收藏本站
《中国人民解放军军医进修学院》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

重组Sap2蛋白接种对免疫抑制小鼠系统感染白念珠菌的保护作用

焦泽龙  
【摘要】:背景 随着新治疗技术如骨髓移植、器官移植和强化治疗的开展及广谱抗生素和免疫抑制药物的广泛应用,临床上发生念珠菌感染的现象越来越普遍,而抗真菌药物由于其毒副作用和易产生耐药的局限性,使得白念珠菌在免疫低下患者中的发病率依然居高不下。由此,为了探索免疫低下患者中预防白念珠菌感染的措施,有必要建立适当的免疫抑制后系统感染念珠菌的动物模型,来模拟免疫功能低下患者的情况。我们同时也研究了重组念珠菌天冬氨酰蛋白酶(screted aspartyl proteinase, Sap)预防接种对免疫功能低下时系统感染念珠菌的保护作用。 第一部分 目的 建立免疫抑制小鼠系统感染白念珠菌模型,并观察其主要影响因素。 方法 1)以环磷酰胺(CTX)100mg/kg和200mg/kg两个剂量水平分别对6周龄BALB/c小鼠进行单次腹腔注射(各3组),48h后各对应组分别经尾静脉注射1×105、106、107/ml的白念珠菌,通过各组的死亡率来确定半数致死量。2)以50、100mg/kgCTX单次腹腔注射,观察外周血中白细胞、淋巴细胞计数被抑制的程度。3)分别采用4和8周龄小鼠来观察周龄对死亡率的影响。4)通过组织病理检查和肾组织真菌培养来验证模型。 结果 1)100mg/kgCTX+1×105/ml白念珠菌作用后,小鼠的死亡率接近50%。2)100mg/kgCTX单次腹腔注射后,外周血中白细胞、淋巴细胞计数下降超过30%。3)4周龄小鼠对模型建立条件的耐受性较差,死亡率高。4)组织病理检查和肾组织真菌培养结果表明模型小鼠肾脏中有菌丝生长或局灶性脓肿形成。 结论 1)成功建立了免疫抑制后系统感染白念珠菌的小鼠模型。2)模型建立条件下,白念珠菌对小鼠肾组织有高亲嗜性。 第二部分 目的 观察重组Sap2蛋白免疫接种3次(间隔1周)对模型小鼠抗白念珠菌系统感染的保护作用。 方法 6周龄BALB/c小鼠随机分成3组:1)间隔1周,重组Sap2+弗氏完全佐剂(CFA)胫前肌注射3次,第3次免疫后1周时,按体重单次腹腔注射100mg/kgCTX,48h后经尾静脉注射1×105/ml的白念珠菌,剂量为0.01ml/g。2)间隔1周,CFA胫前肌注射3次,其余干预同第1组。3)间隔1周,PBS胫前肌注射3次,其余干预同第1组。分别以这3种分组方式饲养小鼠,并在不同时间点检测下列指标,探讨模型小鼠的免疫功能动态变化:1)白念珠菌感染后21天内各组小鼠的死亡率。2)间接ELISA法测定各组小鼠血清特异性IgG抗体水平。3)ELISA法测定小鼠血清中IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α的含量。4)流式细胞仪分析小鼠脾淋巴细胞中的CD4+/CD8+T细胞比例。5)测定各组小鼠肾脏中的荷菌量。6)比较各组小鼠脾脏重量。7)对各组小鼠的肾、肝、肺组织进行组织病理检查。 结果 1)免疫组小鼠的死亡率显著低于对照组。2)免疫组小鼠血清中的特异性IgG抗体水平的显著高于对照组。3)念珠菌攻击后的第1、4、7天期间,IL-2、IL-4、IFN-γ知TNF-α在第4天时的测量值高于第1和第7天水平。其中TNF-α的测量值始终低于正常对照水平。4)念珠菌攻击后的第1、4、7天期间,各组小鼠的CD4+/CD8+比值呈现相似的变化,其中第4天时的测量值低于第1和第7天水平。5)免疫组小鼠的肾脏荷菌量显著低于对照组。6)免疫组小鼠的脾脏重量显著高于对照组。7)免疫组小鼠肾组织中检出菌丝和局灶性脓肿的发生率低于对照组。 结论: 1)重组Sap2蛋白间隔1周免疫接种3次对模型小鼠抗白念珠菌系统感染具有一定的保护作用。 2)重组Sap2蛋白间隔1周免疫接种3次后会导致小鼠出现脾大。
【学位授予单位】:中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R392.1

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王革新;王馥香;刘安丽;;免疫抑制小鼠肺白色念珠菌病病理研究[J];包头医学院学报;2010年01期
