讨thBMP一2聚氰基丙烯酸正丁酷纳米微球缓释系统作用 BMSCS后对成骨标志蛋白及其mRNA水平表达的影响。方法:1.采用免 疫细胞化学染色及图像分析方法,观察thBMP一2纳米微球作用后对细胞 中骨钙素、骨涎蛋白、骨桥素及I型胶原表达的影响;2.采用反转录PCR 方法,观察rhBMP一2纳米微球作用后对细胞中骨钙素、碱性磷酸酶及I 型胶原mRNA水平表达的影响,并与单纯thBMP一2作用细胞后的结果进 行比较。结果:rhBMP一2纳米微球作用后细胞中骨钙素、骨涎蛋白、骨桥 素及I型胶原的表达以及骨钙素、碱性磷酸酶及1型胶原mRNA水平的 表达均明显强于单纯thBMP一2作用后的效果。结论:rhBMP一2纳米微球 缓释系统促进BMSCS向成骨方向分化的作用强于单纯thBMP一2的作用。 第四军医大学博士学位论文 实验四rhBMP一2聚氰基丙烯酸正丁酷纳米微球缓释系统对成骨细胞钙 结节的影响 l摘要l目的:观察rhBMP一2聚氰基丙烯酸正丁醋纳米微球缓释系统对 成骨细胞钙结节
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R318.0

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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2 高士雅;徐敏;陈志鹏;徐郁蕊;肖衍宇;平其能;;聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒在药物传输系统中的应用[J];中国新药杂志;2013年11期
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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9 宋存先,杨菁,孙洪范,朱振峰,王彭延,R·Levy;心血管内局部定位药物缓释体系的实验研究[J];中国心血管杂志;1998年02期
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 任成军,李大成,钟本和,周大利,刘恒,龚家竹;影响TiO_2光催化活性的因素及提高其活性的措施[J];四川有色金属;2004年04期
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5 刘建林,肖久梅,史孝群,龚春秀,马文江;纳米CaCO_3填充环氧树脂分散技术及力学性能研究[J];工程塑料应用;2003年03期
6 惠雪梅,张炜,王晓洁;环氧树脂/SiO_2,纳米复合材料性能的研究[J];工程塑料应用;2004年02期
7 安骏,吴海霞,辛寅昌;防高能辐射的树脂/纳米铅复合材料的制备及研究[J];工程塑料应用;2004年12期
8 郑海忠,张坚,鲁世强,徐志锋;选区激光烧结制备PS/Al_2O_3纳米复合材料的研究[J];工程塑料应用;2005年09期
9 安骏;刘吉华;辛寅昌;;树脂纳米铈防辐射复合材料的制备及其性能研究[J];工程塑料应用;2006年08期
10 郭冬勇,赵德国;纳米材料的现行测量技术[J];安徽教育学院学报;2002年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 乐士儒;栾野梅;安茂忠;;电沉积银纳米膜的光学性质研究[A];2004年全国电子电镀学术研讨会论文集[C];2004年
2 杨黎明;VPW Shim;陈锋;龚明;;用高应变率大应变载荷制备纳米晶铜试件[A];第八届全国爆炸力学学术会议论文集[C];2007年
3 王金相;张晓立;王经涛;赵铮;;爆炸加载制备纳米晶铜实验研究[A];第九届全国冲击动力学学术会议论文集(下册)[C];2009年
4 王金相;周楠;赵铮;王小绪;杭逸夫;;爆炸载荷下纳米晶铜晶粒度分布及影响因素研究[A];第六届全国爆炸力学实验技术学术会议论文集[C];2010年
5 李春霞;李立平;酒金婷;王柏华;;纳米粒子的表面改性研究进展[A];第二届功能性纺织品及纳米技术应用研讨会论文集[C];2002年
6 李星国;;纳米材料研究及其应用[A];第三届功能性纺织品及纳米技术应用研讨会论文集[C];2003年
7 张永文;陈英;;含纳米ZnO抗紫外整理剂的制备及性能研究[A];第四届功能性纺织品及纳米技术研讨会论文集[C];2004年
8 王敏;;纳米材料在丝绸文物保护上的应用[A];第四届功能性纺织品及纳米技术研讨会论文集[C];2004年
9 王东;路建军;齐宏进;;防水透湿织物上碳氟膜的纳米结构及均匀性的初步研究[A];第六届功能性纺织品及纳米技术应用研讨会论文集[C];2006年
10 高惠;杨俊玲;;纳米SiO_2的制备方法及应用[A];第八届功能性纺织品及纳米技术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 戚晓红;聚天冬氨酸高分子纳米载体药物的制备、表征及性能研究[D];南京医科大学;2009年
2 谭淑媛;几种稀土发光材料的合成及发光性质的研究[D];哈尔滨工程大学;2010年
3 王德广;金属粉末高致密化成形及其数值模拟研究[D];合肥工业大学;2010年
4 赵世华;ZnO纳米阵列的制备和稀土掺杂工艺及其发光性能的研究[D];湖南大学;2010年
