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《中国人民解放军军需大学》 2002年
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应用随机肽库鉴定猪瘟病毒E2蛋白抗原表位

肖昌  
【摘要】: 自1985年G P Smith首次提出噬菌体展示技术以来,随着生物技术的发展,噬菌体随机肽库已成为研究分子间相互作用的有力工具,特别是在抗原表位研究方面。 猪瘟病毒E2蛋白是病毒的主要结构糖蛋白,能诱导猪产生中和性抗体,因而是主要的保护性抗原,因此研究E2蛋白具有重要的理论和实际意义。本室利用E2基因疫苗制备了多株单抗,为E2的抗原表位研究提供了条件,我们以噬菌体随机12肽库分析鉴定了猪瘟病毒E2蛋白的抗原表位,为深入研究猪瘟病毒的抗原结构、制备更有效的诊断试剂和疫苗提供更多理论依据。 在本实验中,利用随机12肽库对抗猪瘟病毒(classical swine fever virus CSFV)糖蛋白mE2的单抗A11进行表位筛选,经过四轮筛选以后,随机挑取11个克隆作竞争-ELISA检测,结果表明,所挑11个克隆中,有9个克隆能对mE2蛋白和A11反应产生抑制作用,抑制率最高可达64%;DNA测序以后经过DNASTAR软件分析,发现它们的核心序列为ANWRALSL,该核心序列与猪瘟病毒E2蛋白的28-35位氨基酸TTWKEYSH具有同源性;夹心-ELISA检测和Western-Blotting试验均证明所挑阳性克隆能被A11所识别;人工合成含核心序列的多肽经间接ELISA试验证实,也能被A11识别。从而证明核心序列能模拟A11所针对的抗原表位。研究结果提示单抗A11所针对的抗原表位位于E2蛋白的28—35位氨基酸。该区域可能是CSFV E2一个新的抗原表位。
【学位授予单位】:中国人民解放军军需大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:S852.65

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【引证文献】
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【参考文献】
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1 刘北一,李一,富宁,齐杰,王莉,于春雷;三种检测噬菌体阳性克隆的ELISA比较[J];免疫学杂志;1998年01期
2 马刚,李作生,余兴龙,刘思国,涂长春;猪瘟病毒保护性抗原E2蛋白单抗的制备及其抗原表位的初步分析[J];中国兽医学报;2002年02期
【共引文献】
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1 龚真莉;刘光远;陈国栋;;猪瘟的流行病学特点、诊断与控制措施[J];安徽农学通报;2007年04期
2 韩芬霞;陈春刚;王清华;;猪肾组织中DNA提取的研究[J];安徽农业科学;2006年04期
3 韩芬霞;;猪肝脏基因组DNA提取与纯化的研究[J];安徽农业科学;2006年16期
4 谢昆;王传铭;林丽飞;王栋;李河;;鸡γ-干扰素的克隆·表达和序列分析[J];安徽农业科学;2008年17期
5 周先汉;王亚东;朱稀檩;周坤;;豆制品(茶干)中致腐菌的分离鉴定[J];安徽农业科学;2009年12期
6 金来武;刘伟成;潘争艳;裘季燕;刘学敏;;拮抗链霉菌AFLP分析技术体系的研究[J];安徽农业科学;2009年18期
7 高健,许晓风,乌慧玲,陈学平,周家昊;特异种质烟草全长cDNA文库的构建及质量分析[J];安徽农业大学学报;2004年01期
8 谢昆;陶宏征;王传铭;李河;林丽飞;王栋;;鸡柔嫩艾美耳球虫免疫调节型DNA疫苗pEtK2-IFN-γ的构建[J];安徽农业大学学报;2009年02期
9 江千里;孟凡义;江汕;杨柳;李冰;宋兰林;冯茹;周淑芸;;bcr-abl P210和abl基因实时荧光定量PCR检测共用质粒标准品的制备及应用[J];白血病.淋巴瘤;2007年03期
10 徐意;刘健;;SELEX技术及其在治疗领域应用的研究进展[J];湖南文理学院学报(自然科学版);2009年02期
