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《第四军医大学》 2004年
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组织工程骨修复牙槽骨缺损与正畸牙齿移动

金钫  
【摘要】:组织工程是应用细胞生物学和工程学的原理,对病损组织结构和功能的修复与重建进行研究的一门新兴学科,骨组织工程是一个主要分支。骨髓基质细胞因为具备来源丰富、损伤小、取材方便以及易于体外扩增等优势,成为近年来组织工程骨研究中国内外学者首选的种子细胞。陶瓷化骨具有天然的骨小梁结构、易于传导成骨,避免了人工合成材料的孔隙率和孔径大小及交通等方面的制作难题,而且具有可降解、无免疫原性、来源丰富、制备简单、经济成本低等优点,是理想的骨组织工程支架材料。本实验采用陶瓷化骨作为支架材料,骨髓基质细胞为种子细胞,利用rhBMP-2和TGF-β骨形成促进作用,构建一种新型的骨组织工程修复方法。 第一部分:CBB/MSCs修复颌骨缺损的实验研究 首先进行大鼠骨髓基质细胞的分离、体外培养及使用矿化液(10~(-8)M地塞米松、0.01 mol/L β-甘油磷酸钠、50mg/L维生素C)诱导,然后应用细胞计数、MTT检测、ALP检测、免疫组织化学、Von Kossa等方法观察MSC在矿化液作用下生物学特性的改变。发现5天时已经有一部分骨髓基质细胞转化为成骨细胞,诱导20天后可见矿化结节。其次观察复合方式对骨髓基质细胞(MSC)的贴附、增殖、分化的影响。将诱导后的MSCs与CBB复合。体外培养,观察其对骨髓基质细胞成骨能力的影响。应用扫描电镜、ALP、免 第四军医人学博卜学位论文 疫组化等方法观察,证明MSCs在CBB上能够很好的贴附、伸展和 繁殖。将矿化诱导后的MSCs接种在CBB上,植于裸鼠及自体大鼠 皮下,观察thBMP一2和TGF一p等生长因子对MSCs成骨能力的影响, 通过HE、改良Mallory’s三色法、图像分析观察骨形成情况。结果 表明CBB复合MSCs在自体皮下能够形成编织骨、板层骨等组织, thBMP一2和TGF一p具有协同作用,促进骨基质形成。其次进行大鼠下 领骨缺损的修复。通过HE、改良Mallory’s三色法、图像分析观察 新骨形成情况。2周后缺损处的支架材料周围有新骨形成,缺损处 与支架材料呈骨性连接。本实验证明:骨髓基质细胞在体外可以 经过诱导分化为成骨细胞作为种子细胞应用于骨组织工程,其与 陶瓷化骨复合后移植成骨明显,具有良好的骨组织工程应用前景。 第几部分:CBB/MSCs修复领骨缺损后牙齿移动研究 在组织工程骨修复领骨缺损ZW、4W和SW后,在大鼠下颇第 一磨牙和切牙间安装正畸矫治器,加力近中移动第一磨牙。然后 对移动牙齿牙周组织改建进行观察,并与正常牙周组织对比,以 了解组织工程骨修复领骨缺损后对正畸牙齿移动的影响。对牙齿 移动速度的研究表明,牙齿在缺损修复区的移动速度要快于正常 组织。对缺损修复区牙齿移动完成后牙根吸收和牙槽骨高度变化 的研究表明,牙根吸收值和牙槽骨高度丧失比对照组要小。证明 组织工程骨修复缺损不会对牙齿移动产生不良影响。进一步对牙 齿牙周组织改建进行研究发现,缺损修复区牙齿移动的牙周组织 改建规律与正常组织相同。但前者破骨细胞数量较多,骨陷窝数 量和面积也较大,BMP免疫组化染色阳性较强。提示骨缺损修复 区牙齿移动过程中牙周组织改建活跃,有利于正畸牙齿移动。
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R783.5

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