2 吴绍熙;真菌病的研究现状与对策[J];第二军医大学学报;2001年11期
3 周东耀,何今贤,汪爽,吕苏成;白色念珠菌对人肺上皮细胞的黏附作用及其影响因素[J];广东医学;2000年12期
4 李蕾;邹先彪;杨宇光;;白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶真核表达质粒pcDNA3.1/SAP2的构建[J];中国感染控制杂志;2008年04期
5 沈继川,谢奇峰;真菌DNA免疫的研究进展[J];国外医学(流行病学传染病学分册);2002年01期
6 徐海帆,李汉贤;免疫抑制小鼠不同时间环磷酰胺的血药浓度与免疫功能[J];南华大学学报(医学版);2001年06期
7 章涛,滕维亚,宋绍辉;呼吸道真菌感染临床特点及防治对策[J];临床荟萃;2000年10期
8 高芃,钱嘉林,刘长喜,严卫星;环磷酰胺对小鼠免疫抑制的动物模型建立[J];环境与职业医学;2004年04期
9 燕华玲;培养白念珠菌菌丝相的条件及影响因素[J];中国麻风皮肤病杂志;2003年05期
10 傅颖媛;丁务高;陈开森;况南珍;曾小平;周智兴;许静;;系统感染白色念珠菌的Balb/c小鼠免疫功能探讨[J];免疫学杂志;2008年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王雷;王治东;胡海亮;张学清;陈茂胜;薛绍礼;陈英;;外周血网织红细胞和T淋巴细胞亚群用于辐射损伤快速剂量估算的可行性研究[J];癌变·畸变·突变;2011年06期
2 谢金文;万勇;余为一;;CD14分子的研究进展[J];安徽农学通报;2006年04期
3 王静;余为一;李林;舒文祥;周丽莎;;小鼠CD19基因部分片段的克隆及其鉴定[J];安徽农业科学;2007年25期
4 朱静文;余为一;;1株抗鸡CD8α链单克隆抗体的鉴定[J];安徽农业科学;2011年20期
5 韦明宇;陆建明;赵武;何颖;陈忠伟;梁保忠;苏乾莲;梁家幸;金锋;胡旭;孙志勇;赖胜基;胡庭俊;;NS复合乳酸菌制剂对母猪生产性能和免疫水平的影响[J];安徽农业科学;2012年05期
6 周丽珍,沈谷雨;717份呼吸道标本真菌感染回顾性分析[J];安徽卫生职业技术学院学报;2004年02期
7 史艳侠;张晓实;夏建川;李永强;徐瑞华;韩文杰;张景航;管忠震;姜文奇;;B-NHL患者NK细胞中CD16ζ表达及利妥昔单抗与LAK细胞的联合抗瘤作用[J];癌症;2007年08期
8 谢国化;鲍鸣;仲大莲;余为一;李槿年;;编码鸡CD8α链无信号肽基因片段的克隆与表达[J];安徽农业大学学报;2006年01期
9 赵成国;许文龙;;肺炎支原体感染患儿血清sIL-2R、IL-5、IL-10的检测及其临床意义[J];蚌埠医学院学报;2009年01期
10 施弦;;布地奈德联合干扰素雾化吸入治疗小儿急性感染性喉炎疗效分析[J];浙江中医药大学学报;2012年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王月英;吴红英;李德冠;路璐;孟爱民;王汝勤;张良安;王彦;;E838对环磷酰胺所致IRM-2小鼠白细胞减少症的防治研究[A];第十届中国科协年会论文集(三)[C];2008年
2 陈锦瑶;宋阳;张立实;;阿特拉津对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响[A];低碳生活与健康损害论坛——中国环境诱变剂学会风险评价专业委员会全国第十三届学术会议暨第四届第5次委员会会议论文集[C];2011年
3 叶明霞;周顺长;;环磷酰胺致BALB/c小鼠肝损伤的组织学研究[A];中国实验动物学会第七届学术年会论文集[C];2006年
4 祁振强;胡广大;杨照华;张福恩;;一种基于免疫反馈原理的新型控制算法[A];2003中国控制与决策学术年会论文集[C];2003年
5 马雪云;牛钟相;;不同动物血清补体对大肠杆菌的杀灭效果[A];山东农业微生物技术学术研讨会论文集[C];2006年
6 孙淑娟;鲁春燕;李广芸;;真菌感染实验室诊断研究进展[A];2008年山东省医院药学学术研讨会论文汇编[C];2008年
7 田刚;陈代文;;免疫调节肽研究进展[A];饲料营养研究进展——第五届全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2006年
