收藏本站
《第四军医大学》 2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

DAF的原核表达,重折叠,ELISA检测系统的建立,及其在大鼠体内的代谢和生物学活性的测定

徐江  
【摘要】: 本研究的主要目的是表达足量的可溶性促衰变因子(DAF)蛋白用于动物试验,测定DAF在血清中的代谢规律和对补体系统的抑制效果。在本研究中,充分采用了如PCR、载体构建、转化、蛋白诱导表达和液相色谱等技术得到了高度纯化的蛋白质。进而采用单克隆抗体技术,制备了20株抗-大鼠DAF(rDAF)的单克隆抗体,建立了检测可溶性rDAF的ELISA系统(最低浓度下限可达10 ng/ml)和Western blot用单抗株(可检出40 ng rDAF蛋白)。通过大鼠的在体试验证明rDAF在大鼠体内代谢非常快且对大鼠血浆补体抑制程度很小,其本身并不适合作为一种补体抑制剂使用。除此以外,还完成了以下两个工作:建立了新的高效折叠复性DAF蛋白的方案;探索了可溶性表达DAF的可能性并揭示了NusA-DAF融合蛋白形成可溶性包涵体的原因。
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R392;R446.6

手机知网App
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 沈奕;伍万荣;高智谋;王革;;木霉几丁质酶和几丁寡糖的制备及提纯[J];安徽农业科学;2009年16期
2 陈华友;齐向辉;耿旭;徐庆刚;;枯草杆菌重组水蛭素的分离纯化工艺研究[J];安徽农业科学;2009年34期
3 陈华友;张春霞;马晓珂;齐向辉;;蛋白质分离纯化策略[J];安徽农业科学;2009年36期
4 李春生;吴萌;李君华;齐颖颖;李玉静;闫静辉;;抗沙丁胺醇单克隆抗体制备与鉴定[J];安徽农业科学;2011年10期
5 邵伏文;薛宝燕;郭家明;陈学平;;烟草苯丙氨酸解氨酶活力与多酚含量的关系研究[J];安徽农业科学;2012年12期
6 麻艳群;黄凯;于丹;陈涛;卢克焕;;饲料磷脂水平对巴丁鱼(Pangasius sutchi)鳃Na~+-K~+-ATPase活性及细胞膜脂肪酸组成的影响[J];安徽农业大学学报;2011年03期
7 付小果;陈洪章;李宏强;马润宇;;压力脉动固态发酵微生物蛋白质及机理的研究[J];北京化工大学学报(自然科学版);2006年03期
8 张葵;汪涛;李琦;庄然;宋朝君;李永明;金伯泉;;小鼠抗兔IgG单克隆抗体的制备与应用[J];标记免疫分析与临床;2008年01期
9 黄涛;张钢林;李楠;;巴戟天多糖对体外培养兔软骨细胞凋亡的影响[J];北京体育大学学报;2010年08期
10 刘楠,奚永志,孙玉英,郭斯启,袁志宏,崔建武,习彩霞,梁飞,孔繁华;重组人干细胞因子/血小板生成素融合蛋白的纯化及复性研究[J];中国输血杂志;2005年01期
中国重要会议论文全文数据库 前6条
1 朱勤勋;严雪;韩友斌;;鼠源IgG抗体F(ab')2片段及Fab片段的制备纯化及其免疫活性研究[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
2 王宏俊;安烨;龚玉梅;陈小玲;张培君;;Modesto株副鸡禽杆菌血凝素基因的克隆表达及生物活性鉴定[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
3 苟艳子;连建奇;聂青和;庄严;刘清泉;邵彬;;肝硬化患者外周血单核细胞表面TLR4、TLR2表达及临床意义[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(下册)[C];2007年
4 张海龙;田兆丰;董志;张晏如;张飞云;;多花黑麦草斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
5 孔庆波;;两种转移因子对犬外周血T细胞亚群影响的比较[A];中国畜牧兽医学会养犬学分会第十二次全国养犬学术研讨会论文集[C];2007年
6 陈义平;杨艳菊;吴晓东;王志亮;;西尼罗河病毒E蛋白结构域Ⅲ特异性单克隆抗体的研制[A];全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 蒋雪松;用于有机磷农药残留检测的免疫生物传感器的研究[D];浙江大学;2008年
2 王翠翠;文蛤多肽的分离纯化及抗肿瘤机制研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
3 赵梓纲;白念珠菌磷脂酶B的原核表达、纯化及功能验证[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
4 廖婵;抗人CD45亚类新单抗ZCH-6-3A4识别抗原表位的研究[D];浙江大学;2011年