5 周红洋;硫属化合物纳米材料的可控性合成与表征[D];中国科学技术大学;2010年
6 马雷;bFGF基因修饰的MSCs细胞复合β-磷酸三钙修复骨缺损实验研究[D];新疆医科大学;2010年
7 杜海军;石墨烯和荧光碳纳米颗粒的制备及其电化学特性的研究[D];华南理工大学;2010年
8 孟永春;胶原与生物活性玻璃作用机理及其复合骨修复材料的研究[D];华南理工大学;2010年
9 张贵军;聚丙烯酸酯/纳米氧化锡锑复合乳液的制备、表征及其在透明隔热涂料中的应用研究[D];华南理工大学;2010年
10 王文涛;天然橡胶/蒙脱土纳米复合材料的阻隔性及相关性能研究[D];华南理工大学;2010年
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1 张旭;纳米CeO_2-TiO_2复合介孔材料的制备及性能[D];河北大学;2009年
2 李艳冰;二元稀土氟化物的控制合成及光学性能研究[D];安徽工程大学;2010年
3 齐天骄;铟锡氧化物纳米微粒表面修饰研究及其悬浮液的制备[D];中国工程物理研究院;2010年
4 王青尧;锑基纳米材料的水热法制备及表征[D];山东科技大学;2010年
5 田维亮;线切割废砂浆制备白炭黑及改性研究[D];山东科技大学;2010年
6 尹永琦;多端耦合量子点体系量子输运特性的研究[D];哈尔滨师范大学;2010年
7 谭鑫鑫;稀土离子掺杂纳米晶ZrO_2-Al_2O_3复合粉体的制备及发光性质的研究[D];哈尔滨师范大学;2010年
8 甘自保;贵金属及其合金/碳纳米管复合材料的制备与表征[D];哈尔滨师范大学;2010年
9 赵紫军;(MCM-41)-La_2O_3纳米复合材料的制备、表征及光学性质研究[D];长春理工大学;2010年
10 薛江;一维纳米材料的静电纺丝法制备、表征及性能研究[D];长春理工大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 袁小洪;安荣泽;王兆杰;贾婀娜;;转化生长因子-β在软骨组织工程中的研究进展[J];安徽医学;2009年06期
2 刘海燕;陈劲春;陈兴田;;吲哚美辛聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的制备[J];北京化工大学学报(自然科学版);2008年04期
3 金武龙;周梁;郭慧玲;田洁;;纳米微粒靶向治疗兔舌癌的实验研究[J];北京口腔医学;2008年04期
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5 徐越;柯以铨;杨西晓;阎玺庆;王建奇;黄乐松;;界面聚合法制备反义核酸氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的研究及稳定性考察[J];第三军医大学学报;2008年14期
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7 黄乐松;王春霞;陈志良;万佳;阎玺庆;段刚;;吉西他滨聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的制备工艺[J];南方医科大学学报;2007年11期
8 陈如大;任非;李国锋;刘思佳;;紫杉醇聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒制备研究[J];南方医科大学学报;2010年04期
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1 刘福和;金桂;王斌艳;魏颖慧;李范珠;;吐温-80包裹的神经毒素纳米粒鼻腔给药脑内递送的研究[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
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1 孙颖;PBCA纳米粒载体介导的肝癌HSV-TK/GCV基因治疗的体外实验研究[D];中南大学;2004年
2 高虹;磁性纳米高分子聚合物在肿瘤靶向化疗中的初步应用研究[D];复旦大学;2004年
3 蒋新宇;抗癌药物纳米粒载体系统的制备及其性能研究[D];中南大学;2005年
4 杨治荣;TNF-alpha反义寡核苷酸纳米粒子治疗重型颅脑伤的实验研究[D];第二军医大学;2006年
5 宋坤;光敏剂—纳米粒载体系统在卵巢癌光动力学治疗中的实验研究[D];山东大学;2006年
6 李新中;齐墩果酸聚氰基丙烯酸正丁酯纳米囊的制备及其肝靶向性研究[D];中南大学;2007年
7 王夏红;苯妥英钠聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微粒的制备及抗癫痫的药效学研究[D];中南大学;2007年
8 吕琳;表阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯磁性纳米粒的研制及用于肝癌靶向治疗的实验研究[D];中南大学;2006年
9 张纲;bFGF、rhBMP-2聚乳酸纳米微球促进下颌骨骨折愈合的实验研究[D];第三军医大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前5条
1 万发里;骨髓靶向性全反式维甲酸聚氰基丙烯酸正丁酯毫微粒的研究[D];山东大学;2005年
