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《中国人民解放军军医进修学院》 2011年
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肾移植受者PD-1/PD-L1信号通路的基础和临床研究

王雅文  
【摘要】:研究背景:负性调控共刺激分子PD-1 (programmed death-1)为T、B淋巴细胞表面受体,属于免疫球蛋白超家族Ⅰ型跨膜糖蛋白,生理条件下在淋巴细胞表面少量表达,在T、B细胞抗原受体激发后呈诱导性表达。PD-1与其两个配体PD-L1和PD-L2结合,在免疫应答中起着负性调控作用。关于PD-1/PD-L信号通路与临床疾病的关系,如自身免疫性疾病、肿瘤、病毒感染、移植等,其表现的免疫调节作用受到越来越多的关注。 目的:本课题通过对比肾移植术前术后与健康对照者外周血单个核细胞表面PD-1的表达,了解PD-1与器官移植耐受的相关性;以及进一步探讨肾移植术后发生急性排斥反应时检测PD-1mRNA的表达能否其作为器官移植术后急性排斥反应预警;同时探讨PD-1分子在器官移植患者外周血淋巴细胞上的表达与循环中CD4+CD25highTreg的相关性,从而进一步研究其诱导免疫耐受的机制。 方法:应用实时定量RT-PCR技术和流式细胞学技术分别检测PD-1在健康对照者组和肾移植受者术前术后外周血上表达情况;应用RT-PCR技术检测PD-1mRNA在肾移植术后急性排斥反应受者外周血的表达,免疫组化方法用来进一步鉴定PD-1的表达;应用单向混合淋巴细胞培养和流式细胞学检测进一步探讨PD-1通路和CD4+CD25highTreg细胞的相关性从而研究其诱导免疫耐受的机制;应用SPSS16统计软件统计临床及实验数据。 结果:实时定量RT-PCR检测健康对照组、肾移植d0组、肾移植后d28组PD-1mRNA相对表达量,使用Kruskal-Wallis法秩和检验法,健康对照组1.5±1.101,肾移植d0组4.221±1.106,肾移植后d28组9.633±2.101,三组间两两比较P0.01,差异有统计学意义。PD-1的表达随病程阶段呈现先降低后增高的趋势,流式细胞学检测PD-1+CD3+Tcell百分比呈现先增高后降低的趋势。应用Kruskal-Wallis检验,三组外周血中PD-1mRNA的相对表达量发现急性排斥反应受者外周血PD-1mRNA显著高于肾功能稳定者,P0.01.三组中位数值分别为4.52±1.1,1.12±0.6,0.7±0.4。PD-1mRNA的相对表达量与急性排斥反应患者血清肌酐呈正比关系。使用Spearman's相关检验(r=0.81,P=0.03),在急性排斥反应患者组发现了PD-1mRNA和血清肌酐的显著相关性Spearman's相关检验(r=0.81,P=0.03)。而移植肾功能延迟恢复受者(r=0.02,P=0.73)、移植肾功能稳定受者(r=0.06,P=0.58)不具有这种相关性。急性排斥反应发生时PD-1mRNA表达与急性排斥反应的严重性呈正相关。使用Spearman's相关检验,我们观察到在急性排斥反应患者组PD-1mRNA的相对表达量和从肾移植手术到发生急性排斥反应时间的显著相关性(r=-0.71,P=0.04)。同时我们用免疫组化的方法证实了急性排斥反应时浸润淋巴细胞表面大量PD-1的表达。三组均显CD4+CD25+Treg表面PD-1的表达比CD4+CD25-Treg表面PD-1的表达高,具有统计学差异;而三组之间比较发现,急排组PD-1的表达水平和CD4+CD25highTreg最高,具有统计学差异。单向混合淋巴细胞培养后检测到逐渐减少的CD4+CD25+Treg数量,分别为19.1%(处理组)、27.4%(对照组),而CD69在受抑制的CD4+CD25-细胞上的表达增加,分别为41.2%(处理组)、25.1%(对照组)。这些结果说明在急性排斥反应患者外周血PBMC的体外实验中,PD-1通路的抑制可能调节CD4+CD25+Treg细胞的功能,从而导致被CD4+CD25+Treg细胞抑制的T细胞的激活。 结论:PD-1在健康人群中可有表达,肾移植术前组、肾移植术后组明显高于健康对照组,具有显著统计学差异,并且肾移植术后不同时间点PD-1mRNA呈先降低后升高的趋势,PD-1+CD3+T细胞比例呈现先降低后增高的趋势;肾移植术后早期PD-1mRNA表达升高可以作为排斥反应的预警信号指导临床治疗,同时患者PD-1表达与急性排斥反应严重程度呈正比,和发生急性排斥反应的时间呈反比,免疫组化结果再次证实了急性排斥反应时淋巴细胞表面大量的PD-1分子的表达;在急性排斥反应发生时外周血CD4+CD25highTreg数量增加,而使用抗PD-L1单克隆抗体抑制PD-1通路后CD4+CD25highTreg数量明显降低,而CD69作为T细胞活化信号在CD4+CD25-T细胞表面增加,说明了PD-1通路参与了肾移植术后急性排斥反应患者外周CD4+CD25highTreg的免疫耐受的诱导和维持。