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1 张华鹏;张剑峰;刘俊莹;王聪聪;;马铃薯病毒(PVY、PVS和PLRV)的三重RT-PCR检测[A];马铃薯产业与科技扶贫(2011)[C];2011年
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1 刘祖勇;;增加洗板次数对HBsAg ELISA检测结果的影响[J];中国输血杂志;2006年02期
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3 林海丹,江庆娣,伍绍登;饲料中盐酸克伦特罗含量的检测[J];饲料工业;2000年01期
4 吴存悌;生猪“瘦肉精”问题的现状与对策[J];福建畜牧兽医;2001年02期
5 刘风华,刘锋,邓延倬,曾云鹗,卓仁禧;现代免疫分析技术研究进展[J];分析科学学报;1995年01期
6 黄丽群,郑捷;从噬菌体肽库中筛选抗原模拟表位的研究进展[J];国外医学.皮肤性病学分册;2004年06期
7 俞世荣;刘江;孟昭赫;;展青霉素研究进展[J];国外医学(卫生学分册);1996年01期
8 周克权;展青霉素的化学检测方法[J];国外医学(卫生学分册);2001年01期
9 刘晓波,蔡美英,王霞,李喜荣;一种简单实用纯化腹水McAb方法——辛酸/硫酸铵法[J];华西医科大学学报;1999年04期
10 武婕,陈惠鹏;噬菌体肽库研究进展[J];军事医学科学院院刊;2000年01期
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1 张扬;利用噬菌体展示肽库筛选和鉴定沙门氏菌O9抗原的模拟表位[D];扬州大学;2001年
2 张晖;用噬菌体展示技术筛选Gal-α1,3-Gal的模拟肽[D];浙江大学;2003年
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6 于洪侠;莱克多巴胺酶联免疫吸附法(ELISA)的建立[D];中国农业科学院;2005年
7 江湖;黄曲霉毒素B_1间接竞争ELISA检测方法的建立与单克隆抗体免疫亲和柱的初步研制[D];南昌大学;2005年
8 游淑珠;小麦、玉米中DON气相色谱检测方法的建立及OTA单克隆抗体免疫亲和柱的研制[D];南昌大学;2005年
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1 王丹;许杨;何庆华;黄志兵;康敏;;Elispot assay检测牛奶中庆大霉素[J];食品与生物技术学报;2011年02期
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1 陆健康;抗玉米赤霉烯酮和抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇抗体的制备及性质分析[D];华中农业大学;2010年
2 邢锦城;禾谷镰刀菌致病相关基因的鉴定及其毒素DON特异亲和肽段的淘选[D];南京农业大学;2010年
3 王瑶;食品中桔霉素快速检测方法的研究[D];山东师范大学;2012年
4 刘小兴;氯胺酮噬菌体模拟表位酶联免疫吸附法(ELISA)的建立[D];南昌大学;2007年
5 杨史良;益生菌清除脱氧雪腐镰刀菌烯醇的作用研究[D];南昌大学;2007年
6 冯香玲;采用SELEX技术筛选脱氧雪腐镰刀菌烯醇适配子的初步研究[D];南昌大学;2007年
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8 康敏;玉米中伏马菌素B_1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫学快速筛选方法研究[D];南昌大学;2012年
【二级参考文献】
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1 李全喜,王琰,李竞,王雅明,徐建军,王力民,董志伟;从噬菌体短肽库中筛选单克隆抗体识别的抗原表位[J];中华微生物学和免疫学杂志;1997年01期