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3 徐巍;肝靶向性大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的研究[D];山东大学;2006年
4 沈成蓉;肝靶向性载顺铂长循环纳米粒的制备及体外抗肿瘤研究[D];中南大学;2008年
5 魏培;羟丙基-β-环糊精修饰聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的研究[D];山东大学;2008年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 高雅宁;马莉;王蕾;;中枢神经系统给药的研究进展[J];医学研究生学报;2014年01期
2 张泰彬;肖作兵;胡静;田婷;李天奇;;聚氰基丙烯酸正丁酯包覆玫瑰香精纳米胶囊的流变行为及其流变参数拟合[J];精细化工;2014年03期
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1 李奎;凝血酶肽复合人工骨修复兔桡骨大段骨缺损的实验研究[D];川北医学院;2014年
【二级参考文献】
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3 费伟,王大章,刘松筠;高生物诱导活性复合人工骨整复骨缺损的超微结构研究[J];华西口腔医学杂志;1997年01期
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10 赵明,王会信,周廷冲;重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽在大肠杆菌中的表达及其诱导成骨活性[J];生物化学杂志;1994年03期
【相似文献】
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9 彭磊;徐华梓;胡蕴玉;王臻;孟国林;孙峥;常琪;;BMP复合仿生人工骨填塞犬股骨假体周围髓腔骨缺损的实验研究[A];2007年浙江省医学会骨科学学术会议暨浙江省抗癌协会骨软肿瘤学术会议论文汇编[C];2007年
10 何艳;万晓慧;马彩玲;;左炔诺孕酮宫内缓释系统、去氧孕烯炔雌醇治疗无排卵性功能失调性子宫出血的临床观察[A];中华医学会第三次全国绝经学术会议暨绝经相关问题学习班论文汇编[C];2011年
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5 王文芳;时尚女性添风采显风韵[N];中国消费者报;2002年
6 张荔子;我国已掌握角膜保鲜技术[N];健康报;2006年
7 福建医科大学附一医院眼科 朱益华;青光眼治疗新进展[N];福建科技报;2002年
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4 刘茂雄;海藻酸钠—环孢霉素A药膜在青光眼滤过性手术中抗增殖作用的实验研究[D];吉林大学;2006年
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6 陈发明;生长因子生物控释促进牙周组织再生的实验研究[D];第四军医大学;2006年
7 张小斌;聚乳酸聚乙醇酸/RNAⅢ抑制肽缓释微球的制备和预防骨科内植物葡萄球菌感染的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
8 马兆峰;牙本质源性蛋白诱导牙周膜干细胞分化及促进牙周再生的实验研究[D];第四军医大学;2008年
9 方涛林;抗生素缓释的系列骨缺损修复材料的研究[D];复旦大学;2011年
10 刘成圣;几种NSAIDs溶解性研究及控/缓释系统的构建与性能评价[D];中国海洋大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨侠;两性霉素B缓释系统治疗烟曲霉菌性眼内炎的药效学研究[D];青岛大学;2005年
2 王立伟;5-氟尿嘧啶—纳米炭微粒缓释系统治疗小鼠肉瘤的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
3 全力;生长因子缓释系统促进下颌骨骨折愈合的实验研究[D];四川大学;2005年
4 郑晓丽;丝裂霉素C缓释系统辅助兔青光眼滤过性手术的实验研究[D];山东大学;2005年
5 陈小敏;2%毛果芸香碱透明质酸钠控释膜对高眼压兔的降眼压作用[D];暨南大学;2009年
6 赵梓屹;纳米羟基磷灰石/赖氨酸二异氰酸酯—甘油聚合物/盐酸去甲万古霉素复合体物理特性及药物体外缓释研究[D];中南大学;2008年
7 房蕊;可注射凝胶—纳米微球缓释系统用于心肌梗死治疗的研究[D];哈尔滨工业大学;2012年
8 赵东旭;曲安奈德PLGA微球对兔上腭部创面瘢痕愈合作用的实验研究[D];第四军医大学;2006年
9 刘涛;可缓释生物活性蛋白的无细胞组织工程真皮的构建研究[D];第四军医大学;2006年
10 郑翼德;纳米羟基磷灰石/赖氨酸二异氰酸酯甘油聚合物/去甲万古霉素复合体药物缓释及预防骨感染的研究[D];中南大学;2006年
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