新城疫病毒长春株NP、P、M基因的序列分析及其HN基因重组蛋白的免疫原性研究

【摘要】： 从我国长春地区分离、鉴定了一株新城疫病毒(NDV)，命名为长春株。对NDV长春株部分生物学特性研究结果表明，长春株能凝集鸡和人(O型血)的红细胞，不能凝集猪、牛、山羊、绵羊和马的红细胞，MDT大于168h，ICPI为0.25，IVPI为0，表明长春株为一株弱毒株。 参考新城疫病毒相关毒株基因组序列设计了3对特异性引物，通过RT-PCR一次性扩增了NDV长春株NP、P、M蛋白基因编码区(ORF)序列，序列分析结果表明，NP、P、M基因的ORF长度分别为1470、1188、1095bp，分别编码490、396和365个氨基酸，与发表的NDV La sota、B1等13株相关基因相比较，核苷酸序列同源性分别为85.7％～99.1％、82.8％～96.9％、84.3％～99.7％，推导的氨基酸序列同源性分别为92.5％～99.3％、84.3％～95.9％、88.9％～99.1％。对NP、P、M基因同源性比较和系统发育进化树分析结果表明，长春株与La sota、B1等弱毒株之间具有很近的亲缘关系，与生物学特性研究结果相一致。 用Bac-to-Bac系统表达的长春株HN重组蛋白加弗氏完全和不完全佐剂制成抗原A和B，分两次免疫15日龄雏鸡，用间接ELISA和HI测定鸡体内抗体效价，结果表明，表达的NDV HN重组蛋白能诱导鸡体产生抗NDV HN蛋白抗体和HI抗体，能够抵抗NDV强毒攻击。