【学位授予单位】:中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R699.2

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 曹川,李世荣,孙志成,王珍祥,罗高兴,吴军;外用环孢素A联合CTLA4Ig延长异体移植鼠耳存活的研究[J];中国修复重建外科杂志;2002年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 张旭东;郭树忠;韩岩;;复合组织同种异体移植的治疗进展[J];中华整形外科杂志;2006年01期
2 尚攀峰,赵彦宗,岳中瑾,秦大山;大鼠肾移植动脉套叠吻合技术的改良[J];中国修复重建外科杂志;2005年05期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 赵豫波;含ITIM模体的抑制性受体在器官移植免疫调节中的作用[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 许松梅;CTLA-4/IgG4融合蛋白在CHO/DG44细胞中的高效表达[D];四川大学;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 侯明钟,黄燮青,贾万新,滕可颖,胡必寺,蔡燕娴,王岚,黄一雄,章开衡;冷冻异体手指复合组织移植的临床评价[J];中国修复重建外科杂志;2000年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 伍秋生;向军;杨海龙;王树义;刘龙;谢晓冬;李旭;;肾移植术后存活10年以上18例报告[J];沈阳部队医药;1998年01期
2 ;泌尿及男性生殖系外科学[J];国外科技资料目录(医药卫生);2002年02期
3 秦超;张炜;;肾移植免疫耐受的临床研究进展[J];国际移植与血液净化杂志;2006年02期
4 万建省;王立明;;肾移植术后的营养治疗[J];国际移植与血液净化杂志;2006年05期
5 庄桂敏;阎成美;陶小琴;;肾移植受者自我效能与自我管理水平的相关性研究[J];护理管理杂志;2007年06期
6 王从义,姜汉英,曾凡军;用多聚酶链反应检测病毒DNA诊断肾移植受者术后人巨细胞病毒活性感染[J];同济医科大学学报;1994年03期
7 菲琳;;人疱疹病毒8与肾移植[J];国外医学情报;2000年01期
8 唐国强,万峰春,寇新明,郭同本;肾移植受者PRA对移植肾近期效果的影响[J];山东医药;2003年03期
9 秦阳华;肾移植后心血管疾病的现状、病因及治疗[J];国外医学.泌尿系统分册;2003年01期
10 朱斌;肾移植受者环孢素A血药浓度监测的回顾分析[J];现代医院;2003年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈永平;;肾移植受者中HCV感染[A];第二届传染病诊治高峰论坛暨2009年浙江省感染病、肝病学术年会论文汇编[C];2009年
2 邵琨;徐达;王祥慧;周佩军;赵菊平;李容炳;;汉族肾移植受者多重耐药基因1多态性的分布[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
3 邵琨;王祥慧;周佩军;赵菊平;李容炳;徐达;;多重耐药基因1对肾移植受者霉酚酸酯药代动力学的影响[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
4 余爱荣;白杨;辛华雯;吴笑春;刘慧明;李罄;;脂联素基因多态性与中国肾移植受者移植后糖尿病的相关性研究[A];第十二次全国临床药理学学术会议会议论文集[C];2010年
5 张晓辉;陈江华;吕蓉;吴建永;王逸民;张建国;;术前抗HCV阳性对肾移植受者的临床影响[A];2006年浙江省肾脏病学学术年会论文汇编[C];2006年
6 肖漓;石炳毅;何秀云;许晓光;韩永;周文强;黄海燕;高钰;;流式细胞微球捕获技术检测肾移植受者外周血细胞因子的应用[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
