收藏本站
《中国人民解放军军医进修学院》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

醛固酮对人单核巨噬细胞THP-1分泌IL-8的调控研究

陈亚巍  
【摘要】:背景和目的: 醛固酮,作为肾素-血管紧张素-醛固酮系统的一个主要成员,负责调控肾脏、结肠的离子转运,维持水、电解质的平衡。许多研究发现,在严重应激病人的体内肾素-血管紧张素-醛固酮系统被明显激活,血清中醛固酮的水平也明显升高。长久以来,人们认为醛固酮可促进高血压和心肌纤维化的发生,通过促进心肌成纤维细胞增殖和胶原的合成,导致心肌重构和心肌功能低下。醛固酮可发挥经典的基因组作用,通过与细胞内盐皮质激素受体结合,进而影响靶蛋白的转录和合成。但是,研究发现,醛固酮也可通过与细胞膜受体结合发挥非基因组作用,主要特点是作用迅速(数分钟内),不被ALD受体拮抗剂螺内酯所抑制,也有证据显示有些非基因作用方式是由MR介导的,能够部分被螺内酯所抑制。Toll样受体广泛存在于天然免疫细胞膜上,是感知外源性或内源性损伤物质的“哨兵”。应激后,组织受到损伤,细胞应激或者降解导致某些物质释放或者分泌,与Toll样受体4结合后介导一系列的炎性反应。Toll样受体4可识别一系列的内源性识别分子,如高迁移率簇蛋白,透明质烷片段,热休克蛋白,硫酸乙酰肝素和纤维蛋白原等。研究发现严重应激后常引起肾素-血管紧张素-醛固酮系统兴奋,并伴以不同程度的血管紧张素、醛固酮水平上调等,它们可能在一定程度上影响免疫功能。本研究探讨应激后机体神经内分泌系统对免疫识别受体-Toll样受体4信号通路的影响,研究醛固酮调控THP-1细胞分泌IL-8的作用与机制,证实醛固酮通过Toll样受体4调控机体的免疫应答。 方法: 本实验利用药物干预的方法模拟体内应激状态模型,通过酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)动态检测细胞培养上清IL-8的分泌量,确定药物干预的最佳剂量和最佳作用时间,并通过实时荧光定量PCR(polymerase chain reaction)方法观察在给予拮抗剂治疗下,IL-8的mRNA的改变和受体表达的变化,进一步研究醛固酮在应激状态下调控IL-8分泌的信号传导通路及各信号通路之间的相互作用,同时研究醛固酮受体拮抗剂-螺内酯和Toll样受体4单克隆抗体的干预效果。计量资料以均数士标准差(x±s)表示,采用CHISS2007软件对数据进行单因素方差分析(analysis of variance, ANOVA),组间两两比较采用SNK-q(student-newman-keuls,SNK-q)检验,P0.05表示有统计学意义。 结果: 实时荧光定量PCR和免疫细胞荧光结果显示,人单核巨噬细胞THP-1有盐皮质激素受体和Toll样受体表达。将四个剂量的醛固酮(10nM,102nM、103nM和104nM)与THP-1细胞共孵育5min、30min、2h、6h和12h,以ELISA方法发现醛固酮在2h后可明显上调THP-1细胞IL-8的分泌,四个剂量分别为对照组的1.11,2.28,1.63和1.68倍,并随时间逐渐增高,12h达到高峰;PCR结果显示醛固酮与THP-1细胞共孵育30min后,THP-1细胞IL-8 mRNA的表达为对照组的4.47倍,12h达到高峰。102nM的醛固酮与THP-1细胞孵育12h后,应用终浓度为10μg/μl的TLR4单克隆抗体和10-6M的螺内酯进行干预,其对IL-8 mRNA的表达量均明显降低(P0.05)且TLR4单克隆抗体和螺内酯同时作用,对阻断IL-8的分泌和合成具有协同作用。 结论: 人单核-巨噬细胞THP-1存在盐皮质激素受体MR和Toll样受体4(TLR4)。醛固酮可呈时间依赖性增加THP-1细胞的IL-8分泌,且这种上调IL-8分泌的作用不是通过非基因组途径,而是通过经典的MR受体介导的,且可被MR的特异性受体拮抗剂螺内酯阻断。醛固酮刺激THP-1细胞分泌IL-8,也可被TLR4的单克隆抗体部分阻断。螺内酯和TLR4的单克隆抗体对于ALD刺激THP-1细胞分泌IL-8的阻断具有协同作用。醛固酮可以通过上调TLR4受体的蛋白表达水平,参与对机体的免疫调控机制。
【学位授予单位】:中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R392.3

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 徐艳秋;王洪巨;;慢性应激大鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的变化及其对心率和血压的影响[J];蚌埠医学院学报;2011年02期
2 王川;张少玲;;盐皮质激素受体的结构和功能[J];国际内科学杂志;2009年12期
