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富血小板血浆对人原代脂肪来源干细胞增殖的影响

杨玲玲  
【摘要】:目的观察富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对人类原代脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)的数量、生长速率的影响;以及ADSCs转化成脂及成骨的分化潜能。 方法获取6例腹部脂肪组织及肘上静脉血液均来源于同一吸脂术女性患者;脂肪组织无菌条件下提取出含有原代ADSCs的基质血管成分(stromal vascular fraction, SVF);采集同一吸脂术患者的的静脉血液,离心制备PRP。采用Cellometer细胞计数仪辅助AO-PI染色法对SVF活细胞进行细胞计数;采用血液分析仪对PRP进行血小板计数。体外试验将细胞分为实验组与对照组,实验组以含5%、10%、15%PRP及对照组为10%胎牛血清(fetus bovine serum,FBS)的配制的培养液进行实验干预。Cellometer田胞计数仪检测实验组、对照组的培养条件对原代ADSCs细胞在不同时段24小时,48小时,72小时,96小时细胞数量值。 结果(1)本实验SVF转化成骨及成脂试验阳性;第三代ADSCs通过Mark检测结果为CD73、CD90阳性,HLA-DR、CD45阴性;逆推验证该细胞为ADSCs,并且反向推论从SVF中可获取原代ADSCs;(2)通过离心法可获得PRP中的血小板约占全血的4倍;(3)实验组较对照组在24小时,48小时,72小时,96小时的ADSCs数量增多,密度增大,其中48小时与96小时的时段中,不同浓度的PRP对ADSCs增殖有明显促进作用(P值0.05),具有统计学意义。针对这两个时段进一步采用LSD法进行组间两两比较,可认为72小时的时段中15%PRP组细胞数量值高于对照组和5%PRP组(P值0.05);96h时段中除5%PRP与对照组差别无统计学意义(P值0.05)外,其余组间内的细胞数量值的比较均有有统计学意义(P值0.05) 结论体外培养实验中,PRP对人原代ADSCs的增殖有促进作用。


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