7 瞿立辉;陈江华;吴建永;王逸民;张建国;王苏娅;寿张飞;何强;;群体反应性抗体阳性肾移植受者围手术期治疗的临床研究[A];2005年浙江省器官移植学术会议论文汇编[C];2005年
8 韩飞;张晓辉;吕蓉;吴建永;陈莹;王慧萍;陈江华;;肾移植受者术前血清抗血管内皮细胞抗体水平对急性排斥反应的影响[A];2008年浙江省肾脏病学术年会论文汇编[C];2008年
9 李承;;肾移植受者术前焦虑发生情况及护理对策[A];全国重症监护护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2004年
10 徐海燕;何小舟;钟敏;邱国强;宋广来;屠筠;陈颖娣;巢志复;张学光;;肾移植受者外周血T淋巴细胞BAFF的表达与血清抗HLA抗体的相关性研究[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;小檗碱联用环孢素诱导免疫耐受后对肾功能的影响[N];中国医药报;2003年
2 一宣;我愿做医学科研路上的一块砖[N];常州日报;2006年
3 特约记者 龚怡;社会应给予器官移植受者更多关怀[N];家庭医生报;2006年
4 ;器官移植受者出征“奥运”[N];健康时报;2003年
5 董家鸿;免疫耐受:梦寐以求“上上之策”[N];健康报;2003年
6 ;移植点燃衰竭的希望[N];医药经济报;2004年
7 ;环孢素A药代动力学的个体差异对术后早期移植肾功能的影响[N];中国医药报;2003年
8 本报记者 贾晓惠;用第二次生命夺冠[N];科技日报;2003年
9 本报记者 李颖;我国器官移植居世界先进水平[N];科技日报;2006年
10 记者 陈莺;肾脏移植免疫制剂性价比高使患者受惠[N];民营经济报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王雅文;肾移植受者PD-1/PD-L1信号通路的基础和临床研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
2 李海禹;经鼻给予热休克蛋白60诱导免疫耐受对动脉粥样硬化的影响及其机制研究[D];华中科技大学;2012年
3 李聪然;肾移植受者HLA-G5的基础和临床研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
4 郝春艳;HSP60诱导免疫耐受抗动脉粥样硬化的作用机制实验研究[D];山西医科大学;2012年
5 王耘川;BMSCs联合骨髓移植建立嵌合体并诱导免疫耐受形成的机制研究[D];第四军医大学;2012年
6 钟禹成;经鼻腔给予oxLDL诱导免疫耐受在ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化发病中作用机制研究[D];华中科技大学;2012年
7 吕铁明;肾移植供、受者细胞因子及其受体基因多态性与表达水平研究[D];复旦大学;2005年
8 吴家清;移植肾慢性排斥时血清可溶性CD30表达的临床研究[D];南方医科大学;2009年
9 李川江;sCD30和HGF与移植肾急性排斥关系的临床研究[D];南方医科大学;2008年
10 徐高四;FCGR3B基因拷贝数多态性与肾脏疾病相关性和机制探讨[D];浙江大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王敏敏;免疫细胞功能分析在肾移植受者免疫状态监测中的应用[D];浙江大学;2011年
2 李冉;332例肾移植受者心血管事件危险因素分析及风险评估[D];中南大学;2012年
3 杨品娥;肾移植受者社会支持及其生存质量问题研究[D];广州医学院;2010年
4 刘乔飞;小鼠非清髓骨髓细胞移植诱导免疫耐受与抗肝癌研究[D];南开大学;2011年
5 周文强;巴利昔单抗对肾移植受者T细胞亚群变化的影响[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
6 胡林昆;肾移植受者外周血调节性T细胞及其亚群的临床研究[D];复旦大学;2010年
7 王贺;热休克蛋白60诱导免疫耐受抗动脉粥样硬化的作用机制研究[D];吉林大学;2013年
8 汪向飞;抗CD45RB抗体在诱导免疫耐受中对T淋巴细胞亚群的作用[D];暨南大学;2010年
9 刘潇聪;CTLA4Ig基因修饰人肝细胞株L02诱导免疫耐受的实验研究[D];第三军医大学;2010年
10 王淑伟;口服HSP60诱导免疫耐受抗动脉粥样硬化模型的建立及评价[D];吉林大学;2011年
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