3 王健;郭志军;;醛固酮与肾间质纤维化关系的研究进展[J];河北医药;2008年07期
4 张颖;谢晓华;张海峰;任青爱;;截肢后大鼠血浆及肝肾组织中硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶含量的变化[J];中华保健医学杂志;2008年02期
5 张海峰;谢晓华;张颖;任青爱;;内源性硫化氢在大鼠截肢术后肺损伤中的变化及意义[J];中华保健医学杂志;2008年02期
6 欧红芹;马向华;沈捷;沈海军;;白细胞介素6对人单核/巨噬细胞系细胞表面Toll样受体4表达的影响[J];南京医科大学学报(自然科学版);2010年03期
7 张霞;王卫庆;;醛固酮与顽固性高血压[J];上海交通大学学报(医学版);2010年05期
8 高文涛,张一楚;肾素-血管紧张素系统对细胞免疫的调节作用[J];上海免疫学杂志;2003年04期
9 周海洋;肖林;陈宜张;;盐皮质激素的非基因组作用及其机制[J];生理科学进展;2008年01期
10 陈亚巍;谢晓华;任青爱;张海峰;张颖;;螺内酯对截肢创伤致大鼠心肌线粒体损伤的拮抗[J];心脏杂志;2009年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张溢华;陈礼刚;;Toll样受体4与动脉粥样硬化[J];重庆医学;2012年12期
2 张乐逸;张宇飞;嵇武;;Toll样受体4的研究进展和临床意义[J];肠外与肠内营养;2009年02期
3 杨丽芬;何芳;章坚;尹飞;;PD-1对小鼠内毒素血症的保护作用及其机制研究[J];中国当代儿科杂志;2010年10期
4 郭江宏;吕艳红;石国平;郭再萍;徐琴;沈建宏;马根山;;螺内酯对经皮冠状动脉介入治疗围手术期的心肌保护作用[J];第二军医大学学报;2011年08期
5 周辉;高洪;严玉霖;周铭涛;肖鹏;;内源性气体信号分子H_2S研究进展[J];动物医学进展;2009年06期
6 周文煜;陈文莉;黄安斌;李永吉;朱虹;黄志勇;;来氟米特对BXSB小鼠肾组织NF-κB的影响[J];广东医学;2009年12期
7 程书榜,王成友,徐敏;温生理盐水持续腹腔灌洗预处理对大鼠急性胰腺炎的影响[J];肝胆外科杂志;2003年01期
8 王健;郭志军;;醛固酮与肾间质纤维化关系的研究进展[J];河北医药;2008年07期
9 王志勤;;具有强烈无机物代谢作用的甾体激素——Aldosteron[J];化学通报;1960年07期
10 祝筱姬;赵超;张定益;张春梅;任婧婧;郭思润;;不同飞行条件下飞行员血清催乳素、雌二醇、醛固酮的变化[J];航天医学与医学工程;2012年01期
中国博士学位论文全文数据库 前7条
1 王永慧;原发性醛固酮增多症及库欣综合征肾上腺组织中Rac1、盐皮质激素受体mRNA及蛋白的表达[D];北京协和医学院;2011年
2 杨晨;NF-κB转录活性变化对大鼠脊髓神经细胞凋亡的影响及其与p75NTR关系的实验研究[D];吉林大学;2004年
3 李悦;腺病毒介导载脂蛋白A-I在LPS诱导的小鼠系统性炎症和组织损伤中的保护作用[D];复旦大学;2008年
4 李淑雯;缩泉丸对醛固酮合成与分泌的调控机制研究[D];广州中医药大学;2009年
5 王永堂;TLR4基因启动子区SNPs及其与严重创伤病人预后的关联研究[D];第三军医大学;2009年
6 郎莉莉;MD-2在人角膜上皮细胞应答LPS刺激中的作用研究[D];第二军医大学;2010年
7 焦静;TLR4基因编码区非同义SNPs对LPS刺激反应及MFHAS1调控TLR4信号通路的研究[D];复旦大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 柏金明;安体舒通延缓大鼠慢性移植肾肾病进程的实验研究[D];南京医科大学;2010年
2 黄华;Toll样受体4基因(TLR4)多态性与胃癌易感性的关联研究[D];南京医科大学;2010年
3 刘灵;TLR3、TLR4及TNF-α与特发性胎儿生长受限发病的关系[D];郑州大学;2010年
4 衣菲;糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞TLR4表达的研究[D];中国医科大学;2010年
5 郭宝平;SATB1基因与乳腺癌的关系研究[D];广西医科大学;2011年
6 杨靖;全肝缺血再灌注后胃损伤的机制及防护的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
7 赵兴旺;鸡TLR4不同突变基因型对抗肠炎沙门氏菌感染的差异[D];中国农业科学院;2011年
8 周强平;骨桥蛋白靶向干扰对环孢素A诱导的肾小管上皮细胞向间充质转变的影响[D];南京医科大学;2011年