8 陈庆;李健;黄一帆;;“芪苓”制剂对免疫抑制小鼠血清蛋白含量及转氨酶活性的影响[A];福建省科协第八届学术年会分会场“转变饲养方式,促进海西畜牧业和谐发展”学术年会论文集[C];2008年
9 孔庆波;;两种转移因子对犬免疫应答相关细胞因子IL-2和IL-12分泌的影响[A];中国畜牧兽医学会养犬学分会第十二次全国养犬学术研讨会论文集[C];2007年
10 黄春玲;黄瑞华;孙钦伟;李延森;吴宝江;邢军;杨晓静;陈军;赵茹茜;;梅山猪母体极端低蛋白对后代猪脾脏生长发育及免疫相关基因的影响[A];中国畜牧兽医学会养猪学分会2009年学术年会“回盛生物”杯全国养猪技术论文大赛论文集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘栋;畜禽补体C3d基因克隆及序列分析和重组鸡C3d免疫佐剂效果研究[D];山东农业大学;2010年
2 颜培宇;不同穴位针刺对免疫抑制大鼠神经肽相关基因表达及免疫调节作用的分子机制研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
3 徐先伟;定喘穴埋针对哮喘大鼠STAT6 EOTAXIN C-FOS蛋白mRNA表达及相关因子的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年
4 张皓;针刺镇痛机制中内源性SS与信号转导机制的研究[D];山东中医药大学;2010年
5 吴达;甘肃棘豆生物碱抗肝癌活性及其对荷瘤小鼠免疫功能影响的研究[D];西北农林科技大学;2010年
6 黄桂锋;培土生金法治疗脾气虚变应性鼻炎大鼠的实验研究[D];成都中医药大学;2010年
7 白轶;口腔癌脉管浸润及eNOS、ICAM-1、E-selectin基因多态性的研究[D];武汉大学;2009年
8 王茂叶;递增负荷运动对大鼠下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴的影响研究[D];山东师范大学;2011年
9 赵菊花;圣愈汤传统煎剂和配方颗粒对骨髓抑制小鼠造血调控的实验研究[D];成都中医药大学;2011年
10 田晶;2型重组腺相关病毒载体介导β珠蛋白基因治疗地中海贫血的实验研究[D];中南大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 赵付伟;猪Ⅲ型干扰素IFN-λ1的克隆、表达和抗病毒活性研究[D];华中农业大学;2010年
2 王艳伟;PRRSV感染激活RANTES产生的信号通路研究[D];华中农业大学;2010年
3 白家媛;樱桃谷鸭CD8α胞外区多肽的原核表达、抗体制备及初步应用[D];华中农业大学;2010年
4 余莹;溃结宁膏穴位敷贴治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎的临床观察及对血清IL-4的影响[D];湖南中医药大学;2010年
5 陈昌飞;溃结宁膏穴位敷贴治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎的临床观察及对血清IFN-r 含量的影响[D];湖南中医药大学;2010年
6 王建立;猪圆环病毒2型感染对猪肺泡巨噬细胞模式识别受体转录水平的影响[D];中国农业科学院;2010年
7 倪金龙;外阴硬化性苔藓与HLA-DQB1基因多态性的相关性的研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
8 李艳丽;慢性乙型肝炎中医证型与IL-4相关性研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
9 朱志中;针刺结合康复训练对免疫抑制大鼠细胞免疫功能的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年
10 李彩文;硝酸舍他康唑凝胶剂的制备及其质量研究[D];天津理工大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨琼,宋祥福,王桂云;系统性白色念珠菌感染小鼠动物模型的研究[J];东北师大学报(自然科学版);2005年02期