5 王雪毓;淀粉基水分散体薄膜包衣材料及其释放行为的研究[D];华南理工大学;2011年
6 迟春萍;人铜锌超氧化物歧化酶在毕赤酵母中高表达及其中试工艺研究[D];吉林农业大学;2011年
7 贾韶千;银杏抗氧化肽的制备、结构鉴定及活性研究[D];南京林业大学;2011年
8 黄瑞华;寡糖、大蒜素与酵母提取物对猪生长与健康的影响[D];南京农业大学;2009年
9 宋鸿雁;堆型艾美耳球虫乳酸脱氢酶DNA疫苗免疫保护作用及免疫机理研究[D];南京农业大学;2010年
10 戴成祥;腺苷A1受体激动剂R-苯异丙基腺苷药理性预适应对心肌的延迟保护作用[D];军医进修学院;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李浩丽;Bacillus pumilus CN8菌株高效降解猪血Hb酶的分离纯化与降解机制探讨[D];华中农业大学;2010年
2 王树云;斑点叉尾鮰病毒ORF6和ORF10基因的原核表达及其功能的初步研究[D];华中农业大学;2010年
3 逯晋忠;苏云金芽胞杆菌对云斑天牛的抗性研究[D];华中农业大学;2010年
4 张献芳;利用半夏凝集素构建内生工程菌及其抗同翅目害虫效果研究[D];华中农业大学;2010年
5 江艳;BmCycH基因及其在家蚕中表达特性的研究[D];浙江理工大学;2010年
6 何孟莲;不同动物TF活性比较及乌骨鸡TF对IBD疫苗造成免疫抑制防治的研究[D];山东农业大学;2009年
7 郭晓红;嗜热毛壳菌热稳定脂肪酶的基因克隆、表达及性质研究[D];山东农业大学;2010年
8 杜新永;生姜蛋白酶分离纯化及品种间差异性比较[D];山东农业大学;2010年
9 秦倩茹;抗卵清蛋白单克隆抗体的制备及卵清蛋白、醇溶蛋白ELISA检测方法的建立[D];中国海洋大学;2010年
10 朱延平;麻蝇胞浆全蛋白质双向电泳及其抗菌等主要活性研究[D];江西师范大学;2010年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴锦雅,周晓红,陈晓光;抗重组日本血吸虫P38抗原单克隆抗体的制备与鉴定[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2005年02期
2 崔立斌,马清钧;新生肽链的折叠与重组蛋白可溶性表达[J];中国生物工程杂志;1998年01期
3 车婧,韩金祥,王世立;促进包涵体蛋白复性的几种有效添加剂[J];医学分子生物学杂志;2004年02期
4 宋琛;徐江;张芳琳;白文涛;李柱一;;抗人乙酰胆碱受体单链抗体1956#在大肠杆菌中的可溶性表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2008年03期
5 邬强;辛毅;马郁芳;;结核分枝杆菌wbbL蛋白质可溶性表达及鉴定[J];中国公共卫生;2009年10期
6 杜春红;王鹏;张建中;唐雪;宋志忠;;鼠疫耶尔森氏菌Pla蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年09期
7 王婧;张杰;张颖;马宁宁;谢良志;;重组人骨形态发生蛋白-2原核表达及单克隆抗体制备[J];中国医学科学院学报;2011年05期
8 黄革;徐小虎;崔永萍;陆士新;;食管癌相关基因2(ECRG2)包涵体的溶解与纯化[J];汕头大学学报(自然科学版);2006年02期
9 刘建东;刘思国;王春来;宫强;王勇;迟磊;赵昆;;基因免疫制备牛分枝杆菌MPB64抗原单克隆抗体[J];中国预防兽医学报;2007年11期
10 朱瑾,俞树荣,张雪,饶贤才;抗肺炎衣原体种特异性单克隆抗体的制备及其免疫学特性的研究[J];第三军医大学学报;1997年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 林玲;杨国成;夏腊菊;陈光宇;;人生长激素亚型的基因克隆、表达及分离纯化方法的研究[A];湖北省暨武汉市生物化学与分子生物学学会第八届第十七次学术年会论文汇编[C];2007年
2 胡茂志;焦新安;潘志明;黄金林;邵国青;刘秀梵;;抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
3 黄红亮;陈焕春;陈美玲;贝为成;严琳;;胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅳ基因3’-端的克隆、原核表达及单克隆抗体的制备[A];湖北省生物工程学会2004年年会学术报告及论文摘要汇编[C];2004年
4 焦金波;黄娟;秦晓冰;陈丽;温海燕;单虎;;犬瘟热病毒F蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集[C];2008年