9 黄方;结核菌素纯蛋白衍生物刺激人γδT细胞效应分析[D];重庆医科大学;2011年
10 李敏悦;蝇类活动对牛呼吸率、心率、细胞因子、生产性能的影响及愤怒应激模型的建立[D];内蒙古农业大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 耿彬,杜军保,唐朝枢北京大学第一医院心血管研究所;敏感硫电极法在测定心血管组织细胞及血浆胱硫醚-γ-裂解酶/硫化氢的应用[J];北京大学学报(医学版);2005年05期
2 任青爱;谢晓华;张颖;张海峰;;截肢创伤对大鼠心肌硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系的影响[J];中华保健医学杂志;2008年02期
3 常芳,李凌,常庆;硫化氢对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用[J];中原医刊;2005年09期
4 王继征;王凤;阚国庆;张国清;李广军;;慢性充血性心力衰竭抗醛固酮治疗对神经内分泌和性激素的影响[J];心脏杂志;2007年02期
5 罗俊;侯良平;燕纯伯;;顽固性高血压的评估和治疗[J];心血管病学进展;2008年04期
6 陈晓波,杜军保,耿彬,蒋宏峰,唐朝枢;硫化氢对培养的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用[J];中国病理生理杂志;2003年08期
7 谢晓华,王士雯,唐朝枢,叶平,马卫东,卢丽华,刘秀云;螺内酯预防L-硝基精氨酸诱导持续性高血压大鼠心肌重塑[J];中国循环杂志;1997年06期
8 吴平生,粱欣伟,戴云,刘宏,臧燕,郭志刚,张榕华,赖文岩,张远慧,刘伊丽;Aldosterone biosynthesis in extraadrenal tissues[J];Chinese Medical Journal;1999年05期
9 邓次妮;沈潞华;唐朝枢;李虹伟;;醛固酮对血管外膜诱导型一氧化氮合酶/一氧化氮通路影响的实验研究[J];中华心血管病杂志;2007年05期
10 赖凌云,顾勇,陈靖,郁胜强,马骥,杨海春,林善锬;大鼠系膜细胞醛固酮的合成及其对细胞外基质生成的影响[J];中华医学杂志;2003年21期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 朱建华,彭文辉;同型半胱氨酸对人THP-1巨噬细胞IL-8 mRNA及其蛋白表达的影响[J];中国病理生理杂志;2004年09期
2 徐青,彭东信,刘作志;IL-8在哮喘发病机制中的意义探讨[J];免疫学杂志;1997年01期
3 顾大勇,李艳,陈莉,马布仁,杨季云,曾祥元;LPS的直接诱导对肺微血管内皮细胞IL-8的表达及对PMN趋化作用影响的研究[J];中国微循环;2003年04期
4 孙江;刘琼;章锦才;;慢性牙周炎患者牙龈组织中IL-8的检测[J];南方医科大学学报;2008年07期
5 张蜀;孙常丽;曹钰;;非洛地平对动脉粥样硬化大鼠血清IL-8的影响[J];西部医学;2009年02期
6 黄志洪;袁少英;覃湛;李慎果;张兆磊;;慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液TNF-α、IL-8的检测及临床意义[J];中国医药导报;2009年14期
7 符起亚;邓芳成;张治汉;钱士匀;吴文川;;慢性牙周炎患者白细胞介素-8的检测[J];重庆医学;2009年14期
8 顾文莉;杨佳佳;;口腔鳞状细胞癌患者血清IL-8的表达及临床意义[J];上海口腔医学;2011年01期
9 陈维飞;;强直性脊柱炎患者血清IL-18水平及临床意义[J];现代预防医学;2011年15期
10 刘继明,张毅,朱华亭,邱玉华,王江方,冯丽瑾,张学光;IL-8单克隆抗体的研制及其生物学活性研究[J];中华微生物学和免疫学杂志;2000年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 黄先菊;Awais Ishan;王旭;王玉莲;戴梦红;陈冬梅;袁宗辉;;自由基介导的喹噁啉类肾上腺毒性及其对醛固酮分泌的影响[A];中国毒理学会第三届中青年学者科技论坛暨2011年全国前列腺药理毒理学研讨会论文集[C];2011年
2 何乐中;李俊纬;黄克勤;钱拉拉;;电针配合中药熏蒸对慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液中IL-8和TNF-α的影响[A];2011中国针灸学会年会论文集(摘要)[C];2011年
