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《第四军医大学》 2009年
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兔骨质疏松模型的快速建立和硫酸钙复合bBMP在椎体强化中的实验研究

刘绪立  
【摘要】: 一、研究背景 骨质疏松症最常见的并发症是椎体压缩骨折,手术治疗包括脊柱内固定和椎体成形术或球囊扩张椎体成形术。椎体成形术是近年来发展起来一种新的脊柱微创手术,该技术已广泛应用于治疗椎体的多种良恶性病变及骨质疏松性骨折,取得了很好的临床疗效,可以快速缓解疼痛,纠正脊柱畸形,由于椎体成形术创伤小、效果好且疗效快,已成为脊柱微创介入治疗的又一重要方法。临床上现在最常用的椎体成形术的材料为聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)。但PMMA充填材料具有许多缺点:病变椎体术后与相邻椎体的力学强度不同,因应力集中易导致相邻椎体的骨折;组织相容性差,无成骨作用,无生物降解性,最终不被自体骨取代;单体有细胞毒性,放热反应,其体外聚合温度达40~122℃,术中可能会引起邻近组织和神经元的热损伤。而且临床越来越要求成形材料能够携带有特殊治疗作用的药物,而PMMA并不能满足这些临床治疗的需要。如何探索一种具有良好生物相容性的成形材料,其在作为固定材料的同时又能成为携带具有特殊治疗作用的药物的载体,是本研究的目的。 二、研究目的 1.探索采用去势法+甲强龙诱导法快速建立兔子骨质疏松模型的方法;评估去势+甲强龙诱导后松质骨及皮质骨的微观结构和宏观力学性能的改变;从而建立一种适用于骨科领域研究的兔骨质疏松模型的快速建模方法。 2.在已经建立的骨质疏松模型体内,采用“二维组织形态—三维空间结构—生物力学特性”的综合手段,评估硫酸钙以及硫酸钙复合bBMP对提高骨质疏松椎体骨密度、骨小梁微观结构及力学强度的作用。 三研究内容和方法 第一部分建立并分析评价兔骨质疏松动物模型 采用随机对照研究方案,将20只新西兰大白兔随机分为去势(OVX)A组(n=4)、B组(n=8)和假手术组(Sham,n=8)。A组为单纯OVX组,B组为OVX+甲强龙肌注(4周)组。所有动物术前和术后2月均采用双能X线吸收骨密度仪测定腰椎骨密度。于术后2个月:①采用组织病理学切片方法对骨小梁结构进行组织病理学观察;②采用DEXA测定所有动物股骨髁部及皮质骨的骨密度;③采用显微CT分析松质骨骨小梁三维结构改变;④采用生物力学实验,比较实验组和对照组的松质骨和皮质骨的力学强度。 第二部分硫酸钙(calcium sulfate CSC)复合bBMP材料在椎体强化中的实验研究 采用随机对照研究方案,将60只新西兰大白兔随机分为C1组、C2组、C3组、C4组(n=12)和假手术组(Sham,n=12)。C组按照实验一方法建立骨质疏松模型,实验分为假手术对照组(Sham),骨质疏松对照组(C1),注射PMMA组(C2),注射CSC组(C3),注射CSC/bBMP组(C4),通过模拟椎体成形术,分别在每只兔子L2、L4、L6椎体注射材料,每组均于术后24小时,6周、12周处死4只。①采用组织病理学对骨小梁结构进行组织病理学观察;②采用MicroCT对骨小梁微观三维结构进行分析;③采用生物力学实验评估椎体骨质的结构力学强度。通过“微观结构-宏观密度-功能强度”的方法,全面衡量硫酸钙和硫酸钙复合bBMP材料对脊柱骨质疏松的治疗作用。 四研究结果 第一部分:手术前,Sham组、OVX-A组和OVX-B组的腰椎BMD分别为(266.7±38.58)mg/cm2、(270.1±25.38)mg/cm2和(272.8±27.08)mg/cm2手术2个月后,Sham组、OVX-A组和OVX-B组的BMD分别为(281.8±39.22)mg/cm2、(248.9±26.14)mg/cm2和(199.9±30.76)mg/cm2。OVX-B组的BMD较术前平均下降为26.72%。