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1 刘珂;周斌;黄杰;尹可;卿泰安;黎满香;;猪瘟病毒E2蛋白抗原表位的表达与免疫活性研究[J];动物医学进展;2008年05期
2 张春玲;宗先伟;杨文超;张敬梅;彭明义;程宝艳;余为一;;猪瘟病毒E2蛋白A/D区单抗的制备及其抗原表位的初步研究[J];中国畜牧兽医;2009年09期
3 马刚,李作生,余兴龙,刘思国,涂长春;猪瘟病毒保护性抗原E2蛋白单抗的制备及其抗原表位的初步分析[J];中国兽医学报;2002年02期
4 徐学清,郑其升,曹瑞兵,苏小运,陈溥言;猪瘟病毒E2蛋白B/C抗原区基因在毕赤酵母中的表达与鉴定[J];中国生物工程杂志;2004年09期
5 王爱萍;马丽平;李姣;邓瑞广;邢广绪;郝慧芳;;猪瘟病毒E2蛋白B细胞识别基序的筛选[J];中国兽医科学;2008年12期
6 汤波;范学政;徐璐;王琴;黄伟;刘俊;沙莎;陈蕾;周远成;;应用CSFV-E2基因噬菌体肽库筛选猪瘟病毒抗原表位[J];中国兽医杂志;2009年04期
7 张青婵,刘思国,徐兴然,余兴龙,涂长春;猪瘟病毒E2蛋白4重复抗原表位的构建及抗原活性研究[J];高技术通讯;2003年10期
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9 韩雪清,刘湘涛,任芳丽,冯卫权,张涌,谢庆阁;猪瘟病毒E_2蛋白在酵母中分泌表达条件的优化[J];畜牧兽医学报;2003年06期
10 徐学清,张素芳,郑其升,苏小运,任雪枫,陈溥言;猪瘟病毒E2蛋白A/D抗原区基因在酵母中的分泌表达与鉴定[J];中国病毒学;2004年06期
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1 张青婵;刘思国;徐兴然;余兴龙;涂长春;;猪瘟病毒E2蛋白4重复抗原表位的构建及抗原活性研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
2 刘思国;涂长春;余兴龙;张茂林;刘伯华;吴健敏;;猪瘟病毒E2蛋白抗原单表位基因的融合表达及其免疫活性的研究[A];第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集[C];2005年
3 肖昌;余兴龙;张茂林;徐兴然;涂长春;张玉静;;利用随机肽库鉴定猪瘟病毒E2蛋白抗原表位[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
4 肖昌;涂长春;;猪瘟病毒囊膜蛋白抗原表位的研究进展[A];猪的重要传染病防治研究新成果——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第五届理事会第二次全体会议暨防检疫专业委员会第7次学术交流会论文集[C];2002年
5 李作生;余兴龙;张茂林;乔红伟;程从升;扈荣良;涂长春;;猪瘟病毒E2抗原单表位4重复基因兔体免疫保护研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集[C];2006年
6 王琴;王在时;李博;丘惠深;郎洪武;;猪瘟病毒强弱毒株和野毒株E2全基因序列测定及比较分析[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年
7 夏照和;彭伍平;成丹;侯强;王万利;孙元;仇华吉;;用免疫抑制法制备猪瘟病毒野毒株E2蛋白的特异性单克隆抗体[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集[C];2008年
8 朱妍;史子学;Trevor W.Drew;涂长春;;我国猪瘟病毒流行毒株抗原性分析[A];第四届中国畜牧科技论坛论文集[C];2009年
9 刘思国;马刚;余兴龙;张茂林;涂长春;;猪瘟病毒E2糖蛋白抗原表位的预测、多肽合成及特性研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
10 贾洪林;仇华吉;李国新;朱庆虎;李娜;童光志;;猪瘟病毒E~(rns)和E2基因的高效表达与E~(rns)-ELISA鉴别诊断方法的建立[A];中国生物化学与分子生物学会农业生物化学与分子生物学分会第六次学术交流会论文集[C];2004年
