收藏本站
《第四军医大学》 2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

猪牙本质基质蛋白提取物的分离纯化及活性检测

薛云鹏  
【摘要】: 牙齿的发育及牙胚的细胞分化是一系列口腔上皮和外胚层间充质组织细胞间相互作用的结果。牙本质形成过程中,成牙本质细胞的分化、成熟,分泌基质,以及诱导羟基磷灰石晶体沉积,都是由多种基质蛋白相互影响共同参与完成。牙本质有机基质决定其形态并且是矿物形成的基本物质。有机基质主要是胶原,非胶原基质约占10 %,它在牙本质的生物矿化过程中起着模板和调节作用。目前对非胶原蛋白的研究大多集中在单一蛋白质的生物特性,但仍没有发现牙本质形成的核心蛋白,对于非胶原蛋白的混合作用研究不多。本研究采用组织蛋白提取方法从牙本质蛋白中获得DMPCs,并利用体外实验初步检测混合蛋白相互作用对hDPSC生长的影响,观察其生物活性。 1牙本质基质蛋白的提取和分离纯化 取六龄猪上下颌磨牙牙胚,4℃进行蛋白分离,磨碎后采用EDTA/盐酸胍浸泡提取牙本质蛋白,浸泡提取7d后取上清,分别标记并加以浓缩,利用ATKA蛋白纯化分析仪分离纯化蛋白质,经PBS透析后浓缩以备用。经SDS-PAGE电泳图谱检测,根据相对分子质量与相对迁移率的关系,可以计算出相对分子质量分别为: 96Kda、38Kda、20Kda以及小分子,其中20Kda的染色条带最重。与文献中常见DSP、DPP相对分子量接近。说明EDTA提取法能够提取到多种非胶原蛋白,同时分子量检测证实能够建立一条稳定提取DMPCs的方法。 2 DMPCs对hDPSC生长的影响 设置4个实验组:使培养基内DMPCs终末浓度分别为50μg/ml、100μg/ mL、150μg/ml、200μg/ml,并以2%FCS的DMEM培养液作对照组,利用MTT法、ALP法分别检测DMPCs对hDPSC生长的影响。结果显示,1d、3d时100μg/ml促进hDPSC增殖的能力与对照组比较有显著差异(P0.05),5d作用不明显,结合hDPSC生长曲线考虑是生长饱和所致。从线性关系上分析,DMPCs对hDPSC的作用是呈递进关系的,提示一定浓度的DMPCs可以促进牙髓干细胞增殖,在牙髓干细胞向成牙本质细胞样细胞分化的过程中发挥作用,促进牙本质形成。
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R78