组织学切片观察发现,去势2个月后,OVX-B组椎体及股骨松质骨骨小梁明显稀疏、变细,局部存在骨小梁骨折及骨缺损;而对Sham和OVX-A照组骨小梁结构完整,呈圆形或椭圆形拱形结构。MicroCT分析表明,OVX-B组的骨小梁三维构筑较Sham组及OVX-A组均有显著改变(骨小梁明显变细、连接率明显下降),而OVX-A组骨小梁结构与Sham组无显著性差别。生物力学研究显示,OVX-B组椎体抗压缩强度(6.8±2.02MPa)较Sham组(14.5±3.74MPa)和OVX-A组(12.8±3.12MPa)均有显著性降低,而OVX-A组与Sham组无显著性差异。 第二部分:组织形态学观察发现,CSC组和CSC/bBMP组骨小梁连接性在术后6周和12周明显优于C1对照组,形态较为规则,小梁间连接程度优于对照组。骨小梁变粗,骨折、微骨缺损处出现连接和修复;12周时骨小梁结构已经接近Sham对照组。MicroCT三维重建显示,6周时, CSC组和CSC/bBMP组骨小梁组的骨小梁三维结构参数明显优于C1对照组(P0.05),骨密度值也明显优于C1对照组(P0.05);12周时,已与Sham对照组无显著性差别。生物力学实验结果表明,在6周时,CSC组椎体的最大抗压缩强度有增加,但与C1对照组相比无显著性差异,而CSC/bBMP组椎体抗压缩强度在6周时显著高于C1对照组;在12周时,CSC组和CSC/bBMP组椎体最大抗压缩强度均较C1对照组有显著性差异(P0.05),与Sham组及PMMA组相比,未见显著性差异(P0.05)。 五结论 1.通过去势+甲强龙肌注的方法,可以在2个月内快速建立兔的骨质疏松模型。 2.兔骨质疏松模型建成后,二维及三维图像显示椎体松质骨内骨小梁稀疏、变细、断裂,微观三维构筑受到破坏,并且局部形成骨小梁微骨折及微骨缺损,最终导致其力学性能下降。是一种理想可用的骨质疏松动物模型。 3.CSC以及CSC为载体复合bBMP的注射型成骨材料具有强大的骨诱导能力,可以迅速有效地改善骨质疏松椎体骨小梁的三维构筑,提高其椎体力学强度,是具有良好应用前景的椎体充填材料。
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R580;R-332;R687

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8 朱海;健骨二仙丸防治骨质疏松症机理及蛋白质组研究[D];广州中医药大学;2002年
9 杨海涛;去势兔骨质疏松MR定量和功能成像:与骨密度、组织学对照研究[D];华中科技大学;2009年
10 邵敏;中药骨康对骨质疏松骨吸收与骨形成影响的研究[D];广州中医药大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李兴明;运用肝肾同源理论治绝经后骨质疏松症的探讨[D];广州中医药大学;2009年
2 安贵峰;核因子与白介素6在骨质疏松模型骨组织中的表达研究[D];中国医科大学;2005年
3 林新富;过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因多态性与老年男性骨质疏松症关系的研究[D];福建医科大学;2007年
4 赵圆;老年人腰椎骨密度与冠脉钙化积分的定量CT研究和相关性分析[D];新疆医科大学;2006年
5 张瑞芳;蒙古族妇女细胞色素P4503A7~*1C基因多态性与骨密度的关系[D];内蒙古医学院;2009年
6 贺琳;高血压及其辨证分型与骨质疏松的相关性研究[D];北京中医药大学;2008年
7 桂继琮;牛奶和钙强化豆浆对上海市绝经后妇女骨代谢的影响[D];复旦大学;2009年
8 李栋;不同注入材料在椎体成形术治疗骨质疏松椎体压缩性骨折中的实验研究[D];山西医科大学;2005年
9 刘垒;中药强骨煎剂对去卵巢大鼠骨质疏松症防治效果及机制探讨[D];山东中医药大学;2005年
10 刘达;钉道局部固化增强椎弓根螺钉固定强度的实验研究[D];第四军医大学;2008年
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