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1 中国兽药监察所 副研究员 王琴;猪瘟病毒E2基因的研究进展及其应用[N];中国畜牧水产报;2000年
2 香港麦迪信医学出版有限公司供稿;DnaE2蛋白:结核杆菌耐药的罪魁祸首[N];医药经济报;2003年
3 行唐县畜牧局兽医防疫站 金秀英;猪发高烧会是得啥病[N];河北科技报;2009年
4 本报记者 李彬;南非发现肺结核抗药蛋白[N];科技日报;2003年
5 本报记者 姜楠;让百姓吃到放心猪肉[N];吉林日报;2008年
6 云南省红河州开远市中和营镇畜牧兽医站 宋超 开远市动物卫生监督所 张金德;双月子猪高烧不退发病原因及防治措施[N];中国畜牧兽医报;2009年
7 张建刚;当前猪瘟流行的新特性[N];中国畜牧报;2003年
8 ;猪瘟疫苗免疫失败原因分析及对策[N];中国畜牧兽医报;2009年
9 袁华;猪夏季高热性疾病的防治[N];江苏农业科技报;2010年
10 瑞普(天津)生物药业有限公司 李刚 谢雪松;控制商品子猪综合征有效办法初探[N];中国畜牧兽医报;2009年
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1 李殿明;新型猪瘟黏膜疫苗及检测试剂盒的研究[D];中国海洋大学;2008年
2 韩雪清;猪瘟病毒E2基因遗传变异及体外表达研究[D];西北农林科技大学;2002年
3 郭焕成;猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒寡核苷酸芯片的研究与应用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
4 刘伯华;猪瘟病毒E2基因在大肠杆菌中的高效表达及其表达产物的制备[D];中国人民解放军军需大学;2002年
5 郭爱疆;猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原表位及组织定位的研究[D];甘肃农业大学;2010年
6 商绍彬;猪圆环病毒衣壳蛋白抗原表位的精细定位与间接ELISA检测技术[D];浙江大学;2007年
7 王艳华;弓形虫代谢分泌抗原和表面蛋白1抗原表位研究[D];中国农业科学院;2011年
8 赵兰娟;丙型肝炎病毒E2蛋白引发细胞跨膜信号转导异常与致病性研究[D];第二军医大学;2002年
9 李峥;高致病性禽流感H5N1病毒血凝素蛋白中和抗原表位鉴定及其跨物种传播规律的研究[D];北京协和医学院;2009年
10 任艳;牛病毒性腹泻病毒囊膜蛋白E2与牛胚胎滋养层细胞相互作用的分子机制研究[D];石河子大学;2010年
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1 肖昌;应用随机肽库鉴定猪瘟病毒E2蛋白抗原表位[D];中国人民解放军军需大学;2002年
2 徐和敏;猪瘟病毒E2基因噬菌体展示多肽库的构建及表位研究[D];中国兽医药品监察所;2007年
3 马钢;猪瘟病毒E2蛋白单抗的制备、纯化及其抗原表位的初步研究[D];中国人民解放军军需大学;2001年
4 徐璐;猪瘟间接ELISA和猪瘟及主要繁殖障碍病的荧光PCR技术的研究[D];中国兽医药品监察所;2005年
5 夏照和;特异性识别猪瘟病毒野毒株的单克隆抗体的制备[D];中国农业科学院;2008年
6 刘瑞峰;猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2的表达研究及其单克隆抗体的制备[D];华中农业大学;2008年
7 李素;猪瘟病毒E2蛋白及其重复抗原表位的原核表达和特异抗血清制备[D];吉林大学;2007年
8 姚淑瑜;猪瘟病毒E2基因杆状病毒转移载体的构建及病毒诱导细胞凋亡的研究[D];广西大学;2004年
9 袁朝霞;广西猪瘟病毒扁桃体和流产胎儿来源株E2基因的克隆、测序及遗传学分析[D];广西大学;2004年
10 赵晶;东方马脑炎病毒E2蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定[D];中国农业科学院;2012年
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