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王子露;曹灵;郑阳玉;杨迷芳;王舒舒;于金华;;PGC-1α-shRNA慢病毒载体对牙髓干细胞分化的影响[J];口腔生物医学;2011年02期
2 麻丹丹;高杰;吴补领;;改良组织块酶消化法培养人龋损牙髓干细胞的实验研究[J];牙体牙髓牙周病学杂志;2011年07期
3 李颖;谷子芽;;牙源干细胞参与组织再生修复的作用[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年23期
4 金燕;刘茜;周红艳;梅予锋;;活髓保存材料的现状和展望[J];口腔生物医学;2011年02期
5 赵伟;陆家瑜;邹德荣;张秀丽;华丽;曹春花;;山羊乳牙牙髓细胞分离培养与矿化诱导的体外研究[J];上海口腔医学;2011年03期
6 唐哲;;可溶性人牙蛋白组分析及其引导牙本质和牙齿再生的能力[J];口腔生物医学;2011年02期
7 文晶;董波;徐雷;王健平;;脑源性神经营养因子在大鼠炎性牙髓中的表达及意义[J];口腔医学研究;2011年08期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈博;余擎;;人血小板裂解液在成人牙髓干细胞向成牙本质细胞分化过程中的作用[A];全国第八次牙体牙髓病学学术会议论文汇编[C];2011年
2 贾谦;吴家媛;倪龙兴;;碱性成纤维细胞生长因子对牙髓干细胞成骨分化的影响[A];全国第八次牙体牙髓病学学术会议论文汇编[C];2011年
3 吕长胜;翟旭;;大鼠牙髓干细胞分化成骨样细胞能力研究[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年
4 吕长胜;翟旭;;大鼠牙髓干细胞分化成骨样细胞能力研究[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年
5 陆家瑜;华丽;邹德荣;;乳牙牙髓干细胞体内外诱导成骨的研究[A];中华口腔医学会全科口腔医学专业委员会第一次学术年会会议论文集[C];2009年
6 麻丹丹;高杰;吴补领;;改良组织块酶消化法培养人龋坏牙髓干细胞的实验研究[A];全国第八次牙体牙髓病学学术会议论文汇编[C];2011年
7 申元源;陈柯;许诺;;人乳牙牙髓干细胞体外诱导向软骨细胞分化的实验研究[A];全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会论文汇编[C];2009年
8 李昊妍;梁景平;张秀丽;殷德民;;人牙髓干细胞与β-TCP复合后的体内外实验研究[A];全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会论文汇编[C];2009年
9 王晓东;王捍国;倪龙兴;;NTs在人牙髓干细胞中的表达及其对细胞增殖分化的影响[A];全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会论文汇编[C];2009年
10 李昊妍;梁景平;张秀丽;殷德民;;人牙髓干细胞与β-TCP复合后的体内外实验研究[A];全国第八次牙体牙髓病学学术会议论文汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 记者 张忠霞;用猴子牙髓干细胞能刺激脑细胞生长[N];新华每日电讯;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陆群;牙髓干细胞分离培养鉴定和体外诱导分化的研究[D];第四军医大学;2002年
2 赵秀;MTA调控人牙髓干细胞分化的分子机制的研究[D];第四军医大学;2010年
3 张红梅;微环境对牙髓干细胞成牙能力的影响及MAPK信号分子机制调控的研究[D];第四军医大学;2010年
4 王亦菁;牙髓干细胞与外胚间充质干细胞表型和分化能力的比较研究[D];第四军医大学;2005年
5 张微波;牙髓干细胞体外分化能力的研究[D];武汉大学;2005年
6 黄怡;大鼠牙髓干细胞在微弧氧化钛表面诱导分化成骨的研究[D];华中科技大学;2012年
7 贺慧霞;牙髓干细胞分离鉴定及其制备组织工程化牙本质牙髓复合体的实验研究[D];第四军医大学;2005年
8 于金华;牙髓干细胞形成牙体组织能力及其制备嵌合体牙齿的实验研究[D];第四军医大学;2007年
9 汪银雄;用牙髓干细胞构建牙齿样结构的实验研究[D];第四军医大学;2009年
10 王艳梅;TGF-β_3与牙髓干细胞在动物面神经损伤修复中的应用研究[D];新疆医科大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 薛云鹏;猪牙本质基质蛋白提取物的分离纯化及活性检测[D];第四军医大学;2009年
2 荆晓艳;维生素C诱导人脱落乳牙牙髓干细胞膜片形成及体外成骨实验初步研究[D];天津医科大学;2012年
3 翟旭;大鼠牙髓干细胞与骨髓间充质干细胞分化成骨样细胞能力对比研究[D];北京协和医学院;2011年
4 丁伯福;锁骨颅骨发育不良综合征患者骨髓间充质干细胞及牙髓干细胞生物学行为研究[D];南京医科大学;2011年
5 贾谦;碱性成纤维细胞因子对牙髓干细胞矿化能力影响及机制研究[D];第四军医大学;2012年
6 丁祥龙;人乳牙牙髓干细胞与骨髓间质干细胞成骨能力的比较研究[D];南方医科大学;2011年
7 马会强;乳牙牙髓干细胞治疗实验性根尖周炎的初步研究[D];天津医科大学;2012年
8 吴容思;过表达BMP4、MSX1、PAX9对牙髓干细胞牙向分化潜能的影响[D];福建师范大学;2012年
9 申元源;人乳牙牙髓干细胞成软骨及成骨特性的实验研究[D];南方医科大学;2010年
10 黄晓菲;骨碎补总黄酮对大鼠牙髓干细胞增殖和成骨分化的作用研究[D];华中科技大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026