5 徐爽;徐焱;;单克隆抗体在输血领域的应用探讨[A];中国输血1999年年会暨纪念ABO血型发现100周年学术交流论文专辑[C];1999年
6 李安民;;单克隆抗体标载的~(131)I治疗恶性脑胶质瘤Ⅱ期临床试验的三种给药途径的研究[A];第一届中国肿瘤靶向治疗技术大会论文集[C];2003年
7 于翠;施曼铃;王桂珍;吴建祥;周雪平;;几种重要植物病毒单克隆抗体的制备和快速检测方法的建立[A];第三次全国植物病毒和病毒防治学术研讨会论文集[C];2003年
8 刘振勇;邓国华;李呈军;张立春;田国彬;何后军;于康震;陈化兰;;抗禽流感H9N2亚型血凝素特异性单克隆抗体的制备与分析[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
9 李振宇;赵益明;董宁征;沈飞;阮长耿;;抗FⅧ-C2区单克隆抗体的制备及鉴定[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
10 张改连;黄烽;;抗CD20人鼠嵌合单克隆抗体rituximab治疗类风湿关节炎的临床研究[A];第十二届全国风湿病学学术会议论文集[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 贾超时李德成;单克隆抗体产业研发项目将落户大庆[N];大庆日报;2008年
2 小许;市领导会见美国生物医药巨头[N];无锡日报;2010年
3 姜海;英科学家发现单克隆抗体[N];科技日报;2007年
4 本报特约撰稿人 李朝;单抗:生物医药发展的主旋律[N];医药经济报;2006年
5 记者 项铮;赛诺菲巴斯德研制抗狂犬病单克隆抗体[N];科技日报;2008年
6 记者 杨俊坚;单抗药物:站在同一起跑线[N];医药经济报;2011年
7 张蕾;治疗用单克隆抗体[N];光明日报;2002年
8 李晓;“苏州系列”单克隆抗体走向世界[N];苏州日报;2008年
9 张骁束;梅英;单克隆抗体的研究进展[N];中国医药报;2003年
10 邹平;单克隆抗体研究取得突破[N];医药经济报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐江;DAF的原核表达,重折叠,ELISA检测系统的建立,及其在大鼠体内的代谢和生物学活性的测定[D];第四军医大学;2009年
2 万忠海;抗PEA单抗和单链抗体制备及在绿脓感染中的应用[D];吉林大学;2008年
3 朱晓霞;抗重金属镉、铅单克隆抗体、单链抗体的研制及单链抗体三维结构的模建[D];南京农业大学;2007年
4 苏建青;犬瘟热免疫层析试纸及荧光定量PCR诊断方法的建立与评价[D];吉林大学;2008年
5 唐琳;肝再生增强因子与肝癌发生、发展关系的研究[D];重庆医科大学;2005年
6 侯桂华;巨噬细胞移动抑制因子在同种移植排斥中作用及其机理的研究[D];山东大学;2004年
7 高勇;新型单克隆抗体荧光探针染料的合成及免疫荧光组织化学应用[D];西北大学;2006年
8 江敏;大鼠单克隆抗体的制备、鉴定、基因克隆、抗原分析以及药物偶联物的抗肿瘤作用研究[D];中国协和医科大学;1996年
9 秦迎松;人促血液血管细胞生成素(Haemangiopoietin, HAPO)单克隆抗体的制备、鉴定及应用[D];中国协和医科大学;2004年
10 吕大伟;抗RANKL单克隆抗体在大鼠类风湿性关节炎模型中的应用及RANKL转录调控的探索性研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 徐江;大鼠DAF功能区的重组表达纯化和功能鉴定[D];第四军医大学;2006年
2 左建宏;沙眼衣原体Omp2的表达、纯化及其单克隆抗体的研制与鉴定[D];南华大学;2005年
3 元永平;猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白单克隆抗体的制备和鉴定[D];西北农林科技大学;2008年
4 敬凌霞;抗CP4-EPSPS单克隆抗体的制备和生物学特性的研究[D];重庆医科大学;2007年
5 刘湘;乙型肝炎病毒X蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备和鉴定[D];重庆医科大学;2007年
6 时红星;犬瘟热病毒的分离及单克隆抗体的研制[D];扬州大学;2008年
7 王文英;人抗地高辛单链抗体(ADAscFv)的纯化[D];山西医科大学;2004年
8 薛萍;猪CD8β重组蛋白单克隆抗体的制备[D];甘肃农业大学;2009年
9 王阶平;抗人肺癌单克隆抗体3D3的人源化及分子小型化研究[D];厦门大学;2006年
10 刘莉;混合抗原免疫结合蛋白质芯片通量化制备单克隆抗体体系的初步建立[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026