2 吴绍熙;真菌病的研究现状与对策[J];第二军医大学学报;2001年11期
3 余传霖;;白色念珠菌与真核细胞的相互作用[J];国外医学(微生物学分册);1995年03期
4 汪运山,刘宗印,申红,潘广锦,姜莉华,孙玉萍,张红;锌对环磷酰胺引起的小鼠胸腺和脾脏重量变化的影响[J];广东微量元素科学;1996年10期
5 吴克枫,冯燕梅,俞红,刘佳,高敏;不同剂量环磷酰胺对小鼠的免疫毒性研究[J];贵州医药;1999年02期
6 牟兆钦,尹秀云,陈建魁;牛奶培养基用于鉴定白色念珠菌芽管和厚膜孢子[J];临床检验杂志;1997年02期
7 高芃,钱嘉林,刘长喜,严卫星;环磷酰胺对小鼠免疫抑制的动物模型建立[J];环境与职业医学;2004年04期
8 曾小平,傅颖媛,况南珍;抗白色念珠菌IgY的稳定性及体内抗感染活性研究[J];免疫学杂志;2005年04期
9 赵弋清,罗霞,陈东辉,余梦瑶,杨志荣;不同剂量环磷酰胺诱导正常小鼠免疫抑制的对比研究[J];免疫学杂志;2005年S1期
10 丁传林,姚堃,周瑶玺,张智清,候云德;GM-CSF与IFN-r联合刺激人PBMC产生TNF-α[J];免疫学杂志;1994年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 莫冰,傅颖媛,曾小平,况南珍,黄孝天;抗白念珠菌感染特异性免疫实验研究[J];中国皮肤性病学杂志;2003年02期
2 叶夏云,骆志成,武三卯,李文竹,周晓黎,薛晓云;白念珠菌细胞外磷脂酶活力与其对氟康唑耐药性之间关系的研究[J];西北国防医学杂志;2004年02期
3 张玉昆,唐英春,张扣兴;大肠埃希菌和白念珠菌混合感染小鼠中性粒细胞和巨噬细胞功能的研究[J];中国抗感染化疗杂志;2004年02期
4 付萍,刘晓莉,李学平;白念珠菌磷脂酶与其毒力关系的研究[J];临床皮肤科杂志;2005年03期
5 叶夏云,钟建庭,周晓黎,薛晓云;pH值对白念珠菌分泌性蛋白酶产量的影响[J];中国麻风皮肤病杂志;2005年05期
6 李铮;戴文英;;白念珠菌在妇产科临床上的意义[J];大连医科大学学报;1986年02期
7 张稠生;陈明;李秀凯;;白念珠菌的表面抗原及其抗体[J];国际皮肤性病学杂志;1988年04期
8 郭宁如,沈永年,吕桂霞,吴绍熙;不同免疫状态下的白念珠菌对小鼠肠粘膜的粘附及影响[J];中华皮肤科杂志;1994年02期
9 姚敬业!230061,青木茂治,周家华!230061,久和彰江,杨远丽!230061,仲村健二郎,郑芹!230061;中国合肥与日本新两地白念珠菌分离株的生物学特性比较[J];中华皮肤科杂志;1999年01期
10 秦振宇;延长培养时间氟康唑对白念珠菌活力的影响[J];国外医学.皮肤性病学分册;1999年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 阎澜;李妙海;曹永兵;高平挥;王彦;姜远英;;白念珠菌耐药新蛋白——交替氧化酶[A];药学发展前沿论坛及药理学博士论坛论文集[C];2008年
2 徐永豪;李春阳;;耐氟康唑白念珠菌所致外阴阴道念珠菌病1例[A];中华医学会第14次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2008年
3 陈兴;侯天文;白云;李玮;陈晶;郭晓丽;刘艳丽;;住院患者念珠菌菌尿的调查[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
4 张欣;苏雯静;李巍;安金刚;刘玉峰;;单克隆天然抗体3B4抑制白念珠菌芽管形成的机制初探[A];中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2006年
5 郭仁勇;;白念珠菌聚苯乙烯黏附增强基因1的研究进展[A];2008年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2008年
6 刘泽虎;吕雪莲;吕桂霞;沈永年;徐宏彬;陈伟;胡素泉;刘维达;;烟曲霉选择性培养基的实验研究[A];2008全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2008年
7 贾鑫明;曹永兵;王彦;姜远英;;白念珠菌RTA2是钙调神经磷酸酶通路介导的耐药性产生的靶基因[A];药学发展前沿论坛及药理学博士论坛论文集[C];2008年