3 黄志洪;袁少英;覃湛;李慎果;张兆磊;;慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液TNF-α、IL-8测定的检测及临床意义[A];中华中医药学会第十届男科学术大会论文集[C];2010年
4 刘清平;陈纪藩;林昌松;徐强;关彤;陈光星;刘丽娟;刘琼;田黎;余晓芬;;通痹合剂2号对胶原诱导型关节炎大鼠IL-8的影响[A];全国第八届中西医结合风湿病学术会议论文汇编[C];2010年
5 庞伟;兰晓梅;王成彬;;支气管上皮细胞和嗜中性粒细胞联合培养对IL-8表达的影响[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
6 曾诚;姜铁民;周欣;罗悦晨;李玉明;;B型利钠肽对脂多糖诱导的THP-1源性巨噬细胞表型偏移的影响[A];第十三次全国心血管病学术会议论文集[C];2011年
7 段友红;李凤云;;氧化应激下伤寒沙门菌对THP-1细胞凋亡影响的研究[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
8 张铭;陈怀生;杨大春;曾智;余敏;;同型半胱氨酸对血管内皮细胞的氧化应激损伤及对IL-8分泌的影响[A];全国第九届心脏学会第十二届心功能学会《心脏杂志》编委会联合学术会议论文集[C];2005年
9 曾祥元;顾大勇;李洁廉;廉维;陈莉;刘金标;;脂多糖对肺微血管内皮细胞IL-8表达的影响及其调控机理[A];中国微循环学会第五届中国微循环学术大会论文摘要汇编[C];2004年
10 郭文昀;宋耀明;黄岚;苏华科;董红梅;党涛;;脂联素对人脐静脉内皮细胞MCP-1和IL-8表达的影响[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈亚巍;醛固酮对人单核巨噬细胞THP-1分泌IL-8的调控研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
2 文宇;醛固酮激活胰岛素样生长因子1受体诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的研究[D];中南大学;2009年
3 刘抗寒;醛固酮诱导DOT1/AF9调控ET1表达在糖尿病肾病发病机制中的作用[D];中南大学;2010年
4 李永乐;天津市区成人高血压患者亚临床靶器官损害的流行病学特征及与血清醛固酮水平的关系[D];天津医科大学;2011年
5 尚芝群;IL-8对前列腺癌进展作用机制的实验研究[D];天津医科大学;2009年
6 杨阳;骨桥蛋白对人膝骨关节炎软骨细胞IL-6和IL-8表达的影响[D];中南大学;2012年
7 辛辉;Lp-PLA_2和IL-8与动脉粥样硬化关系的研究[D];山东大学;2010年
8 庄世虹;Visfatin诱导THP-1源性泡沫细胞形成的机制研究[D];华中科技大学;2010年
9 刘玮;肺炎衣原体诱导THP-1源性巨噬细胞胆固醇代谢稳态失衡的信号机制研究[D];华中科技大学;2010年
10 王笑丹;昆仙胶囊治疗类风湿关节炎临床疗效评价及对CIA大鼠IL-8、γIP-10影响[D];广州中医药大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 胡云凤;斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)IL-8基因cDNA的克隆及组成型表达分析[D];暨南大学;2010年
2 徐磊;纳米氧化锌颗粒诱导BEAS-2B细胞IL-8基因表达的机制[D];郑州大学;2010年
3 徐韶连;慢性非特异性溃疡性结肠炎湿热内蕴证肠黏膜病理及TNF-a、IL-8分泌水平研究[D];福建中医药大学;2010年
4 武会敏;微钛钉支抗负载前后周围液体中IL-8及sICAM-1水平的研究[D];山西医科大学;2011年
5 左英;发疹型药疹、大疱性表皮坏死松解型药疹患者血清中TNF-a、IL-8水平变化与临床关系的研究[D];吉林大学;2004年
6 仇雅芬;IL-8在TCT宫颈脱落细胞中的表达及意义[D];山西医科大学;2010年
7 李勇;七氟醚后处理对体外循环下成人单瓣置换术中血清肌钙蛋白T及IL-6、IL-8浓度的影响[D];泸州医学院;2010年
8 冯艳;通腑泄热法治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期临床观察及对IL-8的影响[D];广州中医药大学;2011年
9 李霖;IL-8在局灶性脑缺血中的变化及地塞米松对其的影响作用的研究[D];吉林大学;2006年
10 李赟;白细胞介素8基因-251A/T多态性与急性胰腺炎易感性及病情程度的相关性研究[D];福建医科大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026