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新城疫病毒长春株NP、P、M基因的序列分析及其HN基因重组蛋白的免疫原性研究

王承宇  
【摘要】: 从我国长春地区分离、鉴定了一株新城疫病毒(NDV),命名为长春株。对NDV长春株部分生物学特性研究结果表明,长春株能凝集鸡和人(O型血)的红细胞,不能凝集猪、牛、山羊、绵羊和马的红细胞,MDT大于168h,ICPI为0.25,IVPI为0,表明长春株为一株弱毒株。 参考新城疫病毒相关毒株基因组序列设计了3对特异性引物,通过RT-PCR一次性扩增了NDV长春株NP、P、M蛋白基因编码区(ORF)序列,序列分析结果表明,NP、P、M基因的ORF长度分别为1470、1188、1095bp,分别编码490、396和365个氨基酸,与发表的NDV La sota、B1等13株相关基因相比较,核苷酸序列同源性分别为85.7%~99.1%、82.8%~96.9%、84.3%~99.7%,推导的氨基酸序列同源性分别为92.5%~99.3%、84.3%~95.9%、88.9%~99.1%。对NP、P、M基因同源性比较和系统发育进化树分析结果表明,长春株与La sota、B1等弱毒株之间具有很近的亲缘关系,与生物学特性研究结果相一致。 用Bac-to-Bac系统表达的长春株HN重组蛋白加弗氏完全和不完全佐剂制成抗原A和B,分两次免疫15日龄雏鸡,用间接ELISA和HI测定鸡体内抗体效价,结果表明,表达的NDV HN重组蛋白能诱导鸡体产生抗NDV HN蛋白抗体和HI抗体,能够抵抗NDV强毒攻击。


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