8 陈官芝;马海丽;;念珠菌黏附特性对比研究[A];2007中华医学会第二次医学真菌学术会议暨医学真菌实验室研究技术新进展学习班论文汇编[C];2007年
9 秦晓峰;吴建华;黄懿;张丽娟;姜远英;顾军;;微量稀释法测定白念珠菌对氟康唑的MIC值及两种药敏试验的比较[A];2008全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2008年
10 杨继君;陈兴平;;白念珠菌生物膜形成不同时期对氟康唑敏感性的初步研究[A];“环境与健康”学术研讨会论文摘要集[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 邹先彪;白念珠菌感染的预警[N];大众卫生报;2005年
2 中国医科院皮肤病研究所教授 吴绍熙;从误诊病例谈临床思维[N];健康报;2007年
3 健康时报实习记者  梁璐;瘙痒部位不同用药有别[N];健康时报;2006年
4 范高明;艾格生蛋黄免疫球蛋白 筑起国民免疫新长城[N];中国高新技术产业导报;2003年
5 丁洁 传宝;太钢成功研发新型抗菌不锈钢[N];太原日报;2006年
6 记者 陈强 通讯员 蒋淑芬 贾宁;太钢成功研发出新型抗菌不锈钢[N];中国冶金报;2006年
7 记者 齐作权 通讯员 黄传宝;永恒抗菌不锈钢在太钢问世[N];山西日报;2006年
8 记者衣晓峰 靳万庆 通讯员庄磊;临床研究证实甲真菌病病原菌种发生变迁[N];中国中医药报;2003年
9 ;抗菌不锈钢在沈阳研制成功[N];今日信息报;2004年
10 本报记者 包斯文;经济新颖和抗菌型不锈钢市场前景广阔[N];中国冶金报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 焦泽龙;重组Sap2蛋白接种对免疫抑制小鼠系统感染白念珠菌的保护作用[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
2 许懿;小檗碱与氟康唑协同抗耐药白念珠菌的作用机制研究[D];第二军医大学;2010年
3 王琳;白念珠菌耐药相关蛋白Rta2p与脂筏关系研究[D];第二军医大学;2012年
4 曹永兵;转录因子Caplp促进白念珠菌抗药性形成的分子机制研究[D];第二军医大学;2004年
5 刘伟;白念珠菌CaSCH9基因功能研究[D];天津大学;2010年
6 吴建华;白念珠菌细胞周期及抗真菌中药单体对其影响的研究[D];第二军医大学;2003年
7 贺志彬;白念珠菌耐药基因CDR1基因表达调控机制的初步研究[D];第二军医大学;2003年
8 陈孙孝;白念珠菌钙调蛋白基因(CMD1)缺陷菌株的构建及CMD1功能性基因的初步研究[D];第二军医大学;2001年
9 陈腊梅;携带G487T和T916C突变的白念珠菌耐药基因表达与氟康唑耐药关系的研究[D];山东大学;2010年
10 王惠平;应用滚环扩增技术对白念珠菌耐氟康唑相关基因点突变的研究[D];天津医科大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 仇萌;白念珠菌Sap2快速检测方法的建立[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年
2 刘朝红;汉防己甲素对氟康唑抗白念珠菌生物膜增效活性的初步研究[D];暨南大学;2010年
3 钟毅;白念珠菌苹果酸脱氢酶的结构及功能初步研究[D];中山大学;2012年
4 张蕾;紫外线对白念珠菌生长的影响[D];福建医科大学;2012年
5 陈文峰;双组份信号转导系统抑制剂体外抗白念珠菌活性的研究[D];福建医科大学;2011年
6 商庆华;鱼腥草素钠抗白念珠菌的作用及机制研究[D];福建中医药大学;2012年
7 董玲玲;生物被膜型白念珠菌代谢物分析及代谢变化的初步研究[D];第二军医大学;2010年
8 郭雅莉;白念珠菌多位点序列分型研究[D];天津医科大学;2012年
9 黄悦;白念珠菌HOG基因致病相关性研究[D];福建医科大学;2010年
10 张玉倩;BDSF抑制白念珠菌生物膜的形成[D];复旦大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026